LRP1 og tykktarmskreft

Kolorektal kreft (CRC) er et stort folkehelseproblem i Frankrike og over hele verden. CRC er den tredje vanligste kreftformen i insidens og dødelighet i Frankrike. De aller fleste av disse kreftformene er adenokarsinomer som oppstår sporadisk og utvikler seg fra forløperlesjoner: adenom. Alle CRC med samme sykdomsstadium har ikke samme prognose. Ulike parametere er identifisert som faktorer som påvirker prognosen og tillater justering av behandlingen. De dårlige histoprognostiske faktorene er tilstedeværelsen av tumorkar og nerveinvasjon eller den mucinøse adenokarsinom-subtypen. På molekylært nivå forbedrer tilstedeværelsen av mikrosatellitt-instabilitet (MSI) prognosen, mens tilstedeværelsen av en BRAF-mutasjon er en uavhengig dårlig prognostisk faktor.

Lavdensitets lipoproteinrelatert proteinreseptor 1 (LRP-1) er en multifunksjonell endocytisk reseptor som tilhører familien av LDL-reseptorer. Han er involvert i fjerningen av enzymer som er ansvarlige for nedbrytningen av den ekstracellulære matrisen: matriksproteasene. Denne rollen som matriseproteolysemodulator assosiert med en funksjon av cellemigrasjonsregulator gir dette proteinet en antikreftrolle. Antitumoregenskapen til LRP-1 er påvist i skjoldbruskkjertelkreft in vitro. I disse studiene var tap av LRP-1-ekspresjon eller en reduksjon i LRP-1-aktiviteten korrelert med en økning i migrasjon og invasjon av kreftceller. Imidlertid ble den motsatte effekten observert i prostatakreftcellelinjer.

Den kliniske effekten av nivået av LRP-1-ekspresjon på total overlevelse av kreftpasienter har blitt vurdert i to studier: en på pasienter som lider av hepatocellulært karsinom og en på pasienter som lider av primitive lungeadenokarsinomer. I begge studiene korrelerte reduksjonen av immunhistokjemisk og genuttrykk av LRP-1 med total overlevelsesreduksjon. I CRC har bare en immunhistokjemisk ekspresjonsstudie av LRP-1 blitt publisert til dags dato. Denne studien viser at adenokarsinomatøse celler uttrykker LRP-1, men i nesten halvparten av tilfellene svakere enn i normale tykktarmsceller. Den kliniske og prognostiske effekten av LRP-1-ekspresjon i tykktarmskreft og dens assosiasjon med en bestemt molekylær eller morfologisk profil har ikke blitt studert til dags dato.

I dette arbeidet vil etterforskerne studere det immunhistokjemiske og geniske uttrykket av LRP-1 i en godt karakterisert serie av CRC.

Hovedmålet med denne studien er å studere rollen til LRP-1 ved hjelp av geniske og immunhistokjemiske tilnærminger i aggressiviteten til tykktarmsadenokarsinomer.

Det sekundære målet med denne studien er å søke etter assosiasjoner mellom LRP-1-ekspresjonsnivå og morfologiske eller molekylære profiler av adenokarsinomer i tykktarmen

Denne studien vil være den første som utforsker uttrykket av LRP-1 i godt karakteriserte tykktarmskreft med forskjellige morfologiske og molekylære profiler. Denne studien vil bidra til å øke kunnskapen om den prognostiske rollen til LRP-1 i tykktarmskreft og dens mulige assosiasjon med kliniske, morfologiske eller molekylære parametere.

Det vil være en retrospektiv kohortstudie, enkeltsenter.

Etterforskerne vil først utforme listen over alle kvalifiserte pasienter ved å bruke en forespørsel i programvaren DIAMIC fra patologiavdelingen med komponentkode "colon", skadekode "adenocarcinoma" og perioden "mellom 2006 og 2012". Pasienter som lider av Lynch syndrom eller annet familiært kreftsyndrom vil bli ekskludert fra studien. Informert samtykke vil bli sendt til alle de valgte pasientene.

