LRP1 y cáncer de colon

El cáncer colorrectal (CCR) es un importante problema de salud pública en Francia y en todo el mundo. El CCR es el tercer cáncer más común en incidencia y mortalidad en Francia. La gran mayoría de estos cánceres son adenocarcinomas que surgen esporádicamente y se desarrollan a partir de lesiones precursoras: adenoma. Todos los CCR con el mismo estadio de la enfermedad no tienen el mismo pronóstico. Varios parámetros han sido identificados como factores que influyen en el pronóstico y permiten ajustar el tratamiento. Los factores de mal pronóstico son la presencia de invasión tumoral de vasos y nervios o el subtipo de adenocarcinoma mucinoso. A nivel molecular, la presencia de inestabilidad de microsatélites (MSI) mejora el pronóstico, mientras que la presencia de una mutación BRAF es un factor independiente de mal pronóstico.

El Receptor 1 de proteínas relacionadas con lipoproteínas de baja densidad (LRP-1) es un receptor endocítico multifuncional que pertenece a la familia de los receptores de LDL. Está involucrado en el aclaramiento de enzimas responsables de la degradación de la matriz extracelular: las proteasas de matriz. Este papel de modulador de la proteólisis de la matriz asociado a una función de regulador de la migración celular confiere a esta proteína un papel anticancerígeno. La propiedad antitumoral de LRP-1 se ha demostrado en cánceres de tiroides in vitro. En estos estudios, la pérdida de expresión de LRP-1 o una disminución en la actividad de LRP-1 se correlacionó con un aumento de la migración e invasión de células cancerosas. Sin embargo, se observó el efecto contrario en líneas celulares de cáncer de próstata.

El impacto clínico del nivel de expresión de LRP-1 en la supervivencia global de pacientes con cáncer se evaluó en dos estudios: uno en pacientes que padecían carcinoma hepatocelular y otro en pacientes que padecían adenocarcinomas de pulmón primitivos. En ambos estudios, la disminución de la inmunohistoquímica y la expresión génica de LRP-1 se correlacionaron con una disminución de la supervivencia global. En CCR, hasta la fecha solo se ha publicado un estudio de expresión inmunohistoquímica de LRP-1. Este estudio muestra que las células adenocarcinomatosas expresan LRP-1, pero en casi la mitad de los casos, más débil que en las células colónicas normales. El impacto clínico y pronóstico de la expresión de LRP-1 en el cáncer de colon y su asociación con un perfil molecular o morfológico particular no ha sido estudiado hasta la fecha.

En este trabajo, los investigadores estudiarán la expresión inmunohistoquímica y génica de LRP-1 en una serie bien caracterizada de CCR.

El principal objetivo de este estudio es estudiar mediante enfoques génicos e inmunohistoquímicos el papel de LRP-1 en la agresividad de los adenocarcinomas de colon.

El objetivo secundario de este estudio es buscar asociaciones entre el nivel de expresión de LRP-1 y los perfiles morfológicos o moleculares de los adenocarcinomas de colon.

Este estudio será el primero en explorar la expresión de LRP-1 en cánceres de colon bien caracterizados de diferentes perfiles morfológicos y moleculares. Este estudio ayudará a aumentar el conocimiento sobre el papel pronóstico de LRP-1 en el cáncer de colon y su posible asociación con parámetros clínicos, morfológicos o moleculares.

Se realizará un estudio de cohorte retrospectivo, de centro único.

Los investigadores primero diseñarán la lista de todos los pacientes elegibles mediante una solicitud en el software DIAMIC del departamento de patología con código de componente "colon", código de daño "adenocarcinoma" y período "entre 2006 y 2012". Los pacientes que padezcan el síndrome de Lynch u otro síndrome de cáncer familiar serán excluidos del estudio. Se enviará consentimiento informado a todos los pacientes seleccionados.

