Resposta Fraca à Estimulação Ovariana no Programa de Fertilização In Vitro (FIV)

A segurança do tratamento de fertilização in vitro é altamente desafiada pela variabilidade individual errática para hiperestimulação ovariana controlada (COH). Um dos diversos fatores preditivos é o AMH, considerado o marcador mais sensível. Atualmente, as práticas de farmacogenética podem predizer o sucesso da estimulação e assim adequar o tratamento alcançando avanços no atendimento ao paciente. Como a eficiência da dose do hormônio folículo estimulante (FSH) está muito relacionada ao sucesso do COH, o gene FSHR é tratado como o principal candidato para explicar a diferença nos resultados do COH. Além disso, os receptores de estrogênio são genes importantes para melhorias no diagnóstico e tratamento da infertilidade.

Materiais e Métodos: A partir de junho de 2013, casais com infertilidade inexplicada, buscando a primeira tentativa de ciclo de tratamento de fertilização in vitro/ICSI serão recrutados no "centro de fertilidade AL shark Al-Awsat". este estudo após consentimento informado. A estimulação ovariana será realizada de acordo com o protocolo do antagonista de GnRH com uma dose matinal fixa diária de gonadotrofina menopáusica humana (HMG) [Merional® 75 UI ampolas, IBSA institut] injeção intramuscular começando no dia 2 do ciclo. Com base na massa corporal do paciente índice e perfil hormonal, a dose diária de HMG será ajustada para (225 UI) para participantes com níveis de AMH > 1,5 ng/ml e/ou níveis de FSH ≤ 8 mIU/ml e para (300 UI) para participantes com níveis de AMH < 1,5 ng/ml e/ou níveis de FSH > 8 mIU/ml, as doses serão aumentadas em 75 UI em casos com IMC > 30 Kg/m2. No dia 2 do ciclo menstrual, a dose de HMG será iniciada para todas as pacientes e será mantida por 9-11 dias de acordo com a resposta ovariana individual de cada participante avaliada por foliculometria de ultrassom transvaginal começando no dia 7 do ciclo e continuando a cada dois dia até o dia da injeção de gonadotrofina coriônica humana (hCG). No dia 7 do ciclo, o antagonista de GnRH Cetrorelix 0,25 mg [Cetrotide® 0,25 mg seringas, Merck Serono] será introduzido como injeções subcutâneas diárias e continuado até o dia do início da ovulação. Finalmente, quando pelo menos 3 folículos atingirem 17 mm de diâmetro, a ovulação será desencadeada por uma única injeção intramuscular de 10.000 UI de hCG [Choriomon® 5.000 UI ampoules, IBSA institut]. Após 36 horas, será realizada a captação de ovócitos, guiada por ultrassonografia transvaginal. De acordo com nosso desfecho primário, o número de oócitos coletados, as pacientes serão classificadas como mal respondedoras (4 oócitos ou menos) e serão consideradas boas respondedoras se produzirem 5 ou mais oócitos. O grupo de bons respondedores servirá como grupo de controle.

Genotipagem: O sangue periférico será coletado de cada paciente em um tubo contendo EDTA. O DNA genômico será extraído de linfócitos de sangue periférico pelo sistema totalmente automatizado de QIAcube usando QIAamp DNA Blood Mini Kit (250) mais QIAamp DNA Blood Mini Conjunto de Acessórios B, cat. não. 1043369. A detecção dos SNPs dos polimorfismos ESR2 (+1730G>A) (rs4986938), FSHR p.Thr307Ala (c.919A>G, rs6165) e FSHR p.Asn680Ser (c.2039A>G, rs6166) será realizada utilizando o sistema TaqMan por reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real. Os primers e sondas serão fornecidos pelo biossistema aplicado, Life Technologies. Os ensaios serão realizados com TaqMan Universal Master Mix.

Análise estatística: Os dados serão descritos estatisticamente em termos de média e desvio padrão, para dados quantitativos e frequências (número de casos) e frequências relativas (porcentagens) para dados qualitativos. O equilíbrio de Hardy-Weinberg (H-W) para cada polimorfismo será testado usando o teste Qui-quadrado. A comparação de variáveis ​​quantitativas será feita usando teste t não pareado ao comparar 2 categorias e análise de variância (ANOVA) de uma via com teste post hoc ao comparar mais de 2 categorias.

Para comparação de dados categóricos, será realizado o teste qui-quadrado. O teste exato será usado quando a frequência esperada for menor que 5.

Frequências genotípicas e alélicas serão comparadas entre os grupos doença e controle por meio de testes do qui-quadrado. Odds ratio (OR) com intervalos de confiança de 95% será calculado. Um valor de probabilidade (valor P) inferior a 0,05 será considerado estatisticamente significativo. Todos os cálculos estatísticos serão feitos usando SPSS (Statistical Package for the Social Science; SPSS Inc., Chicago, IL, EUA) versão 22.