LRP1 und Darmkrebs

Darmkrebs (CRC) ist in Frankreich und weltweit ein großes Problem der öffentlichen Gesundheit. CRC ist in Frankreich die dritthäufigste Krebserkrankung in Bezug auf Inzidenz und Mortalität. Die überwiegende Mehrheit dieser Krebsarten sind Adenokarzinome, die sporadisch auftreten und sich aus Vorläuferläsionen entwickeln: dem Adenom. Alle Darmkrebserkrankungen im gleichen Krankheitsstadium haben nicht die gleiche Prognose. Verschiedene Parameter wurden als Faktoren identifiziert, die die Prognose beeinflussen und eine Anpassung der Behandlung ermöglichen. Die schlechten histoprognostischen Faktoren sind das Vorhandensein einer Tumorgefäß- und Nerveninvasion oder der Subtyp des muzinösen Adenokarzinoms. Auf molekularer Ebene verbessert das Vorhandensein einer Mikrosatelliteninstabilität (MSI) die Prognose, während das Vorhandensein einer BRAF-Mutation ein unabhängiger schlechter Prognosefaktor ist.

Der Low Density Lipoprotein Related Protein Receptor 1 (LRP-1) ist ein multifunktionaler endozytischer Rezeptor, der zur Familie der LDL-Rezeptoren gehört. Er ist an der Clearance von Enzymen beteiligt, die für den Abbau der extrazellulären Matrix verantwortlich sind: den Matrixproteasen. Diese Rolle als Modulator der Matrixproteolyse, verbunden mit der Funktion als Zellmigrationsregulator, verleiht diesem Protein eine Antikrebsfunktion. Die Antitumorwirkung von LRP-1 wurde in vitro bei Schilddrüsenkrebs nachgewiesen. In diesen Studien korrelierte ein Verlust der LRP-1-Expression oder eine Abnahme der LRP-1-Aktivität mit einer Zunahme der Migration und Invasion von Krebszellen. Bei Prostatakrebs-Zelllinien wurde jedoch der gegenteilige Effekt beobachtet.

Der klinische Einfluss des Niveaus der LRP-1-Expression auf das Gesamtüberleben von Krebspatienten wurde in zwei Studien untersucht: eine an Patienten mit hepatozellulärem Karzinom und eine an Patienten mit primitiven Lungenadenokarzinomen. In beiden Studien korrelierte die Abnahme der immunhistochemischen und Genexpression von LRP-1 mit der Abnahme des Gesamtüberlebens. Im CRC wurde bisher nur eine immunhistochemische Expressionsstudie von LRP-1 veröffentlicht. Diese Studie zeigt, dass adenokarzinomatöse Zellen LRP-1 exprimieren, allerdings in fast der Hälfte der Fälle schwächer als in normalen Dickdarmzellen. Die klinischen und prognostischen Auswirkungen der LRP-1-Expression bei Dickdarmkrebs und ihr Zusammenhang mit einem bestimmten molekularen oder morphologischen Profil wurden bisher nicht untersucht.

In dieser Arbeit werden die Forscher die immunhistochemische und genetische Expression von LRP-1 in einer gut charakterisierten Reihe von CRC untersuchen.

Das Hauptziel dieser Studie besteht darin, mithilfe genetischer und immunhistochemischer Ansätze die Rolle von LRP-1 bei der Aggressivität von Kolonadenokarzinomen zu untersuchen.

Das sekundäre Ziel dieser Studie ist die Suche nach Zusammenhängen zwischen dem LRP-1-Expressionsniveau und morphologischen oder molekularen Profilen von Kolonadenokarzinomen

Diese Studie wird die erste sein, die die Expression von LRP-1 in gut charakterisierten Dickdarmkrebsarten mit unterschiedlichen morphologischen und molekularen Profilen untersucht. Diese Studie wird dazu beitragen, das Wissen über die prognostische Rolle von LRP-1 bei Dickdarmkrebs und seinen möglichen Zusammenhang mit klinischen, morphologischen oder molekularen Parametern zu erweitern.

Es wird eine retrospektive Kohortenstudie mit einem einzigen Zentrum geben.

Die Ermittler erstellen zunächst die Liste aller in Frage kommenden Patienten mithilfe einer Anfrage in der Software DIAMIC der Pathologieabteilung mit Komponentencode „Kolon“, Schadenscode „Adenokarzinom“ und Zeitraum „zwischen 2006 und 2012“. Patienten, die an einem Lynch-Syndrom oder einem anderen familiären Krebssyndrom leiden, werden von der Studie ausgeschlossen. Die Einverständniserklärung wird an alle ausgewählten Patienten gesendet.

