Scarsa risposta alla stimolazione ovarica nel programma di fecondazione in vitro (IVF).

La sicurezza del trattamento di fecondazione in vitro è fortemente messa in discussione dall'irregolare variabilità individuale dell'iperstimolazione ovarica controllata (COH). Uno dei diversi fattori predittivi è l'AMH, che è considerato il marcatore più sensibile. Al giorno d'oggi, le pratiche di farmacogenetica potrebbero prevedere il successo della stimolazione e quindi adattare il trattamento raggiungendo il progresso nella cura del paziente. Poiché l'efficienza della dose dell'ormone follicolo-stimolante (FSH) è fortemente correlata al successo della COH, il gene FSHR è trattato come il candidato principale per spiegare la differenza nei risultati della COH. Inoltre, i recettori degli estrogeni sono geni importanti per il miglioramento della diagnosi e cura dell'infertilità.

Materiali e metodi: a partire da giugno 2013, le coppie con infertilità inspiegabile, che cercano il primo ciclo di trattamento IVF/ICSI saranno reclutate nel "centro di fertilità AL shark Al-Awsat". In questo studio prospettico, 216 coppie che soddisfano i nostri criteri di inclusione si iscriveranno questo studio dopo il consenso informato. La stimolazione ovarica verrà eseguita secondo il protocollo dell'antagonista del GnRH con una dose giornaliera fissa mattutina di gonadotropina umana della menopausa (HMG) [Merional® 75 UI fiale, IBSA institut] iniezione intramuscolare a partire dal giorno 2 del ciclo. Sulla base della massa corporea della paziente indice e profilo ormonale, la dose giornaliera di HMG sarà aggiustata a (225 UI) per i partecipanti con livelli di AMH > 1,5 ng/ml e/o livelli di FSH ≤ 8 mIU/ml e a (300 UI) per i partecipanti con livelli di AMH < 1,5 ng/ml e/o livelli di FSH > 8 mIU/ml, le dosi saranno aumentate di 75 UI nei casi con BMI > 30 Kg/m2. Il giorno 2 del ciclo mestruale, la dose di HMG verrà iniziata per tutte le pazienti e sarà mantenuta per 9-11 giorni in base alla risposta ovarica individuale di ogni partecipante valutata mediante follicolometria ecografica transvaginale a partire dal giorno 7 del ciclo e continuata a giorni alterni giorno fino al giorno dell'iniezione di gonadotropina corionica umana (hCG). Il giorno 7 del ciclo, l'antagonista del GnRH Cetrorelix 0,25 mg [Cetrotide® 0,25 mg siringhe, Merck Serono] verrà introdotto come iniezioni sottocutanee giornaliere e continuato fino al giorno dell'attivazione dell'ovulazione. Infine, quando almeno 3 follicoli raggiungeranno i 17 mm di diametro, l'ovulazione sarà innescata da una singola iniezione intramuscolare di 10.000 UI di hCG [Choriomon® 5000 UI fiale, IBSA institut]. 36 ore dopo, verrà eseguito il prelievo degli ovociti e sarà guidato dall'ecografia transvaginale. Secondo il nostro risultato primario, il numero di ovociti raccolti, i pazienti saranno classificati come poveri responsivi (4 ovociti o meno) e saranno considerati buoni rispondenti se hanno prodotto 5 o più ovociti. Il gruppo dei buoni risponditori fungerà da gruppo di controllo.

Genotipizzazione: il sangue periferico verrà raccolto da ciascun paziente in una provetta contenente EDTA. Il DNA genomico sarà estratto dai linfociti del sangue periferico mediante un sistema completamente automatizzato di QIAcube utilizzando il kit QIAamp DNA Blood Mini (250) più il set di accessori QIAamp DNA Blood Mini B, cat. no. 1043369. La rilevazione dei polimorfismi ESR2 (+1730G>A) (rs4986938), FSHR p.Thr307Ala (c.919A>G, rs6165) e FSHR p.Asn680Ser (c.2039A>G, rs6166) SNP sarà eseguita utilizzando il sistema TaqMan mediante reazione a catena della polimerasi in tempo reale (PCR). I primer e le sonde saranno forniti dal biosistema applicato, Life Technologies. I saggi saranno eseguiti con TaqMan Universal Master Mix.

Analisi statistica: I dati saranno descritti statisticamente in termini di media e deviazione standard, per dati quantitativi e frequenze (numero di casi) e frequenze relative (percentuali) per dati qualitativi. L'equilibrio di Hardy-Weinberg (H-W) per ogni polimorfismo sarà testato usando il test Chi-quadrato. Il confronto delle variabili quantitative verrà effettuato utilizzando il test t non accoppiato quando si confrontano 2 categorie e l'analisi della varianza unidirezionale (ANOVA) con il test post hoc quando si confrontano più di 2 categorie.

Per confrontare i dati categorici, verrà eseguito il test del chi quadrato. Verrà invece utilizzato il test esatto quando la frequenza prevista è inferiore a 5.

Le frequenze genotipiche e alleliche saranno confrontate tra la malattia ei gruppi di controllo utilizzando test chi-quadrato. Verrà calcolato l'odds ratio (OR) con intervalli di confidenza al 95%. Un valore di probabilità (valore P) inferiore a 0,05 sarà considerato statisticamente significativo. Tutti i calcoli statistici verranno eseguiti utilizzando SPSS (Statistical Package for the Social Science; SPSS Inc., Chicago, IL, USA) versione 22.