Huono munasarjojen stimulaatiovaste in vitro -hedelmöitysohjelmassa (IVF).

Koeputkihedelmöityshoidon turvallisuuden haastaa suuresti yksilöllinen vaihtelu kontrolloituun munasarjojen hyperstimulaatioon (COH). Yksi monista ennustavista tekijöistä on AMH, jota pidetään herkimpänä markkerina. Nykyään farmakogenetiikan käytännöillä voidaan ennakoida stimulaation onnistumista ja siten räätälöidä hoitoa potilashoidon edistymiseen. Koska follikkelia stimuloivan hormonin (FSH) annoksen tehokkuus liittyy suuresti COH:n onnistumiseen, FSHR-geeniä pidetään ensisijaisena ehdokkaana COH-tulosten erojen selittämisessä. Lisäksi estrogeenireseptorit ovat tärkeitä geenejä, jotka parantavat hedelmättömyyden diagnoosi ja hoito.

Materiaalit ja menetelmät: Kesäkuusta 2013 alkaen parit, joilla on selittämätön lapsettomuus ja jotka hakevat ensimmäistä yritystä IVF/ICSI-hoitojaksoon, rekrytoidaan "AL shark Al-Awsat -hedelmällisyyskeskukseen". Tähän tulevaan tutkimukseen osallistuu 216 paria, jotka täyttävät osallistumiskriteerimme. tämä tutkimus tietoisen suostumuksen jälkeen. Munasarjastimulaatio suoritetaan GnRH-antagonistiprotokollan mukaisesti kiinteällä päivittäisellä aamuannoksella ihmisen menopausaalista gonadotropiinia (HMG) [Merional® 75 IU -ampullit, IBSA-instituutti] lihaksensisäinen injektio syklin 2. päivästä alkaen. Potilaan kehon massan perusteella indeksin ja hormonaalisen profiilin perusteella, HMG:n päiväannos muutetaan (225 IU) osallistujille, joiden AMH-taso on > 1,5 ng/ml ja/tai FSH-taso ≤ 8 mIU/ml, ja (300 IU) osallistujille, joiden AMH-taso on < 1,5 ng/ml ja/tai FSH-tasot > 8 mIU/ml, annosta nostetaan 75 IU:lla tapauksissa, joissa BMI > 30 kg/m2. Kuukautiskierron 2. päivänä aloitetaan HMG-annos kaikille potilaille ja sitä ylläpidetään 9-11 päivän ajan kunkin osallistujan yksilöllisen munasarjavasteen mukaan, joka arvioidaan trans-emättimen ultraäänifollikulometrialla alkaen syklin 7. päivästä ja jatkuu joka toinen päivästä ihmisen koriongonadotropiinin (hCG) injektioon asti. Jakson 7. päivänä GnRH-antagonisti Cetrorelix 0,25 mg [Cetrotide® 0,25 mg ruiskut, Merck Serono] otetaan käyttöön päivittäisinä ihonalaisina injektioina ja sitä jatketaan ovulaation käynnistymispäivään asti. Lopuksi, kun vähintään 3 follikkelia saavuttaa 17 mm:n halkaisijan, ovulaatio laukaistaan ​​yhdellä 10 000 IU:n hCG:n lihaksensisäisellä injektiolla [Choriomon® 5000 IU -ampullit, IBSA-instituutti]. 36 tuntia myöhemmin munasolun haku suoritetaan transvaginaalisella ultraäänellä. Ensisijaisen tuloksemme, kerättyjen oosyyttien lukumäärän, mukaan potilaat luokitellaan huonosti reagoiviksi (4 munasolua tai vähemmän) ja heitä pidetään hyvinä vasteina, jos he tuottivat 5 tai enemmän munasoluja. Hyvien vastaajien ryhmä toimii kontrolliryhmänä.

Genotyypitys: Perifeerinen veri kerätään jokaiselta potilaalta EDTA:ta sisältävään putkeen. Genominen DNA uutetaan ääreisveren lymfosyyteistä täysin automatisoidulla QIAcube-järjestelmällä käyttämällä QIAamp DNA Blood Mini Kit (250) plus QIAamp DNA Blood Mini -tarvikesarja B, kat. ei. 1043369. Polymorfismien ESR2 (+1730G>A) (rs4986938), FSHR p.Thr307Ala (c.919A>G, rs6165) ja FSHR p.Asn680Ser (c.2039A>G, rs6166) havaitseminen suoritetaan käyttämällä TaqMan-järjestelmää. reaaliaikaisella polymeraasiketjureaktiolla (PCR). Alukkeet ja koettimet toimittaa sovellettu biosysteemi, Life Technologies. Määritykset suoritetaan TaqMan Universal Master Mixillä.

Tilastollinen analyysi: Tiedot kuvataan tilastollisesti keskimääräisenä ja keskihajonnana kvantitatiivisten tietojen ja frekvenssien (tapausten lukumäärä) ja suhteellisten esiintymistiheysten (prosentteina) osalta laadullisten tietojen osalta. Hardy-Weinbergin (H-W) tasapaino kunkin polymorfismin osalta testataan khin neliötestillä. Kvantitatiivisten muuttujien vertailu tehdään käyttämällä paritonta t-testiä, kun verrataan kahta luokkaa, ja yksisuuntaista varianssianalyysiä (ANOVA) post hoc -testiin, kun verrataan enemmän kuin kahta luokkaa.

Kategoristen tietojen vertailua varten suoritetaan Chi-neliötesti. Tarkkaa testiä käytetään sen sijaan, kun odotettu taajuus on alle 5.

Genotyyppi- ja alleelitaajuuksia verrataan taudin ja kontrolliryhmien välillä khin-neliötesteillä. Kerroinsuhde (OR) lasketaan 95 %:n luottamusvälillä. Todennäköisyysarvo (P-arvo), joka on pienempi kuin 0,05, katsotaan tilastollisesti merkitseväksi. Kaikki tilastolaskelmat tehdään SPSS:n (Statistical Package for the Social Science; SPSS Inc., Chicago, IL, USA) versiolla 22.