LRP1 a rakovina tlustého střeva

Kolorektální karcinom (CRC) je hlavním problémem veřejného zdraví ve Francii a na celém světě. CRC je ve Francii třetí nejčastější rakovinou v incidenci a mortalitě. Velká většina těchto rakovin jsou adenokarcinomy, které vznikají sporadicky a vyvíjejí se z prekurzorových lézí: adenomu. Všechny CRC se stejným stádiem onemocnění nemají stejnou prognózu. Byly identifikovány různé parametry jako faktory ovlivňující prognózu a umožňují úpravu léčby. Špatnými histoprognostickými faktory jsou přítomnost invaze nádorových cév a nervů nebo subtyp mucinózního adenokarcinomu. Na molekulární úrovni přítomnost mikrosatelitní nestability (MSI) zlepšuje prognózu, zatímco přítomnost mutace BRAF je nezávislým špatným prognostickým faktorem.

Proteinový receptor 1 související s lipoproteinem o nízké hustotě (LRP-1) je multifunkční endocytární receptor, který patří do rodiny LDL receptorů. Podílí se na odstraňování enzymů odpovědných za degradaci extracelulární matrix: matrixových proteáz. Tato role modulátoru proteolýzy matrice spojená s funkcí regulátoru buněčné migrace dává tomuto proteinu protirakovinnou roli. Protinádorová vlastnost LRP-1 byla prokázána u karcinomů štítné žlázy in vitro. V těchto studiích ztráta exprese LRP-1 nebo snížení aktivity LRP-1 korelovaly se zvýšením migrace a invaze rakovinných buněk. Opačný účinek byl však pozorován u buněčných linií rakoviny prostaty.

Klinický dopad úrovně exprese LRP-1 na celkové přežití pacientů s rakovinou byl hodnocen ve dvou studiích: jedna na pacientech trpících hepatocelulárním karcinomem a jedna na pacientech trpících primitivními plicními adenokarcinomy. V obou studiích pokles imunohistochemické a genové exprese LRP-1 koreloval s celkovým poklesem přežití. U CRC byla dosud publikována pouze jedna imunohistochemická studie exprese LRP-1. Tato studie ukazuje, že adenokarcinomatózní buňky exprimují LRP-1, ale v téměř polovině případů slabší než v normálních buňkách tlustého střeva. Klinický a prognostický dopad exprese LRP-1 u rakoviny tlustého střeva a její asociace s konkrétním molekulárním nebo morfologickým profilem nebyl dosud studován.

V této práci budou výzkumníci studovat imunohistochemickou a genovou expresi LRP-1 v dobře charakterizované sérii CRC.

Hlavním cílem této studie je pomocí genových a imunohistochemických přístupů studovat roli LRP-1 v agresivitě adenokarcinomů tlustého střeva.

Sekundárním cílem této studie je hledání souvislostí mezi hladinou exprese LRP-1 a morfologickými nebo molekulárními profily adenokarcinomů tlustého střeva

Tato studie bude první, která prozkoumá expresi LRP-1 u dobře charakterizovaných rakovin tlustého střeva různých morfologických a molekulárních profilů. Tato studie pomůže rozšířit znalosti o prognostické úloze LRP-1 u rakoviny tlustého střeva a její možné souvislosti s klinickými, morfologickými nebo molekulárními parametry.

Bude provedena retrospektivní kohortová studie, jedno centrum.

Vyšetřovatelé nejprve navrhnou seznam všech způsobilých pacientů pomocí žádanky v softwaru DIAMIC patologického oddělení s kódem komponenty „colon“, kódem poškození „adenokarcinom“ a obdobím „mezi lety 2006 a 2012“. Pacienti trpící Lynchovým syndromem nebo jiným familiárním rakovinovým syndromem budou ze studie vyloučeni. Všem vybraným pacientům bude zaslán informovaný souhlas.

