Vliv lyzátu krevních destiček na hojení rohovkových epiteliálních ran ---sbírka lidského séra od dobrovolníků

„Problém špatné epitelizace rohovky“ lze nalézt u mnoha poruch očního povrchu, včetně limbální insuficience, suchého oka, chemického popálení a neurotrofických poruch. Opožděná epitelizace rohovky za jakýchkoli okolností může vést k infekci rohovky, tání rohovky, zákalu rohovky, bolesti nebo rozmazanému vidění. Je proto důležité vyvinout farmakologické metody pro podporu hojení rohovkových epiteliálních ran u těchto pacientů. Dříve bylo prokázáno, že různé epiteliotrofní růstové faktory, autologní sérum, sérum z pupečníkové krve atd. jsou účinné při podpoře hojení rohovkových epiteliálních ran. Tato topická činidla však mají nevýhody zahrnující obtíže při přípravě, drahou cenu, nestandardní kvalitu a riziko kontaminace během přípravy. Bude klinicky důležité najít jiné krevní deriváty, které jsou účinné, vhodné pro použití, stabilní v kvalitě a jsou levné.

Během několika posledních let bylo prokázáno, že různé "krevní deriváty související s krevními destičkami" obsahují mnoho epiteliotrofních růstových faktorů a mohou podporovat hojení ran. Mezi těmito produkty má "lyzát krevních destiček" tu výhodu, že je komerčně dostupný. Může se vyhnout složitému výrobnímu postupu a má stabilní kvalitu. Přestože lyzát krevních destiček byl široce používán v různých lékařských oborech, zejména při kultivaci mezenchymálních kmenových buněk, jeho potenciál při podpoře hojení rohovkových epiteliálních ran nebyl prokázán. Účelem tohoto projektu je prozkoumat možnost použití lyzátu krevních destiček k léčbě pacientů se špatným problémem epitelizace rohovky a porovnat jeho epiteliotrofní schopnost s jinými krevními deriváty. Kultivovaná lidská epiteliální buněčná linie rohovky bude použita pro všechny experimenty a bude kultivována s médii obsahujícími různé krevní produkty: (1) kontrolní skupina bez krevních derivátů, (2) fetální bovinní sérum, (3) lidské sérum, (4) lyzát krevních destiček komerční produkt-UltraGro, (5)komerční produkt lyzátu krevních destiček ---PlatMax. K měření schopnosti proliferace bude použit test MTS. K měření buněčné migrace se použijí „test směrového poranění vyvolaného poškrábáním" a „test chemotaxe Boydenovy komory". K měření buněčné diferenciace bude použita rastrovací elektronová mikroskopie, transmisní elektronová mikroskopie, transepiteliální elektrický odpor (TEER) a imunohistochemie s junkčními proteiny. Prostřednictvím těchto experimentů se výzkumník snaží pochopit, zda lyzát krevních destiček může nahradit jiné krevní deriváty a zda jej lze použít k léčbě pacientů s problémem epitelizace rohovky.

Kromě toho jsou všechny současné léky na suché oko všechny vyráběny, přepravovány a používány v tekuté formě. Je však více znepokojující při přepravě, komercializaci, skladování a omezení data expirace u současných léků ve srovnání s léky v práškové formě. Proto se kritickým problémem stalo zlepšení pohodlí při používání a skladování bez na úkor účinnosti krevních derivátů. Cílem naší studie bylo také pokusit se vyrobit deriváty související s krevními destičkami (včetně lyzátu krevních destiček) a lidské sérum do formy suchého prášku a resuspendovat je umělými slzami bez konzervačních látek. Výzkumník by porovnal epiteliotrofní schopnost kapalné formy krevních derivátů a práškové formy krevních derivátů.

Vzhledem k tomu, že pro srovnání je potřeba lidské sérum, výzkumník navrhl tuto IRB k odběru lidského séra od zdravých dobrovolníků.