Når pasientlisten er fullført:

• Pasientenes journal vil bli gjennomgått for: sosiodemografiske og kliniske data lokalisering av tykktarmssvulst, tilstedeværelse av synkrone metastaser, behandlingstype og varighet, pasientoppfølging til datoen 01.06.2014 punkt (metastaseforekomst, tilbakefall av sykdom, pasientdød , ...).
• En sentral gjennomgang av alle patologiske lysbilder vil bli utført for disse kriteriene: adenokarsinom subtype i henhold til WHO 2010 klassifisering, differensiering, assosiasjon med polypper og deres typer, pTNM stadium, invasjonsfront og spirende, stromatype, tilstedeværelse og mengde tumornekrose).

• Immunhistokjemisk analyse på formalinfiksert og parafininnstøpt vev vil bli utført:

  • kvalitativ og semikvantitativ evaluering av LRP1 immunuttrykk med anti-5A6 og 8G1 antistoffer
  • RER-fenotypeforskning (MLH1, MSH2, MSH6 og PMS2 immunhistokjemi) og BRAF V600E immunhistokjemi

• Molekylære analyser:

  • analyse av LRP-1 genuttrykk på frosset vev
  • for utvalgte tilfeller: søk etter mikrosatellitt-ustabilitet, søk etter BRAF V600E, KRAS (ekson 2, 3 og 4) og NRAS (ekson 2, 3 og 4) mutasjon på formalinfiksert og parafininnstøpt vev

Statistisk analyse:

• Databeskrivelse: gjennomsnitt og standardavvik for kvantitative variabler; antall og prosent for kategoriske variabler.
• Sammenligning av svulster som har et høyt uttrykk av LRP-1 og svulster som ikke eller lite uttrykker LRP-1 ved univariat analyse (Students test og Wilcoxon-testen, Chi2 eller Fishers eksakte) og multivariat (logistisk regresjon).
• Søkefaktorer assosiert med pasientutfall, inkludert uttrykk for LRP1, ved univariat analyse (log-rank test) og multivariat (Cox-modell).

Kolorektal kreft (CRC) er et stort folkehelseproblem i Frankrike og over hele verden. CRC er den tredje vanligste kreftformen i insidens og dødelighet i Frankrike. De aller fleste av disse kreftformene er adenokarsinomer som oppstår sporadisk og utvikler seg fra forløperlesjoner: adenom. Alle CRC med samme sykdomsstadium har ikke samme prognose. Ulike parametere er identifisert som faktorer som påvirker prognosen og tillater justering av behandlingen. De dårlige histoprognostiske faktorene er tilstedeværelsen av tumorkar og nerveinvasjon eller den mucinøse adenokarsinom-subtypen. På molekylært nivå forbedrer tilstedeværelsen av mikrosatellitt-instabilitet (MSI) prognosen, mens tilstedeværelsen av en BRAF-mutasjon er en uavhengig dårlig prognostisk faktor.

Lavdensitets lipoproteinrelatert proteinreseptor 1 (LRP-1) er en multifunksjonell endocytisk reseptor som tilhører familien av LDL-reseptorer. Han er involvert i fjerningen av enzymer som er ansvarlige for nedbrytningen av den ekstracellulære matrisen: matriksproteasene. Denne rollen som matriseproteolysemodulator assosiert med en funksjon av cellemigrasjonsregulator gir dette proteinet en antikreftrolle. Antitumoregenskapen til LRP-1 er påvist i skjoldbruskkjertelkreft in vitro. I disse studiene var tap av LRP-1-ekspresjon eller en reduksjon i LRP-1-aktiviteten korrelert med en økning i migrasjon og invasjon av kreftceller. Imidlertid ble den motsatte effekten observert i prostatakreftcellelinjer.

