Vitamin D og føtal beinlengdestudie (VITFBL)

Alt i alt:

Odense Child Cohort Study (OCC) er en populasjonsbasert kohortstudie som omfatter gravide kvinner rekruttert mellom 1. januar 2010 og 31. desember 2012. Alle kvinner som var gravide i Odense kommune i løpet av denne tiden var kvalifisert for deltakelse, og 6 707 kvinner ble kontaktet direkte med rekrutteringsmateriell.

Studien var i samsvar med Helsingfors-erklæringen og ble godkjent av den regionale vitenskapsetiske komité for Syddanmark, nr. S-20090130. Alle deltakerne ga informert samtykke. Fra en befolkningsbase på 6 707 gravide kvinner meldte 2 874 (42,9 %) seg inn i OCC frem til 31. desember 2012. Barna vil følges frem til fylte 18 år.

Serumprøver ble tatt tidlig i svangerskapet (GA 2-25 uker), sent i svangerskapet (GA 26-30 uker), mors serum og navlestrengsblod ved fødselen, og fra barna sammen med generelle undersøkelser i alderen 3 måneder, 1 år, 3 år.

Spørreskjemaer ble fylt ut av familiene tidlig i svangerskapet, sent i svangerskapet, etter fødselen og ved tidspunktene for klinisk undersøkelse av barna.

Registerdata om helsevariabler var videre tilgjengelig fra de danske registrene.

Objektiv:

Vitamin D- og benlengdestudien undersøker forholdet mellom biomarkøren 25(OH)D i mors serum og lengden på føtal femur og humerusben ved midtveis i svangerskapet.

Metode:

25(OH)D-analyse: Serum ble lagret ved -80º Celsius frem til analyse, som ble utført ved væskekromatografi massespektrometri (LC-MS/MS). Trippel deuterium merket 25(OH) vitamin D3 ble tilsatt serumprøver som intern standard og deproteinisert med ZnSO4 i metanol, sentrifugert ved 2750 g i 10 minutter, og 100 μl ble injisert på TurboFlow-kolonnen (Thermo Scientific) på LC-MS /MS. LC-MS/MS besto av et Thermo Scientific TLX1-system koblet til en Thermo Scientific Vantage TSQ. 25(OH)D2 og 25(OH)D3 ble konsentrert på en Thermo Scientific Cyclone P 50 x 1,0 mm kolonne og tilbakespylet på analytisk kolonne, Phenomenex Gemini C18 50 x 3,0 mm og eluert fra analysekolonnen med en gradient. Mobile faser var A: 10 mM NH4Ac i vann og B: 10 mM NH4Ac i metanol. Humant serum ble tilsatt passende mengder 25(OH)D2 og 25(OH)D3 for å produsere sekspunkts kalibreringskurver (veid 1/x2) og 3 nivåer av QC-prøver (lav, middels, høy). Metoden ble kalibrert mot NIST-standard 972.25 C3-epimeren til D3 ble påvist sammen med D3, og de to kunne ikke skilles fra hverandre. Laveste påvisbare konsentrasjoner var 0,15 nM for både D2 og D3. Verdiene for D2 og D3 ble bare vurdert hvis de var over 6,5 nM.

Studien av vitamin D og benlengde:

Vitamin D og benlengde i svangerskapet midtveis.

- I 986 serumprøver samlet tidlig i svangerskapet ble nivåene av serum 25(OH)D undersøkt av LC-MS/. Spørreskjema og medisinsk filinformasjon ble brukt til å bestemme faktorene som hadde innflytelse på 25(OH)D-nivåer og beinlengde i midtveis graviditet ved multippel lineær regresjon.