D-vitamin och fosterbenslängdstudie (VITFBL)

Övergripande:

Odense Child Cohort Study (OCC) är en befolkningsbaserad kohortstudie som omfattar gravida kvinnor som rekryterats mellan 1 januari 2010 och 31 december 2012. Alla kvinnor som var gravida i Odense kommun under denna tid var berättigade att delta och 6 707 kvinnor kontaktades direkt med rekryteringsmaterial.

Studien överensstämde med Helsingforsdeklarationen och godkändes av den regionala vetenskapsetiska kommittén för Syddanmark, nr. S-20090130. Alla deltagare gav informerat samtycke. Från en befolkningsbas på 6 707 gravida kvinnor skrevs 2 874 (42,9%) in i OCC fram till den 31 december 2012. Barnen kommer att följas fram till 18 års ålder.

Serumprover togs i tidig graviditet (GA 2-25 veckor), sen graviditet (GA 26-30 veckor), moderns serum och navelsträngsblod vid födseln och från barnen tillsammans med allmänna undersökningar vid åldrarna 3 månader, 1 år, 3 år.

Frågeformulär fylldes i av familjerna under tidig graviditet, sen graviditet, efter födseln och vid tidpunkterna för klinisk undersökning av barnen.

Registerdata om hälsovariabler var vidare tillgängliga från de danska registren.

Mål:

Vitamin D- och benlängdsstudien undersöker sambandet mellan biomarkören 25(OH)D i moderns serum och längden på fostrets lårben och överarmsbenet under mitten av graviditeten.

Metod:

25(OH)D-analys: Serum lagrades vid -80º Celsius fram till analys, som utfördes med vätskekromatografi masspektrometri (LC-MS/MS). Trippeldeuterium märkt 25(OH)vitamin D3 tillsattes till serumprover som intern standard och deproteiniserades med ZnSO4 i metanol, centrifugerades vid 2750 g i 10 minuter och 100 μl injicerades på TurboFlow-kolonnen (Thermo Scientific) på LC-MS /FRÖKEN. LC-MS/MS bestod av ett Thermo Scientific TLX1-system kopplat till en Thermo Scientific Vantage TSQ. 25(OH)D2 och 25(OH)D3 koncentrerades på en Thermo Scientific Cyclone P 50 x 1,0 mm kolonn och spolades tillbaka på den analytiska kolonnen, Phenomenex Gemini C18 50 x 3,0 mm och eluerades från den analytiska kolonnen med en gradient. Mobila faser var A: 10 mM NH4Ac i vatten och B: 10 mM NH4Ac i metanol. Humant serum spetsades med lämpliga mängder av 25(OH)D2 och 25(OH)D3 för att producera sexpunktskalibreringskurvor (vägde 1/x2) och 3 nivåer av QC-prover (låg, medel, hög). Metoden kalibrerades mot NIST-standard 972.25 C3-epimeren av D3 detekterades tillsammans med D3 och de två kunde inte särskiljas från varandra. Lägsta detekterbara koncentrationerna var 0,15 nM för både D2 och D3. Värden för D2 och D3 beaktades endast om de översteg 6,5 nM.

Studien av vitamin D och benlängd:

D-vitamin och benlängd i mitten av graviditeten.

- I 986 serumprover som tagits i början av graviditeten undersöktes nivåerna av serum 25(OH)D av LC-MS/. Frågeformulär och medicinsk filinformation användes för att bestämma de faktorer som hade inflytande på 25(OH)D-nivåer och benlängd under graviditeten efter halva tiden genom multipel linjär regression.