Respuesta deficiente a la estimulación ovárica en el programa de fertilización in vitro (FIV)

La seguridad del tratamiento de fertilización in vitro es altamente cuestionada por la variabilidad individual errática a la hiperestimulación ovárica controlada (HOC). Uno de los diversos factores predictivos es la AMH, que se considera el marcador más sensible. Hoy en día, las prácticas de la farmacogenética podrían predecir el éxito de la estimulación y así adecuar el tratamiento logrando avances en la atención al paciente. Dado que la eficiencia de la dosis de la hormona foliculoestimulante (FSH) está muy relacionada con el éxito de la COH, el gen FSHR se trata como el principal candidato para explicar la diferencia en los resultados de la COH. Además, los receptores de estrógeno son genes importantes para mejorar la diagnóstico y tratamiento de la infertilidad.

Materiales y métodos: a partir de junio de 2013, las parejas con infertilidad inexplicable que busquen el primer intento de ciclo de tratamiento de FIV/ICSI serán reclutadas en el "centro de fertilidad AL shark Al-Awsat". En este estudio prospectivo, 216 parejas que cumplan con nuestros criterios de inclusión se inscribirán en este estudio previo consentimiento informado. La estimulación ovárica se realizará de acuerdo con el protocolo del antagonista de la GnRH con una dosis matutina diaria fija de gonadotropina menopáusica humana (HMG) [ampollas de 75 UI de Merional®, instituto IBSA] inyección intramuscular a partir del día 2 del ciclo. Según la masa corporal de la paciente índice y perfil hormonal, la dosis diaria de HMG se ajustará a (225 UI) para participantes con niveles de AMH > 1,5 ng/ml y/o niveles de FSH ≤ 8 mUI/ml y a (300 UI) para participantes con niveles de AMH < 1,5 ng/ml y/o niveles de FSH > 8 mUI/ml, se incrementará la dosis en 75 UI en casos con IMC > 30 Kg/m2. En el día 2 del ciclo menstrual, la dosis de HMG se iniciará para todas las pacientes y se mantendrá durante 9 a 11 días según la respuesta ovárica individual de cada participante evaluada mediante foliculometría por ultrasonido transvaginal a partir del día 7 del ciclo y continuando cada dos días. día hasta el día de la inyección de gonadotropina coriónica humana (hCG). El día 7 del ciclo, el antagonista de la GnRH Cetrorelix 0,25 mg [jeringas de 0,25 mg de Cetrotide®, Merck Serono] se introducirá en forma de inyecciones subcutáneas diarias y se continuará hasta el día del desencadenamiento de la ovulación. Finalmente, cuando al menos 3 folículos alcancen los 17 mm de diámetro, se desencadenará la ovulación mediante una única inyección intramuscular de 10.000 UI de hCG [Choriomon® 5000 UI ampollas, instituto IBSA]. A las 36 horas se realizará la extracción de ovocitos guiada por ecografía transvaginal. De acuerdo con nuestro resultado primario, la cantidad de ovocitos recolectados, las pacientes se clasificarán como respondedoras deficientes (4 ovocitos o menos) y se considerarán respondedoras buenas si produjeron 5 o más ovocitos. El grupo de buenos respondedores servirá como grupo de control.

Genotipado: se recolectará sangre periférica de cada paciente en un tubo que contiene EDTA. El ADN genómico se extraerá de los linfocitos de la sangre periférica mediante un sistema totalmente automatizado de QIAcube utilizando el kit QIAamp DNA Blood Mini (250) más el QIAamp DNA Blood Mini Accessories Set B, cat. no. 1043369. La detección de los polimorfismos ESR2 (+1730G>A) (rs4986938), FSHR p.Thr307Ala (c.919A>G, rs6165) y FSHR p.Asn680Ser (c.2039A>G, rs6166) SNPs se realizará mediante el sistema TaqMan por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real. Los cebadores y las sondas serán proporcionados por biosistema aplicado, Life Technologies. Los ensayos se realizarán con TaqMan Universal Master Mix.

Análisis estadístico: Los datos se describirán estadísticamente en términos de media y desviación estándar, para datos cuantitativos y frecuencias (número de casos) y frecuencias relativas (porcentajes) para datos cualitativos. El equilibrio de Hardy-Weinberg (H-W) para cada polimorfismo se probará mediante la prueba de Chi-cuadrado. La comparación de variables cuantitativas se realizará mediante la prueba t no pareada cuando se comparan 2 categorías y el análisis de varianza de una vía (ANOVA) con prueba post hoc cuando se comparan más de 2 categorías.

Para comparar datos categóricos, se realizará la prueba de Chi cuadrado. En su lugar, se utilizará la prueba exacta cuando la frecuencia esperada sea inferior a 5.

Las frecuencias de genotipos y alelos se compararán entre la enfermedad y los grupos de control mediante pruebas de chi-cuadrado. Se calculará la razón de posibilidades (OR) con intervalos de confianza del 95%. Un valor de probabilidad (valor P) inferior a 0,05 se considerará estadísticamente significativo. Todos los cálculos estadísticos se realizarán utilizando SPSS (Statistical Package for the Social Science; SPSS Inc., Chicago, IL, EE. UU.) versión 22.