Jakmile bude seznam pacientů dokončen:

• Ve zdravotnické dokumentaci pacientů budou přezkoumány: sociodemografické a klinické údaje lokalizace nádoru tlustého střeva, přítomnost synchronních metastáz, typ a délka léčby, sledování pacienta do data 01.06.2014 bod (výskyt metastáz, recidiva onemocnění, úmrtí pacienta , ...).
• Centrální přehled všech patologických preparátů bude proveden pro tato kritéria: subtyp adenokarcinomu podle klasifikace WHO 2010, diferenciace, asociace s polypy a jejich typy, stadium pTNM, fronta invaze a pučení, typ stromatu, přítomnost a množství nekrózy tumoru).

• Imunohistochemická analýza na tkáni fixované formalínem a zalité v parafínu bude provedena:

  • kvalitativní a semikvantitativní hodnocení imunoexprese LRP1 s protilátkami anti-5A6 a 8G1
  • Výzkum fenotypu RER (imunhistochemie MLH1, MSH2, MSH6 a PMS2) a imunohistochemie BRAF V600E

• Molekulární analýzy:

  • analýza exprese genu LRP-1 na zmrazené tkáni
  • pro vybrané případy: hledání nestability mikrosatelitů, hledání mutace BRAF V600E, KRAS (exon 2, 3 a 4) a NRAS (exon 2, 3 a 4) na tkáni fixované formalínem a zalité v parafínu

Statistická analýza:

• Popis dat: průměr a standardní odchylka pro kvantitativní proměnné; počet a procento pro kategorické proměnné.
• Porovnání nádorů s vysokou expresí LRP-1 a nádorů, které neexprimují nebo málo exprimují LRP-1, pomocí jednorozměrné analýzy (Studentův test a Wilcoxonův test, Chi2 nebo Fisherův exaktní) a multivariační (logistická regrese).
• Hledejte faktory spojené s výsledky pacienta, včetně exprese LRP1, pomocí jednorozměrné analýzy (log-rank test) a vícerozměrné (Coxův model).

Kolorektální karcinom (CRC) je hlavním problémem veřejného zdraví ve Francii a na celém světě. CRC je ve Francii třetí nejčastější rakovinou v incidenci a mortalitě. Velká většina těchto rakovin jsou adenokarcinomy, které vznikají sporadicky a vyvíjejí se z prekurzorových lézí: adenomu. Všechny CRC se stejným stádiem onemocnění nemají stejnou prognózu. Byly identifikovány různé parametry jako faktory ovlivňující prognózu a umožňují úpravu léčby. Špatnými histoprognostickými faktory jsou přítomnost invaze nádorových cév a nervů nebo subtyp mucinózního adenokarcinomu. Na molekulární úrovni přítomnost mikrosatelitní nestability (MSI) zlepšuje prognózu, zatímco přítomnost mutace BRAF je nezávislým špatným prognostickým faktorem.

Proteinový receptor 1 související s lipoproteinem o nízké hustotě (LRP-1) je multifunkční endocytární receptor, který patří do rodiny LDL receptorů. Podílí se na odstraňování enzymů odpovědných za degradaci extracelulární matrix: matrixových proteáz. Tato role modulátoru proteolýzy matrice spojená s funkcí regulátoru buněčné migrace dává tomuto proteinu protirakovinnou roli. Protinádorová vlastnost LRP-1 byla prokázána u karcinomů štítné žlázy in vitro. V těchto studiích ztráta exprese LRP-1 nebo snížení aktivity LRP-1 korelovaly se zvýšením migrace a invaze rakovinných buněk. Opačný účinek byl však pozorován u buněčných linií rakoviny prostaty.

