Dårlig ovariestimuleringsrespons i in vitro fertilisering (IVF) program

Sikkerheden ved in vitro fertiliseringsbehandling er stærkt udfordret af den uberegnelige individuelle variabilitet til kontrolleret ovariehyperstimulering (COH). En af de forskellige prædiktive faktorer er AMH, som anses for at være den mest følsomme markør. I dag kan praksis inden for farmakogenetik forudsige stimuleringssuccesen og dermed skræddersy behandlingen til fremskridt i patientplejen. Da effektiviteten af ​​den follikelstimulerende hormon (FSH)-dosis i høj grad er relateret til COH's succes, behandles FSHR-genet som den primære kandidat til at forklare forskellen i COH-resultater. Ydermere er østrogenreceptorerne vigtige gener for forbedringer i diagnosticering og behandling af infertilitet.

Materialer og metoder: Fra juni 2013 vil par med uforklarlig infertilitet, der søger det første forsøg med IVF/ICSI behandlingscyklus, blive rekrutteret i "AL shark Al-Awsat fertilitetscenter". I denne prospektive undersøgelse vil 216 par, der opfylder vores inklusionskriterier, tilmelde sig denne undersøgelse efter informeret samtykke. Ovariestimulation vil blive udført i henhold til GnRH-antagonistprotokollen med en fast daglig morgendosis Human menopausal gonadotropin (HMG) [Merional® 75 IE ampuller, IBSA institut] intramuskulær injektion startende på cyklusdag 2. Baseret på patientens kropsmasse indeks og hormonprofil, vil den daglige dosis af HMG blive justeret til (225 IE) for deltagere med AMH-niveauer > 1,5 ng/ml og/eller FSH-niveauer ≤ 8 mIU/ml og til (300 IE) for deltagere med AMH-niveauer < 1,5 ng/ml og/eller FSH-niveauer > 8 mIU/ml, øges doser med 75 IE i tilfælde med BMI > 30 Kg/m2. På dag 2 i menstruationscyklussen vil dosis af HMG blive påbegyndt for alle patienter og vil blive opretholdt i 9-11 dage i henhold til hver enkelt deltagers individuelle ovarierespons vurderet ved transvaginal ultralydsfollikulometri startende på cyklusdag 7 og fortsættes hver anden dag indtil dagen for human choriongonadotropin (hCG) injektion. På cyklusdag 7 vil GnRH-antagonisten Cetrorelix 0,25 mg [Cetrotide® 0,25 mg sprøjter, Merck Serono] blive introduceret som daglige subkutane injektioner og fortsættes indtil den dag, hvor ægløsningen udløser. Endelig, når mindst 3 follikler når 17 mm i diameter, vil ægløsning blive udløst af en enkelt intramuskulær injektion af 10.000 IE hCG [Choriomon® 5000 IE ampuller, IBSA institut]. 36 timer senere udføres oocytudtagning og vil blive styret af transvaginal ultralyd. Ifølge vores primære resultat, antallet af indsamlede oocytter, vil patienter blive klassificeret som dårlige respondere (4 oocytter eller mindre) og vil blive betragtet som gode respondere, hvis de producerede 5 eller flere oocytter. Den gode respondergruppe vil fungere som kontrolgruppe.

Genotypning: Perifert blod vil blive indsamlet fra hver patient i et EDTA-holdigt rør. Genomisk DNA vil blive ekstraheret fra lymfocytter af perifert blod ved et fuldt automatiseret system af QIAcube ved hjælp af QIAamp DNA Blood Mini Kit (250) plus QIAamp DNA Blood Mini tilbehørssæt B, kat. ingen. 1043369. Påvisning af polymorfismerne ESR2 (+1730G>A) (rs4986938), FSHR p.Thr307Ala (c.919A>G, rs6165) og FSHR p.Asn680Ser (c.2039A>G, rs6166 vil blive udført ved hjælp af TasqMan-systemet) ved real-time polymerase kædereaktion (PCR). Primere og prober vil blive leveret af det anvendte biosystem, Life Technologies. Analyser vil blive udført med TaqMan Universal Master Mix.

Statistisk analyse: Data vil blive statistisk beskrevet i form af middelværdi og standardafvigelse, for kvantitative data og frekvenser (antal tilfælde) og relative frekvenser (procenter) for kvalitative data. Hardy-Weinberg (H-W) Ligevægt for hver polymorfi vil blive testet ved hjælp af Chi-square testen. Sammenligning af kvantitative variabler vil blive udført ved hjælp af uparret t-test ved sammenligning af 2 kategorier og envejsvariansanalyse (ANOVA) med post hoc-test ved sammenligning af mere end 2 kategorier.

For at sammenligne kategoriske data vil der blive udført Chi square test. Præcis test vil blive brugt i stedet, når den forventede frekvens er mindre end 5.

Genotype- og allelfrekvenser vil blive sammenlignet mellem sygdommen og kontrolgrupperne ved hjælp af chi-kvadrat-tests. Oddsratio (OR) med 95 % konfidensintervaller vil blive beregnet. En sandsynlighedsværdi (P-værdi) mindre end 0,05 vil blive betragtet som statistisk signifikant. Alle statistiske beregninger vil blive udført ved hjælp af SPSS (Statistical Package for the Social Science; SPSS Inc., Chicago, IL, USA) version 22.