Una vez completada la lista de pacientes:

• Se revisarán las historias clínicas de los pacientes para: datos sociodemográficos y clínicos ubicación del tumor colónico, presencia de metástasis sincrónicas, tipo y duración del tratamiento, seguimiento del paciente hasta la fecha del 06/01/2014 punto (aparición de metástasis, recurrencia de la enfermedad, muerte del paciente , ...).
• Se realizará una revisión central de todas las láminas patológicas para estos criterios: subtipo de adenocarcinoma según la clasificación de la OMS 2010, diferenciación, asociación con pólipos y sus tipos, estadio pTNM, frente de invasión y gemación, tipo de estroma, presencia y cantidad de necrosis tumoral).

• Se realizarán análisis inmunohistoquímicos en tejido fijado en formalina e incluido en parafina:

  • evaluación cualitativa y semicuantitativa de la inmunoexpresión de LRP1 con anticuerpos anti-5A6 y 8G1
  • Investigación del fenotipo RER (inmunohistoquímica MLH1, MSH2, MSH6 y PMS2) e inmunohistoquímica BRAF V600E

• Análisis moleculares:

  • análisis de la expresión del gen LRP-1 en tejido congelado
  • para casos seleccionados: búsqueda de inestabilidad de microsatélites, búsqueda de mutación BRAF V600E, KRAS (exón 2, 3 y 4) y NRAS (exón 2, 3 y 4) en tejido fijado en formalina e incluido en parafina

Análisis estadístico:

• Descripción de datos: media y desviación estándar para variables cuantitativas; número y porcentaje para variables categóricas.
• Comparación de tumores con alta expresión de LRP-1 y tumores que no o poco expresan LRP-1 mediante análisis univariado (test de Student y test de Wilcoxon, Chi2 o exacto de Fisher) y multivariado (regresión logística).
• Búsqueda de factores asociados a los resultados de los pacientes, incluida la expresión de LRP1, mediante análisis univariado (log-rank test) y multivariado (modelo de Cox).

El cáncer colorrectal (CCR) es un importante problema de salud pública en Francia y en todo el mundo. El CCR es el tercer cáncer más común en incidencia y mortalidad en Francia. La gran mayoría de estos cánceres son adenocarcinomas que surgen esporádicamente y se desarrollan a partir de lesiones precursoras: adenoma. Todos los CCR con el mismo estadio de la enfermedad no tienen el mismo pronóstico. Varios parámetros han sido identificados como factores que influyen en el pronóstico y permiten ajustar el tratamiento. Los factores de mal pronóstico son la presencia de invasión tumoral de vasos y nervios o el subtipo de adenocarcinoma mucinoso. A nivel molecular, la presencia de inestabilidad de microsatélites (MSI) mejora el pronóstico, mientras que la presencia de una mutación BRAF es un factor independiente de mal pronóstico.

El Receptor 1 de proteínas relacionadas con lipoproteínas de baja densidad (LRP-1) es un receptor endocítico multifuncional que pertenece a la familia de los receptores de LDL. Está involucrado en el aclaramiento de enzimas responsables de la degradación de la matriz extracelular: las proteasas de matriz. Este papel de modulador de la proteólisis de la matriz asociado a una función de regulador de la migración celular confiere a esta proteína un papel anticancerígeno. La propiedad antitumoral de LRP-1 se ha demostrado en cánceres de tiroides in vitro. En estos estudios, la pérdida de expresión de LRP-1 o una disminución en la actividad de LRP-1 se correlacionó con un aumento de la migración e invasión de células cancerosas. Sin embargo, se observó el efecto contrario en líneas celulares de cáncer de próstata.

