Влияние лизата тромбоцитов на заживление раны эпителия роговицы --- сбор сыворотки крови добровольцев

«Проблему плохой эпителизации роговицы» можно обнаружить при многих заболеваниях поверхности глаза, включая лимбальную недостаточность, сухость глаз, химический ожог и нейротрофические расстройства. Замедленная эпителизация роговицы при любых обстоятельствах может привести к инфекции роговицы, расплавлению роговицы, помутнению роговицы, боли или нечеткости зрения. Таким образом, важно разработать фармакологические методы, способствующие заживлению эпителиальных ран роговицы у таких пациентов. Ранее было доказано, что различные эпителиотропные факторы роста, аутологичная сыворотка, сыворотка пуповинной крови и т. д. способствуют заживлению эпителиальных ран роговицы. Однако эти средства для местного применения имеют недостатки, в том числе трудности при приготовлении, высокую цену, нестандартное качество и риск контаминации при приготовлении. Клинически важно будет найти другие производные крови, эффективные, удобные в использовании, стабильные по качеству и недорогие.

В течение последних нескольких лет было доказано, что различные «тромбоцитарные производные крови» содержат большое количество эпителиотрофных факторов роста и могут способствовать заживлению ран. Среди этих продуктов «лизат тромбоцитов» имеет то преимущество, что он коммерчески доступен. Это позволяет избежать сложной процедуры производства и имеет стабильное качество. Хотя лизат тромбоцитов широко используется в различных областях медицины, особенно при культивировании мезенхимальных стволовых клеток, его способность стимулировать заживление эпителиальных ран роговицы не доказана. Целью этого проекта является изучение возможности использования лизата тромбоцитов для лечения пациентов с плохой эпителизацией роговицы и сравнение его эпителиотрофической способности с другими производными крови. Культивируемая линия эпителиальных клеток роговицы человека будет использоваться для всех экспериментов и будет культивироваться на средах, содержащих различные продукты крови: (1) контрольная группа без производных крови, (2) фетальная бычья сыворотка, (3) человеческая сыворотка, (4) коммерческий продукт лизата тромбоцитов-UltraGro, (5)коммерческий продукт лизата тромбоцитов---PlatMax. Анализ MTS будет использоваться для измерения способности к пролиферации. «Испытание направленного ранения, вызванного царапинами» и «анализ хемотаксиса в камере Бойдена» будут использоваться для измерения миграции клеток. Сканирующая электронная микроскопия, просвечивающая электронная микроскопия, трансэпителиальное электрическое сопротивление (TEER) и иммуногистохимия с соединительными белками будут использоваться для измерения клеточной дифференцировки. С помощью этих экспериментов исследователи стремятся понять, может ли лизат тромбоцитов заменить другие производные крови и использоваться для лечения пациентов с проблемой эпителизации роговицы.

Кроме того, все современные лекарства от сухости глаз производятся, транспортируются и используются в жидкой форме. Тем не менее, это больше беспокоит при транспортировке, коммерциализации, хранении и ограничении срока годности для текущих лекарств по сравнению с лекарствами в форме порошка. Поэтому повышение удобства использования и хранения без ущерба для эффективности производных крови стало критически важным вопросом. Наше исследование также было направлено на получение производных тромбоцитов (включая лизат тромбоцитов) и человеческой сыворотки в виде сухого порошка и ресуспендирования их с искусственными слезами без консервантов. Исследователь сравнил бы эпителиотропную способность жидких форм производных крови и порошкообразной формы производных крови.

Поскольку для сравнения необходима человеческая сыворотка, исследователь предложил этот IRB для сбора человеческой сыворотки у здоровых добровольцев.