Slechte ovariële stimulatierespons in het in-vitrofertilisatieprogramma (IVF).

De veiligheid van in-vitrofertilisatiebehandelingen wordt sterk betwist door de grillige individuele variabiliteit tot gecontroleerde ovariële hyperstimulatie (COH). Een van de diverse voorspellende factoren is de AMH, die wordt beschouwd als de meest gevoelige marker. Tegenwoordig kunnen praktijken van farmacogenetica het stimulatiesucces voorspellen en zo de behandeling afstemmen op vooruitgang in de patiëntenzorg. Aangezien de efficiëntie van de dosis follikelstimulerend hormoon (FSH) sterk gerelateerd is aan het succes van COH, wordt het FSHR-gen behandeld als de primaire kandidaat om het verschil in COH-resultaten te verklaren. Bovendien zijn de oestrogeenreceptoren belangrijke genen voor verbeteringen in de diagnose en behandeling van onvruchtbaarheid.

Materialen en Methoden: Vanaf juni 2013 zullen paren met onverklaarbare onvruchtbaarheid, die op zoek zijn naar de eerste poging tot IVF/ICSI-behandelingscyclus, gerekruteerd worden in het "AL shark Al-Awsat fertiliteitscentrum". In deze prospectieve studie zullen 216 paren die aan onze inclusiecriteria voldoen, zich inschrijven deze studie na geïnformeerde toestemming. Eierstokstimulatie zal worden uitgevoerd volgens het GnRH-antagonistprotocol met een vaste dagelijkse ochtenddosis van humaan menopauzaal gonadotrofine (HMG) [Merional® 75 IE-ampullen, IBSA-instituut] intramusculaire injectie vanaf cyclusdag 2. Gebaseerd op het lichaamsgewicht van de patiënt index en hormonaal profiel, zal de dagelijkse dosis HMG worden aangepast tot (225 IE) voor deelnemers met AMH-waarden > 1,5 ng/ml en/of FSH-waarden ≤ 8 mIU/ml en tot (300 IE) voor deelnemers met AMH-waarden < 1,5 ng/ml en/of FSH-waarden > 8 mIU/ml, de doses worden met 75 IE verhoogd in gevallen met een BMI > 30 kg/m2. Op dag 2 van de menstruatiecyclus wordt voor alle patiënten gestart met de dosis HMG en deze wordt gedurende 9-11 dagen gehandhaafd, afhankelijk van de individuele ovariële respons van elke deelnemer, beoordeeld door middel van transvaginale echografie, folliculometrie, beginnend op cyclusdag 7 en voortgezet om de andere dag tot de dag van injectie met humaan choriongonadotrofine (hCG). Op cyclusdag 7 zal de GnRH-antagonist Cetrorelix 0,25 mg [Cetrotide® 0,25 mg-spuiten, Merck Serono] worden geïntroduceerd als dagelijkse subcutane injecties en worden voortgezet tot de dag waarop de ovulatie wordt geactiveerd. Ten slotte, wanneer ten minste 3 follikels een diameter van 17 mm bereiken, wordt de eisprong teweeggebracht door een enkele intramusculaire injectie van 10.000 IE hCG [Choriomon® 5000 IU-ampullen, IBSA-instituut]. 36 uur later vindt de eicelpunctie plaats onder begeleiding van transvaginale echografie. Volgens onze primaire uitkomst, het aantal verzamelde oöcyten, worden patiënten geclassificeerd als slechte responders (4 oöcyten of minder) en worden ze als goede responders beschouwd als ze 5 of meer oöcyten hebben geproduceerd. De groep goede responders zal dienen als controlegroep.

Genotypering: Bij elke patiënt wordt perifeer bloed afgenomen in een EDTA-bevattende buis. Genomisch DNA zal worden geëxtraheerd uit lymfocyten van perifeer bloed door het volledig geautomatiseerde systeem van QIAcube met behulp van de QIAamp DNA Blood Mini Kit (250) plus QIAamp DNA Blood Mini Accessory Set B, cat. nee. 1043369. Detectie van de polymorfismen ESR2 (+1730G>A) (rs4986938), FSHR p.Thr307Ala (c.919A>G, rs6165) en FSHR p.Asn680Ser (c.2039A>G, rs6166) SNP's zullen worden uitgevoerd met behulp van het TaqMan-systeem door real-time polymerasekettingreactie (PCR). Primers en sondes worden geleverd door Applied Biosystem, Life Technologies. Assays zullen worden uitgevoerd met TaqMan Universal Master Mix.

Statistische analyse: gegevens worden statistisch beschreven in termen van gemiddelde en standaarddeviatie, voor kwantitatieve gegevens en frequenties (aantal gevallen) en relatieve frequenties (percentages) voor kwalitatieve gegevens. Hardy-Weinberg (H-W) Evenwicht voor elk polymorfisme zal worden getest met behulp van de Chi-kwadraattoets. Vergelijking van kwantitatieve variabelen zal worden gedaan met behulp van een ongepaarde t-toets bij het vergelijken van 2 categorieën en eenzijdige variantieanalyse (ANOVA) met een post-hoctoets bij het vergelijken van meer dan 2 categorieën.

Voor het vergelijken van categorische gegevens wordt een Chi-kwadraat-test uitgevoerd. In plaats daarvan wordt de exacte test gebruikt wanneer de verwachte frequentie minder dan 5 is.

Genotype- en allelfrequenties zullen worden vergeleken tussen de ziekte- en de controlegroepen met behulp van chi-kwadraattesten. Odds ratio (OR) met 95% betrouwbaarheidsintervallen wordt berekend. Een waarschijnlijkheidswaarde (P-waarde) van minder dan 0,05 wordt als statistisch significant beschouwd. Alle statistische berekeningen worden uitgevoerd met behulp van SPSS (Statistical Package for the Social Science; SPSS Inc., Chicago, IL, VS) versie 22.