Sobald die Patientenliste vollständig ist:

• Die Krankenakten der Patienten werden überprüft auf: soziodemografische und klinische Daten, Lage des Dickdarmtumors, Vorhandensein von synchronen Metastasen, Art und Dauer der Behandlung, Nachbeobachtung des Patienten bis zum Datum 01.06.2014 (Auftreten von Metastasen, Wiederauftreten der Krankheit, Tod des Patienten). , ...).
• Es wird eine zentrale Überprüfung aller pathologischen Objektträger nach folgenden Kriterien durchgeführt: Adenokarzinom-Subtyp gemäß WHO-Klassifikation 2010, Differenzierung, Assoziation mit Polypen und ihren Typen, pTNM-Stadium, Invasionsfront und Knospung, Stromatyp, Vorhandensein und Ausmaß der Tumornekrose.

• Es wird eine immunhistochemische Analyse an formalinfixiertem und in Paraffin eingebettetem Gewebe durchgeführt:

  • qualitative und semiquantitative Bewertung der LRP1-Immunexpression mit Anti-5A6- und 8G1-Antikörpern
  • RER-Phänotypforschung (MLH1-, MSH2-, MSH6- und PMS2-Immunhistochemie) und BRAF V600E-Immunhistochemie

• Molekulare Analysen:

  • Analyse der LRP-1-Genexpression auf gefrorenem Gewebe
  • Für ausgewählte Fälle: Suche nach Mikrosatelliteninstabilität, Suche nach BRAF V600E-, KRAS- (Exons 2, 3 und 4) und NRAS- (Exons 2, 3 und 4) Mutationen auf formalinfixiertem und in Paraffin eingebettetem Gewebe

Statistische Analyse:

• Datenbeschreibung: Mittelwert und Standardabweichung für quantitative Variablen; Anzahl und Prozentsatz für kategoriale Variablen.
• Vergleich von Tumoren mit hoher LRP-1-Expression und Tumoren, die LRP-1 nicht oder nur wenig exprimieren, mittels univariater Analyse (Student-Test und Wilcoxon-Test, Chi2- oder Fisher-exakt) und multivariater Analyse (logistische Regression).
• Suchfaktoren im Zusammenhang mit Patientenergebnissen, einschließlich der Expression von LRP1, durch univariate Analyse (Log-Rank-Test) und multivariate Analyse (Cox-Modell).

Darmkrebs (CRC) ist in Frankreich und weltweit ein großes Problem der öffentlichen Gesundheit. CRC ist in Frankreich die dritthäufigste Krebserkrankung in Bezug auf Inzidenz und Mortalität. Die überwiegende Mehrheit dieser Krebsarten sind Adenokarzinome, die sporadisch auftreten und sich aus Vorläuferläsionen entwickeln: dem Adenom. Alle Darmkrebserkrankungen im gleichen Krankheitsstadium haben nicht die gleiche Prognose. Verschiedene Parameter wurden als Faktoren identifiziert, die die Prognose beeinflussen und eine Anpassung der Behandlung ermöglichen. Die schlechten histoprognostischen Faktoren sind das Vorhandensein einer Tumorgefäß- und Nerveninvasion oder der Subtyp des muzinösen Adenokarzinoms. Auf molekularer Ebene verbessert das Vorhandensein einer Mikrosatelliteninstabilität (MSI) die Prognose, während das Vorhandensein einer BRAF-Mutation ein unabhängiger schlechter Prognosefaktor ist.

Der Low Density Lipoprotein Related Protein Receptor 1 (LRP-1) ist ein multifunktionaler endozytischer Rezeptor, der zur Familie der LDL-Rezeptoren gehört. Er ist an der Clearance von Enzymen beteiligt, die für den Abbau der extrazellulären Matrix verantwortlich sind: den Matrixproteasen. Diese Rolle als Modulator der Matrixproteolyse, verbunden mit der Funktion als Zellmigrationsregulator, verleiht diesem Protein eine Antikrebsfunktion. Die Antitumorwirkung von LRP-1 wurde in vitro bei Schilddrüsenkrebs nachgewiesen. In diesen Studien korrelierte ein Verlust der LRP-1-Expression oder eine Abnahme der LRP-1-Aktivität mit einer Zunahme der Migration und Invasion von Krebszellen. Bei Prostatakrebs-Zelllinien wurde jedoch der gegenteilige Effekt beobachtet.