Klinický dopad úrovně exprese LRP-1 na celkové přežití pacientů s rakovinou byl hodnocen ve dvou studiích: jedna na pacientech trpících hepatocelulárním karcinomem a jedna na pacientech trpících primitivními plicními adenokarcinomy. V obou studiích pokles imunohistochemické a genové exprese LRP-1 koreloval s celkovým poklesem přežití. U CRC byla dosud publikována pouze jedna imunohistochemická studie exprese LRP-1. Tato studie ukazuje, že adenokarcinomatózní buňky exprimují LRP-1, ale v téměř polovině případů slabší než v normálních buňkách tlustého střeva. Klinický a prognostický dopad exprese LRP-1 u rakoviny tlustého střeva a její asociace s konkrétním molekulárním nebo morfologickým profilem nebyl dosud studován.

V této práci budou výzkumníci studovat imunohistochemickou a genovou expresi LRP-1 v dobře charakterizované sérii CRC.

Hlavním cílem této studie je pomocí genových a imunohistochemických přístupů studovat roli LRP-1 v agresivitě adenokarcinomů tlustého střeva.

Sekundárním cílem této studie je hledání souvislostí mezi hladinou exprese LRP-1 a morfologickými nebo molekulárními profily adenokarcinomů tlustého střeva

Tato studie bude první, která prozkoumá expresi LRP-1 u dobře charakterizovaných rakovin tlustého střeva různých morfologických a molekulárních profilů. Tato studie pomůže rozšířit znalosti o prognostické úloze LRP-1 u rakoviny tlustého střeva a její možné souvislosti s klinickými, morfologickými nebo molekulárními parametry.

Bude provedena retrospektivní kohortová studie, jedno centrum.

Vyšetřovatelé nejprve navrhnou seznam všech způsobilých pacientů pomocí žádanky v softwaru DIAMIC patologického oddělení s kódem komponenty „colon“, kódem poškození „adenokarcinom“ a obdobím „mezi lety 2006 a 2012“. Pacienti trpící Lynchovým syndromem nebo jiným familiárním rakovinovým syndromem budou ze studie vyloučeni. Všem vybraným pacientům bude zaslán informovaný souhlas.

Jakmile bude seznam pacientů dokončen:

• Ve zdravotnické dokumentaci pacientů budou přezkoumány: sociodemografické a klinické údaje lokalizace nádoru tlustého střeva, přítomnost synchronních metastáz, typ a délka léčby, sledování pacienta do data 01.06.2014 bod (výskyt metastáz, recidiva onemocnění, úmrtí pacienta , ...).
• Centrální přehled všech patologických preparátů bude proveden pro tato kritéria: subtyp adenokarcinomu podle klasifikace WHO 2010, diferenciace, asociace s polypy a jejich typy, stadium pTNM, fronta invaze a pučení, typ stromatu, přítomnost a množství nekrózy tumoru).

• Imunohistochemická analýza na tkáni fixované formalínem a zalité v parafínu bude provedena:

  • kvalitativní a semikvantitativní hodnocení imunoexprese LRP1 s protilátkami anti-5A6 a 8G1
  • Výzkum fenotypu RER (imunhistochemie MLH1, MSH2, MSH6 a PMS2) a imunohistochemie BRAF V600E

• Molekulární analýzy:

  • analýza exprese genu LRP-1 na zmrazené tkáni
  • pro vybrané případy: hledání nestability mikrosatelitů, hledání mutace BRAF V600E, KRAS (exon 2, 3 a 4) a NRAS (exon 2, 3 a 4) na tkáni fixované formalínem a zalité v parafínu

Statistická analýza:

• Popis dat: průměr a standardní odchylka pro kvantitativní proměnné; počet a procento pro kategorické proměnné.
• Porovnání nádorů s vysokou expresí LRP-1 a nádorů, které neexprimují nebo málo exprimují LRP-1, pomocí jednorozměrné analýzy (Studentův test a Wilcoxonův test, Chi2 nebo Fisherův exaktní) a multivariační (logistická regrese).
• Hledejte faktory spojené s výsledky pacienta, včetně exprese LRP1, pomocí jednorozměrné analýzy (log-rank test) a vícerozměrné (Coxův model).