Badanie długości kości płodu i witaminy D (VITFBL)

Ogólnie:

Odense Child Cohort Study (OCC) to populacyjne badanie kohortowe obejmujące kobiety w ciąży rekrutowane między 1 stycznia 2010 a 31 grudnia 2012. Wszystkie kobiety, które były w ciąży w gminie Odense w tym czasie, kwalifikowały się do udziału, a 6707 kobiet otrzymało bezpośrednio materiały rekrutacyjne.

Badanie było zgodne z Deklaracją Helsińską i zostało zatwierdzone przez Regionalną Naukową Komisję Etyczną dla Południowej Danii, nr. S-20090130. Wszyscy uczestnicy wyrazili świadomą zgodę. Z populacji liczącej 6 707 kobiet w ciąży 2 874 (42,9%) zapisało się do OCC do 31 grudnia 2012 r. Dzieci będą obserwowane do 18 roku życia.

Próbki surowicy pobierano we wczesnej ciąży (GA 2-25 tyg.), późnej ciąży (GA 26-30 tyg.), surowicy matki i krwi pępowinowej przy urodzeniu oraz od dzieci wraz z badaniami ogólnymi w wieku 3 miesięcy, 1 rok, 3 lata. lata.

Ankiety były wypełniane przez rodziny we wczesnej ciąży, późnej ciąży, po urodzeniu oraz w czasie badania klinicznego dzieci.

Dane rejestrowe dotyczące zmiennych dotyczących zdrowia były dalej dostępne w duńskich rejestrach.

Cel:

Badanie witaminy D i długości kości bada związek między biomarkerem 25(OH)D w surowicy matki a długością kości udowej i kości ramiennej płodu w połowie ciąży.

Metoda:

Analiza 25(OH)D: Surowicę przechowywano w temperaturze -80°C do czasu analizy, którą przeprowadzono metodą chromatografii cieczowej ze spektrometrią mas (LC-MS/MS). Potrójny deuter oznaczony jako 25(OH)witamina D3 dodano do próbek surowicy jako standard wewnętrzny i odbiałczono ZnSO4 w metanolu, odwirowano przy 2750 g przez 10 minut, a 100 μl wstrzyknięto na kolumnę TurboFlow (Thermo Scientific) na LC-MS /SM. LC-MS/MS składał się z systemu Thermo Scientific TLX1 połączonego z Thermo Scientific Vantage TSQ. 25(OH)D2 i 25(OH)D3 zatężono na kolumnie Thermo Scientific Cyclone P 50 x 1,0 mm i przepłukano wstecznie na kolumnie analitycznej Phenomenex Gemini C18 50 x 3,0 mm i eluowano z kolumny analitycznej gradientem. Fazy ​​ruchome to A: 10 mM NH4Ac w wodzie i B: 10 mM NH4Ac w metanolu. Do ludzkiej surowicy dodano odpowiednie ilości 25(OH)D2 i 25(OH)D3 w celu uzyskania sześciopunktowych krzywych kalibracyjnych (zważonych 1/x2) i 3 poziomów próbek QC (niski, średni, wysoki). Metodę skalibrowano względem standardu NIST 972.25 Epimer C3 z D3 wykryto razem z D3 i tych dwóch nie można było odróżnić od siebie. Najniższe wykrywalne stężenia wynosiły 0,15 nM zarówno dla D2, jak i D3. Wartości D2 i D3 były brane pod uwagę tylko wtedy, gdy przekraczały 6,5 nM.

Badanie witaminy D i długości kości:

Witamina D i długość kości w połowie ciąży.

- W 986 próbkach surowicy pobranych we wczesnej ciąży zbadano poziom 25(OH)D w surowicy metodą LC-MS/. Kwestionariusz i informacje z dokumentacji medycznej wykorzystano do określenia czynników wpływających na poziomy 25(OH)D i długość kości w ciąży donoszonej za pomocą wielokrotnej regresji liniowej.