LRP1 ja paksusuolensyöpä

Kolorektaalisyöpä (CRC) on suuri kansanterveysongelma Ranskassa ja maailmanlaajuisesti. CRC on Ranskan kolmanneksi yleisin syöpä ilmaantuvuuden ja kuolleisuuden perusteella. Suurin osa näistä syövistä on adenokarsinoomia, jotka syntyvät satunnaisesti ja kehittyvät esiastevaurioista: adenooma. Kaikilla CRC:illä, joilla on sama sairausvaihe, ei ole samaa ennustetta. Eri parametrit on tunnistettu ennusteeseen vaikuttaviksi tekijöiksi ja mahdollistavat hoidon säätämisen. Huonoja histoprognostisia tekijöitä ovat kasvainsuonten ja hermoinvaasioiden esiintyminen tai limakalvon adenokarsinooman alatyyppi. Molekyylitasolla mikrosatelliitin epävakauden (MSI) esiintyminen parantaa ennustetta, kun taas BRAF-mutaation esiintyminen on itsenäinen huono ennustetekijä.

Matalatiheyksinen lipoproteiiniin liittyvä proteiinireseptori 1 (LRP-1) on monitoiminen endosyyttinen reseptori, joka kuuluu LDL-reseptorien perheeseen. Hän osallistuu solunulkoisen matriisin hajoamisesta vastuussa olevien entsyymien, matriisiproteaasien, puhdistumiseen. Tämä matriisiproteolyysimodulaattorin rooli, joka liittyy solumigraatiosäätelijän toimintaan, antaa tälle proteiinille syövänvastaisen roolin. LRP-1:n kasvaimia estävä ominaisuus on osoitettu kilpirauhassyövissä in vitro. Näissä tutkimuksissa LRP-1:n ilmentymisen menetys tai LRP-1-aktiivisuuden väheneminen korreloi syöpäsolujen migraation ja invaasion lisääntymisen kanssa. Päinvastainen vaikutus havaittiin kuitenkin eturauhassyöpäsolulinjoissa.

LRP-1:n ilmentymisen tason kliinistä vaikutusta syöpäpotilaiden kokonaiseloonjäämiseen on arvioitu kahdessa tutkimuksessa: yksi hepatosellulaarisesta karsinoomasta ja toinen primitiivisistä keuhkojen adenokarsinoomista kärsivillä potilailla. Molemmissa tutkimuksissa LRP-1:n immunohistokemiallisen ja geeniekspression väheneminen korreloi kokonaiseloonjäämisen vähenemisen kanssa. CRC:ssä on tähän mennessä julkaistu vain yksi LRP-1:n immunohistokemiallinen ekspressiotutkimus. Tämä tutkimus osoittaa, että adenokarsinoomatoosit solut ekspressoivat LRP-1:tä, mutta lähes puolet tapauksista heikommin kuin normaalit paksusuolen solut. LRP-1:n ilmentymisen kliinistä ja prognostista vaikutusta paksusuolensyövässä ja sen yhteyttä tiettyyn molekyyli- tai morfologiseen profiiliin ei ole tähän mennessä tutkittu.

Tässä työssä tutkijat tutkivat LRP-1:n immunohistokemiallista ja geneettistä ilmentymistä hyvin karakterisoidussa CRC-sarjassa.

Tämän tutkimuksen päätavoitteena on tutkia geneettisillä ja immunohistokemiallisilla lähestymistavoilla LRP-1:n roolia paksusuolen adenokarsinoomien aggressiivuudessa.

Tämän tutkimuksen toissijaisena tavoitteena on etsiä yhteyksiä LRP-1-ekspressiotason ja paksusuolen adenokarsinoomien morfologisten tai molekyyliprofiilien välillä.

Tämä tutkimus on ensimmäinen, joka tutkii LRP-1:n ilmentymistä hyvin karakterisoiduissa paksusuolen syövissä, joilla on erilaisia ​​morfologisia ja molekyyliprofiileja. Tämä tutkimus auttaa lisäämään tietoa LRP-1:n prognostisesta roolista paksusuolen syövässä ja sen mahdollisesta yhteydestä kliinisiin, morfologisiin tai molekyyliparametreihin.

Tulee retrospektiivinen kohorttitutkimus, yksi keskus.

Tutkijat suunnittelevat ensin luettelon kaikista kelvollisista potilaista käyttämällä pyyntöä patologian osaston ohjelmistossa DIAMIC, jonka komponenttikoodi on "koolon", vauriokoodi "adenokarsinooma" ja ajanjakso "vuosien 2006 ja 2012 välillä". Lynchin oireyhtymää tai muuta familiaalista syöpäsyndroomaa sairastavat potilaat suljetaan pois tutkimuksesta. Tietoinen suostumus lähetetään kaikille valituille potilaille.

