Mauvaise réponse à la stimulation ovarienne dans le programme de fécondation in vitro (FIV)

La sécurité du traitement de fécondation in vitro est fortement remise en question par la variabilité individuelle erratique de l'hyperstimulation ovarienne contrôlée (COH). L'un des divers facteurs prédictifs est l'AMH, qui est considérée comme le marqueur le plus sensible. De nos jours, les pratiques de pharmacogénétique pourraient prédire le succès de la stimulation et ainsi adapter le traitement pour faire progresser les soins aux patients. Étant donné que l'efficacité de la dose d'hormone folliculo-stimulante (FSH) est fortement liée au succès de la COH, le gène FSHR est considéré comme le principal candidat pour expliquer la différence dans les résultats de la COH. De plus, les récepteurs des œstrogènes sont des gènes importants pour l'amélioration de la diagnostic et traitement de l'infertilité.

Matériels et méthodes : À partir de juin 2013, les couples présentant une stérilité inexpliquée, à la recherche du premier cycle de traitement FIV/ICSI seront recrutés au « centre de fertilité AL shark Al-Awsat ». Dans cette étude prospective, 216 couples remplissant nos critères d'inclusion s'inscriront à cette étude après consentement éclairé. La stimulation ovarienne sera réalisée selon le protocole des antagonistes de la GnRH avec une dose matinale fixe de Gonadotrophine ménopausique humaine (HMG) [ampoules Merional® 75 UI, institut IBSA] en injection intramusculaire à partir du jour 2 du cycle. En fonction de la masse corporelle de la patiente index et profil hormonal, la dose quotidienne d'HMG sera ajustée à (225 UI) pour les participants avec des niveaux d'AMH > 1,5 ng/ml et/ou des niveaux de FSH ≤ 8 mUI/ml et à (300 UI) pour les participants avec des niveaux d'AMH < 1,5 ng/ml et/ou taux de FSH > 8 mUI/ml, les doses seront augmentées de 75 UI en cas d'IMC > 30 Kg/m2. Au jour 2 du cycle menstruel, la dose d'HMG sera commencée pour toutes les patientes et sera maintenue pendant 9 à 11 jours en fonction de la réponse ovarienne individuelle de chaque participante évaluée par folliculométrie échographique transvaginale à partir du jour 7 du cycle et poursuivie tous les deux jusqu'au jour de l'injection de gonadotrophine chorionique humaine (hCG). Au jour 7 du cycle, l'antagoniste de la GnRH Cetrorelix 0,25 mg [seringues Cetrotide® 0,25 mg, Merck Serono] sera introduit sous forme d'injections sous-cutanées quotidiennes et poursuivi jusqu'au jour du déclenchement de l'ovulation. Enfin, lorsqu'au moins 3 follicules atteindront 17 mm de diamètre, l'ovulation sera déclenchée par une seule injection intra-musculaire de 10 000 UI d'hCG [Ampoules Choriomon® 5000 UI, institut IBSA]. 36 heures plus tard, un prélèvement d'ovocytes sera effectué et sera guidé par échographie transvaginale. Selon notre critère de jugement principal, le nombre d'ovocytes collectés, les patientes seront classées comme mauvaises répondeuses (4 ovocytes ou moins) et seront considérées comme bonnes répondeuses si elles ont produit 5 ovocytes ou plus. Le groupe de bons répondeurs servira de groupe de contrôle.

Génotypage : du sang périphérique sera prélevé sur chaque patient dans un tube contenant de l'EDTA. L'ADN génomique sera extrait des lymphocytes du sang périphérique par le système entièrement automatisé de QIAcube à l'aide du kit QIAamp DNA Blood Mini (250) plus le kit d'accessoires QIAamp DNA Blood Mini B, cat. non. 1043369. La détection des polymorphismes ESR2 (+1730G>A) (rs4986938), FSHR p.Thr307Ala (c.919A>G, rs6165) et FSHR p.Asn680Ser (c.2039A>G, rs6166) sera effectuée à l'aide du système TaqMan par réaction en chaîne par polymérase (PCR) en temps réel. Les amorces et les sondes seront fournies par le biosystème appliqué, Life Technologies. Les dosages seront effectués avec TaqMan Universal Master Mix.

Analyse statistique : Les données seront décrites statistiquement en termes de moyenne et d'écart-type, pour les données quantitatives et de fréquences (nombre de cas) et de fréquences relatives (pourcentages) pour les données qualitatives. L'équilibre de Hardy-Weinberg (H-W) pour chaque polymorphisme sera testé à l'aide du test du Chi-carré. La comparaison des variables quantitatives sera effectuée à l'aide d'un test t non apparié lors de la comparaison de 2 catégories et d'une analyse de variance à un facteur (ANOVA) avec un test post hoc lors de la comparaison de plus de 2 catégories.

Pour comparer les données catégorielles, un test du chi carré sera effectué. Le test exact sera utilisé à la place lorsque la fréquence attendue est inférieure à 5.

Les fréquences des génotypes et des allèles seront comparées entre les groupes malades et témoins à l'aide de tests du chi carré. Le rapport de cotes (OR) avec des intervalles de confiance à 95 % sera calculé. Une valeur de probabilité (valeur P) inférieure à 0,05 sera considérée comme statistiquement significative. Tous les calculs statistiques seront effectués à l'aide de SPSS (Statistical Package for the Social Science; SPSS Inc., Chicago, IL, USA) version 22.