Der klinische Einfluss des Niveaus der LRP-1-Expression auf das Gesamtüberleben von Krebspatienten wurde in zwei Studien untersucht: eine an Patienten mit hepatozellulärem Karzinom und eine an Patienten mit primitiven Lungenadenokarzinomen. In beiden Studien korrelierte die Abnahme der immunhistochemischen und Genexpression von LRP-1 mit der Abnahme des Gesamtüberlebens. Im CRC wurde bisher nur eine immunhistochemische Expressionsstudie von LRP-1 veröffentlicht. Diese Studie zeigt, dass adenokarzinomatöse Zellen LRP-1 exprimieren, allerdings in fast der Hälfte der Fälle schwächer als in normalen Dickdarmzellen. Die klinischen und prognostischen Auswirkungen der LRP-1-Expression bei Dickdarmkrebs und ihr Zusammenhang mit einem bestimmten molekularen oder morphologischen Profil wurden bisher nicht untersucht.

In dieser Arbeit werden die Forscher die immunhistochemische und genetische Expression von LRP-1 in einer gut charakterisierten Reihe von CRC untersuchen.

Das Hauptziel dieser Studie besteht darin, mithilfe genetischer und immunhistochemischer Ansätze die Rolle von LRP-1 bei der Aggressivität von Kolonadenokarzinomen zu untersuchen.

Das sekundäre Ziel dieser Studie ist die Suche nach Zusammenhängen zwischen dem LRP-1-Expressionsniveau und morphologischen oder molekularen Profilen von Kolonadenokarzinomen

Diese Studie wird die erste sein, die die Expression von LRP-1 in gut charakterisierten Dickdarmkrebsarten mit unterschiedlichen morphologischen und molekularen Profilen untersucht. Diese Studie wird dazu beitragen, das Wissen über die prognostische Rolle von LRP-1 bei Dickdarmkrebs und seinen möglichen Zusammenhang mit klinischen, morphologischen oder molekularen Parametern zu erweitern.

Es wird eine retrospektive Kohortenstudie mit einem einzigen Zentrum geben.

Die Ermittler erstellen zunächst die Liste aller in Frage kommenden Patienten mithilfe einer Anfrage in der Software DIAMIC der Pathologieabteilung mit Komponentencode „Kolon“, Schadenscode „Adenokarzinom“ und Zeitraum „zwischen 2006 und 2012“. Patienten, die an einem Lynch-Syndrom oder einem anderen familiären Krebssyndrom leiden, werden von der Studie ausgeschlossen. Die Einverständniserklärung wird an alle ausgewählten Patienten gesendet.

Sobald die Patientenliste vollständig ist:

• Die Krankenakten der Patienten werden überprüft auf: soziodemografische und klinische Daten, Lage des Dickdarmtumors, Vorhandensein von synchronen Metastasen, Art und Dauer der Behandlung, Nachbeobachtung des Patienten bis zum Datum 01.06.2014 (Auftreten von Metastasen, Wiederauftreten der Krankheit, Tod des Patienten). , ...).
• Es wird eine zentrale Überprüfung aller pathologischen Objektträger nach folgenden Kriterien durchgeführt: Adenokarzinom-Subtyp gemäß WHO-Klassifikation 2010, Differenzierung, Assoziation mit Polypen und ihren Typen, pTNM-Stadium, Invasionsfront und Knospung, Stromatyp, Vorhandensein und Ausmaß der Tumornekrose.

• Es wird eine immunhistochemische Analyse an formalinfixiertem und in Paraffin eingebettetem Gewebe durchgeführt:

  • qualitative und semiquantitative Bewertung der LRP1-Immunexpression mit Anti-5A6- und 8G1-Antikörpern
  • RER-Phänotypforschung (MLH1-, MSH2-, MSH6- und PMS2-Immunhistochemie) und BRAF V600E-Immunhistochemie

• Molekulare Analysen:

  • Analyse der LRP-1-Genexpression auf gefrorenem Gewebe
  • Für ausgewählte Fälle: Suche nach Mikrosatelliteninstabilität, Suche nach BRAF V600E-, KRAS- (Exons 2, 3 und 4) und NRAS- (Exons 2, 3 und 4) Mutationen auf formalinfixiertem und in Paraffin eingebettetem Gewebe

Statistische Analyse:

• Datenbeschreibung: Mittelwert und Standardabweichung für quantitative Variablen; Anzahl und Prozentsatz für kategoriale Variablen.
• Vergleich von Tumoren mit hoher LRP-1-Expression und Tumoren, die LRP-1 nicht oder nur wenig exprimieren, mittels univariater Analyse (Student-Test und Wilcoxon-Test, Chi2- oder Fisher-exakt) und multivariater Analyse (logistische Regression).
• Suchfaktoren im Zusammenhang mit Patientenergebnissen, einschließlich der Expression von LRP1, durch univariate Analyse (Log-Rank-Test) und multivariate Analyse (Cox-Modell).