Schlechte ovarielle Stimulationsreaktion im In-vitro-Fertilisationsprogramm (IVF).

Die Sicherheit der In-vitro-Fertilisationsbehandlung wird durch die unberechenbare individuelle Variabilität der kontrollierten ovariellen Hyperstimulation (COH) stark in Frage gestellt. Einer der vielfältigen Vorhersagefaktoren ist der AMH, der als empfindlichster Marker gilt. Heutzutage könnten Praktiken der Pharmakogenetik den Stimulationserfolg vorhersagen und so die Behandlung maßschneidern, um Fortschritte in der Patientenversorgung zu erreichen. Da die Effizienz der Dosis des follikelstimulierenden Hormons (FSH) stark mit dem Erfolg von COH zusammenhängt, wird das FSHR-Gen als primärer Kandidat für die Erklärung der unterschiedlichen COH-Ergebnisse behandelt. Darüber hinaus sind die Östrogenrezeptoren wichtige Gene für Verbesserungen der Diagnose und Behandlung von Unfruchtbarkeit.

Materialien und Methoden: Ab Juni 2013 werden Paare mit ungeklärter Unfruchtbarkeit, die den ersten Versuch eines IVF/ICSI-Behandlungszyklus anstreben, im "AL Shark Al-Awsat Fruchtbarkeitszentrum" rekrutiert. In diese prospektive Studie werden 216 Paare aufgenommen, die unsere Einschlusskriterien erfüllen diese Studie nach Einverständniserklärung. Die Stimulation der Eierstöcke wird gemäß dem GnRH-Antagonisten-Protokoll mit einer festen täglichen morgendlichen Dosis von humanem menopausalen Gonadotropin (HMG) [Merional® 75 IE Ampullen, IBSA-Institut] intramuskuläre Injektion beginnend am 2. Zyklustag durchgeführt. Basierend auf der Körpermasse der Patientin Index und Hormonprofil wird die tägliche HMG-Dosis auf (225 IE) für Teilnehmer mit AMH-Spiegeln > 1,5 ng/ml und/oder FSH-Spiegeln ≤ 8 mIU/ml und auf (300 IE) für Teilnehmer mit AMH-Spiegeln < angepasst 1,5 ng/ml und/oder FSH-Spiegel > 8 mIE/ml, wird die Dosis in Fällen mit einem BMI > 30 kg/m2 um 75 IE erhöht. Am Tag 2 des Menstruationszyklus wird die HMG-Dosis für alle Patientinnen begonnen und für 9-11 Tage aufrechterhalten, je nach individueller ovarieller Reaktion jeder Teilnehmerin, die durch transvaginale Ultraschallfollikulometrie bewertet wird, beginnend am 7. Zyklustag und jeden zweiten fortgesetzt Tag bis zum Tag der Injektion von humanem Choriongonadotropin (hCG). Am Zyklustag 7 wird der GnRH-Antagonist Cetrorelix 0,25 mg [Cetrotide® 0,25 mg Spritzen, Merck Serono] als tägliche subkutane Injektion eingeführt und bis zum Tag der Auslösung des Eisprungs fortgesetzt. Wenn schließlich mindestens 3 Follikel einen Durchmesser von 17 mm erreichen, wird der Eisprung durch eine einzelne intramuskuläre Injektion von 10.000 IE hCG [Choriomon® 5000 IE Ampullen, IBSA Institut] ausgelöst. 36 Stunden später wird die Eizellentnahme durchgeführt und durch transvaginalen Ultraschall geführt. Gemäß unserem primären Ergebnis, der Anzahl der gesammelten Oozyten, werden Patientinnen als Patientinnen mit geringem Ansprechen (4 Eizellen oder weniger) eingestuft und als Patientinnen mit gutem Ansprechen betrachtet, wenn sie 5 oder mehr Eizellen produziert haben. Die Gruppe der guten Responder dient als Kontrollgruppe.

Genotypisierung: Jedem Patienten wird peripheres Blut in einem EDTA-haltigen Röhrchen entnommen. Genomische DNA wird aus Lymphozyten des peripheren Blutes durch ein vollautomatisches System von QIAcube unter Verwendung des QIAamp DNA Blood Mini Kit (250) plus QIAamp DNA Blood Mini Accessory Set B, Kat.-Nr. nein. 1043369. Der Nachweis der Polymorphismen ESR2 (+1730G>A) (rs4986938), FSHR p.Thr307Ala (c.919A>G, rs6165) und FSHR p.Asn680Ser (c.2039A>G, rs6166) SNPs wird mit dem TaqMan-System durchgeführt durch Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (PCR). Primer und Sonden werden von Applied Biosystem, Life Technologies, bereitgestellt. Die Assays werden mit TaqMan Universal Master Mix durchgeführt.

Statistische Analyse: Daten werden statistisch in Form von Mittelwert und Standardabweichung beschrieben, für quantitative Daten und Häufigkeiten (Anzahl der Fälle) und relative Häufigkeiten (Prozentsätze) für qualitative Daten. Das Hardy-Weinberg (H-W)-Gleichgewicht für jeden Polymorphismus wird unter Verwendung des Chi-Quadrat-Tests getestet. Der Vergleich der quantitativen Variablen erfolgt unter Verwendung des ungepaarten t-Tests beim Vergleich von 2 Kategorien und der Einweg-Varianzanalyse (ANOVA) mit dem Post-hoc-Test beim Vergleich von mehr als 2 Kategorien.

Zum Vergleich kategorialer Daten wird ein Chi-Quadrat-Test durchgeführt. Der exakte Test wird stattdessen verwendet, wenn die erwartete Häufigkeit kleiner als 5 ist.

Genotyp und Allelhäufigkeiten werden zwischen der Krankheit und den Kontrollgruppen unter Verwendung von Chi-Quadrat-Tests verglichen. Odds Ratio (OR) mit 95 % Konfidenzintervall wird berechnet. Ein Wahrscheinlichkeitswert (P-Wert) von weniger als 0,05 wird als statistisch signifikant angesehen. Alle statistischen Berechnungen werden mit SPSS (Statistical Package for the Social Science; SPSS Inc., Chicago, IL, USA) Version 22 durchgeführt.