Kun potilasluettelo on valmis:

• Potilaiden potilastiedot tarkistetaan: sosiodemografiset ja kliiniset tiedot paksusuolen kasvaimen sijainti, synkronisten etäpesäkkeiden esiintyminen, hoidon tyyppi ja kesto, potilaan seuranta 1.6.2014 saakka (etäpesäkkeiden esiintyminen, taudin uusiutuminen, potilaan kuolema , ...).
• Näille kriteereille tehdään kaikkien patologisten diojen keskitetty katsaus: adenokarsinooman alatyyppi WHO 2010 -luokituksen mukaan, erilaistuminen, yhteys polyypeihin ja niiden tyyppeihin, pTNM-vaihe, invaasion eturintama ja silmujen muodostuminen, stroomatyyppi, kasvainnekroosin esiintyminen ja määrä).

• Immunohistokemiallinen analyysi formaliinilla kiinnitetylle ja parafiiniin upotetulle kudokselle suoritetaan:

  • LRP1-immunoekspression kvalitatiivinen ja semikvantitatiivinen arviointi anti-5A6- ja 8G1-vasta-aineilla
  • RER-fenotyyppitutkimus (MLH1, MSH2, MSH6 ja PMS2 immunohistokemia) ja BRAF V600E -immunohistokemia

• Molekyylianalyysit:

  • LRP-1-geenin ilmentymisen analyysi jäädytetyssä kudoksessa
  • valituissa tapauksissa: etsi mikrosatelliitin epävakautta, etsi BRAF V600E, KRAS (eksoni 2, 3 ja 4) ja NRAS (eksonit 2, 3 ja 4) mutaatiota formaliinilla kiinnitetystä ja parafiiniin upotetusta kudoksesta

Tilastollinen analyysi:

• Tietojen kuvaus: kvantitatiivisten muuttujien keskiarvo ja keskihajonta; luku ja prosenttiluku kategorisille muuttujille.
• Kasvaimien, joissa LRP-1:n ilmentyminen on korkea, ja kasvaimien, jotka eivät ilmennä tai ilmentävät vähän LRP-1:tä, vertailu yksimuuttujaanalyysillä (Studentin testi ja Wilcoxonin testi, Chi2 tai Fisherin tarkka) ja monimuuttuja-analyysillä (logistinen regressio).
• Hae potilaiden tuloksiin liittyviä tekijöitä, mukaan lukien LRP1:n ilmentyminen, yksimuuttujaanalyysillä (log-rank testi) ja monimuuttujalla (Cox-malli).

Kolorektaalisyöpä (CRC) on suuri kansanterveysongelma Ranskassa ja maailmanlaajuisesti. CRC on Ranskan kolmanneksi yleisin syöpä ilmaantuvuuden ja kuolleisuuden perusteella. Suurin osa näistä syövistä on adenokarsinoomia, jotka syntyvät satunnaisesti ja kehittyvät esiastevaurioista: adenooma. Kaikilla CRC:illä, joilla on sama sairausvaihe, ei ole samaa ennustetta. Eri parametrit on tunnistettu ennusteeseen vaikuttaviksi tekijöiksi ja mahdollistavat hoidon säätämisen. Huonoja histoprognostisia tekijöitä ovat kasvainsuonten ja hermoinvaasioiden esiintyminen tai limakalvon adenokarsinooman alatyyppi. Molekyylitasolla mikrosatelliitin epävakauden (MSI) esiintyminen parantaa ennustetta, kun taas BRAF-mutaation esiintyminen on itsenäinen huono ennustetekijä.

Matalatiheyksinen lipoproteiiniin liittyvä proteiinireseptori 1 (LRP-1) on monitoiminen endosyyttinen reseptori, joka kuuluu LDL-reseptorien perheeseen. Hän osallistuu solunulkoisen matriisin hajoamisesta vastuussa olevien entsyymien, matriisiproteaasien, puhdistumiseen. Tämä matriisiproteolyysimodulaattorin rooli, joka liittyy solumigraatiosäätelijän toimintaan, antaa tälle proteiinille syövänvastaisen roolin. LRP-1:n kasvaimia estävä ominaisuus on osoitettu kilpirauhassyövissä in vitro. Näissä tutkimuksissa LRP-1:n ilmentymisen menetys tai LRP-1-aktiivisuuden väheneminen korreloi syöpäsolujen migraation ja invaasion lisääntymisen kanssa. Päinvastainen vaikutus havaittiin kuitenkin eturauhassyöpäsolulinjoissa.

