Wpływ lizatu płytek krwi na gojenie się ran nabłonka rogówki --- pobranie ludzkiej surowicy od ochotników

„Problem słabego nabłonka rogówki” można znaleźć w wielu zaburzeniach powierzchni oka, w tym w niewydolności rąbka, suchości oka, oparzeniach chemicznych i zaburzeniach neurotroficznych. Opóźniona epitelializacja rogówki w każdych okolicznościach może prowadzić do zakażenia rogówki, stopienia rogówki, zmętnienia rogówki, bólu lub niewyraźnego widzenia. Dlatego ważne jest opracowanie metod farmakologicznych wspomagających gojenie się ran nabłonka rogówki u tych pacjentów. Wcześniej udowodniono, że różne epiteliotroficzne czynniki wzrostu, surowica autologiczna, surowica krwi pępowinowej itp. są skuteczne w promowaniu gojenia się ran nabłonka rogówki. Jednak te środki miejscowe mają wady, w tym trudności podczas przygotowania, wysoką cenę, nieznormalizowaną jakość i ryzyko zanieczyszczenia podczas przygotowania. Klinicznie ważne będzie znalezienie innych preparatów krwiopochodnych, które będą skuteczne, wygodne w użyciu, stabilne jakościowo i tanie.

W ciągu ostatnich kilku lat wykazano, że różne „pochodne krwi związane z płytkami krwi” zawierają wiele nabłonkowych czynników wzrostu i mogą sprzyjać gojeniu się ran. Spośród tych produktów „lizat płytek krwi” ma tę zaletę, że jest dostępny w handlu. Pozwala uniknąć skomplikowanej procedury produkcji i ma stabilną jakość. Chociaż lizat płytek krwi był szeroko stosowany w różnych dziedzinach medycyny, zwłaszcza w hodowli mezenchymalnych komórek macierzystych, jego potencjał w promowaniu gojenia ran nabłonka rogówki nie został udowodniony. Celem tego projektu jest zbadanie możliwości zastosowania lizatu płytek krwi w leczeniu pacjentów ze słabym problemem epitelializacji rogówki i porównanie jego zdolności epiteliotropowych z innymi pochodnymi krwi. Wyhodowana linia ludzkich komórek nabłonka rogówki będzie używana we wszystkich doświadczeniach i będzie hodowana z pożywkami zawierającymi różne produkty krwi: (1) grupa kontrolna bez pochodnych krwi, (2) płodowa surowica bydlęca, (3) ludzka surowica, (4) lizat płytek krwi, produkt handlowy-UltraGro, (5) lizat płytek krwi, produkt handlowy---PlatMax. Test MTS zostanie zastosowany do pomiaru zdolności do proliferacji. „Test kierunkowego zranienia indukowanego zadrapaniem” i „test chemotaksji w komorze Boydena” zostaną użyte do pomiaru migracji komórek. Skaningowa mikroskopia elektronowa, transmisyjna mikroskopia elektronowa, przeznabłonkowy opór elektryczny (TEER) i immunohistochemia z białkami łączącymi zostaną wykorzystane do pomiaru zróżnicowania komórkowego. Dzięki tym eksperymentom badacz ma na celu zrozumienie, czy lizat płytek krwi może zastąpić inne pochodne krwi i czy może być stosowany w leczeniu pacjentów z problemem nabłonka rogówki.

Poza tym wszystkie obecne leki na zespół suchego oka są produkowane, transportowane i stosowane w postaci płynnej. Jest jednak bardziej uciążliwy w transporcie, komercjalizacji, przechowywaniu i ograniczeniu daty ważności obecnych leków w porównaniu z lekami w postaci proszku. Dlatego poprawa wygody stosowania i przechowywania bez kosztu skuteczności preparatów krwiopochodnych stała się kwestią krytyczną. Nasze badanie miało również na celu próbę wytworzenia pochodnych płytek krwi (w tym lizatu płytek krwi) i surowicy ludzkiej w postaci suchego proszku i ponownego zawieszenia go w sztucznych łzach bez środków konserwujących. Badacz porównałby zdolność epiteliotroficzną płynnej postaci pochodnych krwi i sproszkowanej postaci pochodnych krwi.

Ponieważ do porównania potrzebna jest ludzka surowica, badacz zaproponował tę IRB do zebrania ludzkiej surowicy od zdrowych ochotników.