Плохая реакция яичников на стимуляцию в программе экстракорпорального оплодотворения (ЭКО)

Безопасность лечения экстракорпорального оплодотворения находится под серьезной проблемой из-за неустойчивой индивидуальной вариабельности контролируемой гиперстимуляции яичников (КГЯ). Одним из разнообразных прогностических факторов является АМГ, который считается наиболее чувствительным маркером. В настоящее время методы фармакогенетики могут предсказывать успех стимуляции и, таким образом, адаптировать лечение, достигая прогресса в уходе за пациентами. Поскольку эффективность дозы фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) в значительной степени связана с успехом КГН, ген FSHR рассматривается как основной кандидат, объясняющий разницу в результатах КГН. Кроме того, рецепторы эстрогена являются важными генами для улучшения диагностика и лечение бесплодия.

Материалы и методы: Начиная с июня 2013 года, пары с бесплодием неясного генеза, желающие пройти первую попытку цикла лечения ЭКО/ИКСИ, будут набираться в «Центр фертильности AL Shark Al-Awsat». это исследование после информированного согласия. Стимуляция яичников будет проводиться в соответствии с протоколом антагониста ГнРГ с фиксированной суточной утренней дозой человеческого менопаузального гонадотропина (ЧМГ) [ампулы Мерионал® 75 МЕ, институт ИБСА] внутримышечно, начиная со 2-го дня цикла. В зависимости от массы тела пациентки. индекса и гормонального профиля, суточная доза ЧМГ будет скорректирована до (225 МЕ) для участников с уровнем АМГ > 1,5 нг/мл и/или уровнем ФСГ ≤ 8 мМЕ/мл и до (300 МЕ) для участников с уровнем АМГ < 1,5 нг/мл и/или уровни ФСГ > 8 мМЕ/мл, дозы будут увеличены на 75 МЕ в случаях с ИМТ > 30 кг/м2. На 2-й день менструального цикла доза HMG будет начата для всех пациенток и будет поддерживаться в течение 9-11 дней в соответствии с индивидуальной реакцией яичников каждой участницы, оцениваемой с помощью трансвагинальной ультразвуковой фолликулометрии, начиная с 7-го дня цикла и продолжая через каждые два дня. дня до дня инъекции хорионического гонадотропина человека (ХГЧ). На 7-й день цикла антагонист ГнРГ Цетрореликс 0,25 мг [Цетротид® 0,25 мг шприцы, Merck Serono] будет вводиться в виде ежедневных подкожных инъекций и продолжаться до дня запуска овуляции. Наконец, когда хотя бы 3 фолликула достигнут диаметра 17 мм, овуляция будет вызвана однократной внутримышечной инъекцией 10 000 МЕ ХГЧ [Хориомон® 5000 МЕ в ампулах, институт IBSA]. Через 36 часов будет проведено извлечение ооцитов под контролем трансвагинального УЗИ. В соответствии с нашим основным результатом, количеством собранных ооцитов, пациенты будут классифицированы как плохо реагирующие (4 ооцита или менее) и будут считаться хорошими респондерами, если они произвели 5 или более ооцитов. Группа хороших ответчиков будет служить контрольной группой.

Генотипирование: у каждого пациента будет взята периферическая кровь в пробирку с ЭДТА. Геномная ДНК будет извлечена из лимфоцитов периферической крови с помощью полностью автоматизированной системы QIAcube с использованием набора QIAamp DNA Blood Mini Kit (250) плюс мини-набора аксессуаров QIAamp DNA Blood B, кат. нет. 1043369. Выявление SNP полиморфизмов ESR2 (+1730G>A) (rs4986938), FSHR p.Thr307Ala (c.919A>G, rs6165) и FSHR p.Asn680Ser (c.2039A>G, rs6166) будет проводиться с использованием системы TaqMan. методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени. Праймеры и зонды будут предоставлены прикладной биосистемой Life Technologies. Анализы будут выполняться с TaqMan Universal Master Mix.

Статистический анализ: данные будут статистически описаны с точки зрения среднего значения и стандартного отклонения для количественных данных и частоты (количество случаев) и относительной частоты (в процентах) для качественных данных. Равновесие Харди-Вайнберга (H-W) для каждого полиморфизма будет проверено с использованием критерия хи-квадрат. Сравнение количественных переменных будет выполняться с использованием непарного t-критерия при сравнении 2 категорий и однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) с апостериорным тестом при сравнении более 2 категорий.

Для сравнения категорийных данных будет выполнен критерий хи-квадрат. Вместо этого будет использоваться точный тест, когда ожидаемая частота меньше 5.

Частоты генотипа и аллеля будут сравниваться между больной и контрольной группами с использованием тестов хи-квадрат. Будет рассчитано отношение шансов (OR) с 95% доверительными интервалами. Значение вероятности (значение P) менее 0,05 будет считаться статистически значимым. Все статистические расчеты будут выполняться с использованием SPSS (Статистический пакет для социальных наук; SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс, США) версии 22.