LRP-1:n ilmentymisen tason kliinistä vaikutusta syöpäpotilaiden kokonaiseloonjäämiseen on arvioitu kahdessa tutkimuksessa: yksi hepatosellulaarisesta karsinoomasta ja toinen primitiivisistä keuhkojen adenokarsinoomista kärsivillä potilailla. Molemmissa tutkimuksissa LRP-1:n immunohistokemiallisen ja geeniekspression väheneminen korreloi kokonaiseloonjäämisen vähenemisen kanssa. CRC:ssä on tähän mennessä julkaistu vain yksi LRP-1:n immunohistokemiallinen ekspressiotutkimus. Tämä tutkimus osoittaa, että adenokarsinoomatoosit solut ekspressoivat LRP-1:tä, mutta lähes puolet tapauksista heikommin kuin normaalit paksusuolen solut. LRP-1:n ilmentymisen kliinistä ja prognostista vaikutusta paksusuolensyövässä ja sen yhteyttä tiettyyn molekyyli- tai morfologiseen profiiliin ei ole tähän mennessä tutkittu.

Tässä työssä tutkijat tutkivat LRP-1:n immunohistokemiallista ja geneettistä ilmentymistä hyvin karakterisoidussa CRC-sarjassa.

Tämän tutkimuksen päätavoitteena on tutkia geneettisillä ja immunohistokemiallisilla lähestymistavoilla LRP-1:n roolia paksusuolen adenokarsinoomien aggressiivuudessa.

Tämän tutkimuksen toissijaisena tavoitteena on etsiä yhteyksiä LRP-1-ekspressiotason ja paksusuolen adenokarsinoomien morfologisten tai molekyyliprofiilien välillä.

Tämä tutkimus on ensimmäinen, joka tutkii LRP-1:n ilmentymistä hyvin karakterisoiduissa paksusuolen syövissä, joilla on erilaisia ​​morfologisia ja molekyyliprofiileja. Tämä tutkimus auttaa lisäämään tietoa LRP-1:n prognostisesta roolista paksusuolen syövässä ja sen mahdollisesta yhteydestä kliinisiin, morfologisiin tai molekyyliparametreihin.

Tulee retrospektiivinen kohorttitutkimus, yksi keskus.

Tutkijat suunnittelevat ensin luettelon kaikista kelvollisista potilaista käyttämällä pyyntöä patologian osaston ohjelmistossa DIAMIC, jonka komponenttikoodi on "koolon", vauriokoodi "adenokarsinooma" ja ajanjakso "vuosien 2006 ja 2012 välillä". Lynchin oireyhtymää tai muuta familiaalista syöpäsyndroomaa sairastavat potilaat suljetaan pois tutkimuksesta. Tietoinen suostumus lähetetään kaikille valituille potilaille.

Kun potilasluettelo on valmis:

• Potilaiden potilastiedot tarkistetaan: sosiodemografiset ja kliiniset tiedot paksusuolen kasvaimen sijainti, synkronisten etäpesäkkeiden esiintyminen, hoidon tyyppi ja kesto, potilaan seuranta 1.6.2014 saakka (etäpesäkkeiden esiintyminen, taudin uusiutuminen, potilaan kuolema , ...).
• Näille kriteereille tehdään kaikkien patologisten diojen keskitetty katsaus: adenokarsinooman alatyyppi WHO 2010 -luokituksen mukaan, erilaistuminen, yhteys polyypeihin ja niiden tyyppeihin, pTNM-vaihe, invaasion eturintama ja silmujen muodostuminen, stroomatyyppi, kasvainnekroosin esiintyminen ja määrä).

• Immunohistokemiallinen analyysi formaliinilla kiinnitetylle ja parafiiniin upotetulle kudokselle suoritetaan:

  • LRP1-immunoekspression kvalitatiivinen ja semikvantitatiivinen arviointi anti-5A6- ja 8G1-vasta-aineilla
  • RER-fenotyyppitutkimus (MLH1, MSH2, MSH6 ja PMS2 immunohistokemia) ja BRAF V600E -immunohistokemia

• Molekyylianalyysit:

  • LRP-1-geenin ilmentymisen analyysi jäädytetyssä kudoksessa
  • valituissa tapauksissa: etsi mikrosatelliitin epävakautta, etsi BRAF V600E, KRAS (eksoni 2, 3 ja 4) ja NRAS (eksonit 2, 3 ja 4) mutaatiota formaliinilla kiinnitetystä ja parafiiniin upotetusta kudoksesta

Tilastollinen analyysi:

• Tietojen kuvaus: kvantitatiivisten muuttujien keskiarvo ja keskihajonta; luku ja prosenttiluku kategorisille muuttujille.
• Kasvaimien, joissa LRP-1:n ilmentyminen on korkea, ja kasvaimien, jotka eivät ilmennä tai ilmentävät vähän LRP-1:tä, vertailu yksimuuttujaanalyysillä (Studentin testi ja Wilcoxonin testi, Chi2 tai Fisherin tarkka) ja monimuuttuja-analyysillä (logistinen regressio).
• Hae potilaiden tuloksiin liittyviä tekijöitä, mukaan lukien LRP1:n ilmentyminen, yksimuuttujaanalyysillä (log-rank testi) ja monimuuttujalla (Cox-malli).