Den kliniske effekten av nivået av LRP-1-ekspresjon på total overlevelse av kreftpasienter har blitt vurdert i to studier: en på pasienter som lider av hepatocellulært karsinom og en på pasienter som lider av primitive lungeadenokarsinomer. I begge studiene korrelerte reduksjonen av immunhistokjemisk og genuttrykk av LRP-1 med total overlevelsesreduksjon. I CRC har bare en immunhistokjemisk ekspresjonsstudie av LRP-1 blitt publisert til dags dato. Denne studien viser at adenokarsinomatøse celler uttrykker LRP-1, men i nesten halvparten av tilfellene svakere enn i normale tykktarmsceller. Den kliniske og prognostiske effekten av LRP-1-ekspresjon i tykktarmskreft og dens assosiasjon med en bestemt molekylær eller morfologisk profil har ikke blitt studert til dags dato.

I dette arbeidet vil etterforskerne studere det immunhistokjemiske og geniske uttrykket av LRP-1 i en godt karakterisert serie av CRC.

Hovedmålet med denne studien er å studere rollen til LRP-1 ved hjelp av geniske og immunhistokjemiske tilnærminger i aggressiviteten til tykktarmsadenokarsinomer.

Det sekundære målet med denne studien er å søke etter assosiasjoner mellom LRP-1-ekspresjonsnivå og morfologiske eller molekylære profiler av adenokarsinomer i tykktarmen

Denne studien vil være den første som utforsker uttrykket av LRP-1 i godt karakteriserte tykktarmskreft med forskjellige morfologiske og molekylære profiler. Denne studien vil bidra til å øke kunnskapen om den prognostiske rollen til LRP-1 i tykktarmskreft og dens mulige assosiasjon med kliniske, morfologiske eller molekylære parametere.

Det vil være en retrospektiv kohortstudie, enkeltsenter.

Etterforskerne vil først utforme listen over alle kvalifiserte pasienter ved å bruke en forespørsel i programvaren DIAMIC fra patologiavdelingen med komponentkode "colon", skadekode "adenocarcinoma" og perioden "mellom 2006 og 2012". Pasienter som lider av Lynch syndrom eller annet familiært kreftsyndrom vil bli ekskludert fra studien. Informert samtykke vil bli sendt til alle de valgte pasientene.

Når pasientlisten er fullført:

• Pasientenes journal vil bli gjennomgått for: sosiodemografiske og kliniske data lokalisering av tykktarmssvulst, tilstedeværelse av synkrone metastaser, behandlingstype og varighet, pasientoppfølging til datoen 01.06.2014 punkt (metastaseforekomst, tilbakefall av sykdom, pasientdød , ...).
• En sentral gjennomgang av alle patologiske lysbilder vil bli utført for disse kriteriene: adenokarsinom subtype i henhold til WHO 2010 klassifisering, differensiering, assosiasjon med polypper og deres typer, pTNM stadium, invasjonsfront og spirende, stromatype, tilstedeværelse og mengde tumornekrose).

• Immunhistokjemisk analyse på formalinfiksert og parafininnstøpt vev vil bli utført:

  • kvalitativ og semikvantitativ evaluering av LRP1 immunuttrykk med anti-5A6 og 8G1 antistoffer
  • RER-fenotypeforskning (MLH1, MSH2, MSH6 og PMS2 immunhistokjemi) og BRAF V600E immunhistokjemi

• Molekylære analyser:

  • analyse av LRP-1 genuttrykk på frosset vev
  • for utvalgte tilfeller: søk etter mikrosatellitt-ustabilitet, søk etter BRAF V600E, KRAS (ekson 2, 3 og 4) og NRAS (ekson 2, 3 og 4) mutasjon på formalinfiksert og parafininnstøpt vev

Statistisk analyse:

• Databeskrivelse: gjennomsnitt og standardavvik for kvantitative variabler; antall og prosent for kategoriske variabler.
• Sammenligning av svulster som har et høyt uttrykk av LRP-1 og svulster som ikke eller lite uttrykker LRP-1 ved univariat analyse (Students test og Wilcoxon-testen, Chi2 eller Fishers eksakte) og multivariat (logistisk regresjon).
• Søkefaktorer assosiert med pasientutfall, inkludert uttrykk for LRP1, ved univariat analyse (log-rank test) og multivariat (Cox-modell).