Špatná reakce na stimulaci vaječníků v programu in vitro fertilizace (IVF).

Bezpečnost léčby oplodněním in vitro je vysoce ohrožena nevyzpytatelnou individuální variabilitou vůči kontrolované ovariální hyperstimulaci (COH). Jedním z různorodých prediktivních faktorů je AMH, který je považován za nejcitlivější marker. V dnešní době by praktiky farmakogenetiky mohly předvídat úspěšnost stimulace a tak přizpůsobit léčbu tak, aby dosáhla pokroku v péči o pacienty. Protože účinnost dávky folikuly stimulujícího hormonu (FSH) do značné míry souvisí s úspěšností COH, je gen FSHR považován za primárního kandidáta pro vysvětlení rozdílu ve výsledcích COH. Kromě toho jsou estrogenové receptory důležitými geny pro zlepšení diagnostika a léčba neplodnosti.

Materiály a metody: Počínaje červnem 2013 budou páry s neobjasněnou neplodností, které hledají první pokus o léčebný cyklus IVF/ICSI, přijímány do "AL-Shark Al-Awsat fertility Center". Do této prospektivní studie se zapíše 216 párů splňujících naše kritéria pro zařazení. tuto studii po informovaném souhlasu. Ovariální stimulace bude provedena podle protokolu antagonisty GnRH s fixní denní ranní dávkou lidského menopauzálního gonadotropinu (HMG) [Merional® 75 IU ampule, institut IBSA] intramuskulární injekcí počínaje dnem cyklu 2. Na základě tělesné hmotnosti pacientky indexu a hormonálního profilu bude denní dávka HMG upravena na (225 IU) pro účastníky s hladinami AMH > 1,5 ng/ml a/nebo hladinami FSH ≤ 8 mIU/ml a na (300 IU) pro účastníky s hladinami AMH < 1,5 ng/ml a/nebo hladiny FSH > 8 mIU/ml, budou dávky zvýšeny o 75 IU v případech s BMI > 30 kg/m2. V den 2 menstruačního cyklu bude dávka HMG zahájena pro všechny pacientky a bude udržována po dobu 9-11 dnů podle individuální ovariální odpovědi každého účastníka hodnocené transvaginální ultrazvukovou folikulometrií počínaje 7. dnem cyklu a pokračovat každý druhý den. den do dne injekce lidského choriového gonadotropinu (hCG). V den cyklu 7 bude podáván antagonista GnRH Cetrorelix 0,25 mg [Cetrotide® 0,25 mg injekční stříkačky, Merck Serono] jako denní subkutánní injekce a bude pokračovat až do dne spuštění ovulace. Nakonec, když alespoň 3 folikuly dosáhnou průměru 17 mm, bude ovulace spuštěna jedinou intramuskulární injekcí 10 000 IU hCG [Choriomon® 5000 IU ampule, institut IBSA]. O 36 hodin později se provede odběr oocytů a bude řízen transvaginálním ultrazvukem. Podle našeho primárního výsledku, počtu odebraných oocytů, budou pacientky klasifikovány jako slabé respondéry (4 oocyty nebo méně) a budou považovány za dobré respondéry, pokud produkovaly 5 nebo více oocytů. Skupina dobrých respondentů bude sloužit jako kontrolní skupina.

Genotypizace: Každému pacientovi bude odebrána periferní krev do zkumavky obsahující EDTA. Genomová DNA bude extrahována z lymfocytů periferní krve plně automatizovaným systémem QIAcube pomocí sady QIAamp DNA Blood Mini Kit (250) plus sada příslušenství QIAamp DNA Blood Mini B, kat. Ne. 1043369. Detekce polymorfismů ESR2 (+1730G>A) (rs4986938), FSHR p.Thr307Ala (c.919A>G, rs6165) a FSHR p.Asn680Ser (c.2039A>G, rs6166 bude provedena pomocí systému SNPs) polymerázovou řetězovou reakcí v reálném čase (PCR). Primery a sondy poskytne aplikovaný biosystém, Life Technologies. Testy budou provedeny s TaqMan Universal Master Mix.

Statistická analýza: Data budou statisticky popsána z hlediska průměru a směrodatné odchylky pro kvantitativní údaje a četnosti (počet případů) a relativní četnosti (v procentech) pro kvalitativní údaje. Hardy-Weinbergova (H-W) rovnováha pro každý polymorfismus bude testována pomocí Chí-kvadrát testu. Porovnání kvantitativních proměnných bude provedeno pomocí nepárového t testu při porovnání 2 kategorií a jednosměrné analýzy rozptylu (ANOVA) s post hoc testem při porovnání více než 2 kategorií.

Pro porovnání kategoriálních dat bude proveden Chí kvadrát test. Přesný test se použije místo toho, když je očekávaná frekvence nižší než 5.

Genotyp a frekvence alel budou porovnány mezi nemocí a kontrolními skupinami pomocí chí-kvadrát testů. Bude vypočítán poměr šancí (OR) s 95% intervalem spolehlivosti. Hodnota pravděpodobnosti (P ​​hodnota) menší než 0,05 bude považována za statisticky významnou. Všechny statistické výpočty budou provedeny pomocí SPSS (Statistical Package for the Social Science; SPSS Inc., Chicago, IL, USA) verze 22.