El impacto clínico del nivel de expresión de LRP-1 en la supervivencia global de pacientes con cáncer se evaluó en dos estudios: uno en pacientes que padecían carcinoma hepatocelular y otro en pacientes que padecían adenocarcinomas de pulmón primitivos. En ambos estudios, la disminución de la inmunohistoquímica y la expresión génica de LRP-1 se correlacionaron con una disminución de la supervivencia global. En CCR, hasta la fecha solo se ha publicado un estudio de expresión inmunohistoquímica de LRP-1. Este estudio muestra que las células adenocarcinomatosas expresan LRP-1, pero en casi la mitad de los casos, más débil que en las células colónicas normales. El impacto clínico y pronóstico de la expresión de LRP-1 en el cáncer de colon y su asociación con un perfil molecular o morfológico particular no ha sido estudiado hasta la fecha.

En este trabajo, los investigadores estudiarán la expresión inmunohistoquímica y génica de LRP-1 en una serie bien caracterizada de CCR.

El principal objetivo de este estudio es estudiar mediante enfoques génicos e inmunohistoquímicos el papel de LRP-1 en la agresividad de los adenocarcinomas de colon.

El objetivo secundario de este estudio es buscar asociaciones entre el nivel de expresión de LRP-1 y los perfiles morfológicos o moleculares de los adenocarcinomas de colon.

Este estudio será el primero en explorar la expresión de LRP-1 en cánceres de colon bien caracterizados de diferentes perfiles morfológicos y moleculares. Este estudio ayudará a aumentar el conocimiento sobre el papel pronóstico de LRP-1 en el cáncer de colon y su posible asociación con parámetros clínicos, morfológicos o moleculares.

Se realizará un estudio de cohorte retrospectivo, de centro único.

Los investigadores primero diseñarán la lista de todos los pacientes elegibles mediante una solicitud en el software DIAMIC del departamento de patología con código de componente "colon", código de daño "adenocarcinoma" y período "entre 2006 y 2012". Los pacientes que padezcan el síndrome de Lynch u otro síndrome de cáncer familiar serán excluidos del estudio. Se enviará consentimiento informado a todos los pacientes seleccionados.

Una vez completada la lista de pacientes:

• Se revisarán las historias clínicas de los pacientes para: datos sociodemográficos y clínicos ubicación del tumor colónico, presencia de metástasis sincrónicas, tipo y duración del tratamiento, seguimiento del paciente hasta la fecha del 06/01/2014 punto (aparición de metástasis, recurrencia de la enfermedad, muerte del paciente , ...).
• Se realizará una revisión central de todas las láminas patológicas para estos criterios: subtipo de adenocarcinoma según la clasificación de la OMS 2010, diferenciación, asociación con pólipos y sus tipos, estadio pTNM, frente de invasión y gemación, tipo de estroma, presencia y cantidad de necrosis tumoral).

• Se realizarán análisis inmunohistoquímicos en tejido fijado en formalina e incluido en parafina:

  • evaluación cualitativa y semicuantitativa de la inmunoexpresión de LRP1 con anticuerpos anti-5A6 y 8G1
  • Investigación del fenotipo RER (inmunohistoquímica MLH1, MSH2, MSH6 y PMS2) e inmunohistoquímica BRAF V600E

• Análisis moleculares:

  • análisis de la expresión del gen LRP-1 en tejido congelado
  • para casos seleccionados: búsqueda de inestabilidad de microsatélites, búsqueda de mutación BRAF V600E, KRAS (exón 2, 3 y 4) y NRAS (exón 2, 3 y 4) en tejido fijado en formalina e incluido en parafina

Análisis estadístico:

• Descripción de datos: media y desviación estándar para variables cuantitativas; número y porcentaje para variables categóricas.
• Comparación de tumores con alta expresión de LRP-1 y tumores que no o poco expresan LRP-1 mediante análisis univariado (test de Student y test de Wilcoxon, Chi2 o exacto de Fisher) y multivariado (regresión logística).
• Búsqueda de factores asociados a los resultados de los pacientes, incluida la expresión de LRP1, mediante análisis univariado (log-rank test) y multivariado (modelo de Cox).