LRP1 et cancer du côlon

Le cancer colorectal (CCR) est un problème majeur de santé publique en France et dans le monde. Le CCR est le troisième cancer le plus fréquent en incidence et en mortalité en France. La grande majorité de ces cancers sont des adénocarcinomes qui surviennent sporadiquement et se développent à partir de lésions précurseurs : l'adénome. Tous les CCR avec le même stade de la maladie n'ont pas le même pronostic. Différents paramètres ont été identifiés comme facteurs influençant le pronostic et permettant d'ajuster le traitement. Les mauvais facteurs histopronostiques sont la présence d'envahissement des vaisseaux tumoraux et des nerfs ou le sous-type d'adénocarcinome mucineux. Au niveau moléculaire, la présence d'une instabilité microsatellite (MSI) améliore le pronostic, tandis que la présence d'une mutation BRAF est un facteur indépendant de mauvais pronostic.

Le récepteur protéique lié aux lipoprotéines de basse densité (LRP-1) est un récepteur endocytaire multifonctionnel qui appartient à la famille des récepteurs LDL. Il est impliqué dans la clairance d'enzymes responsables de la dégradation de la matrice extracellulaire : les protéases matricielles. Ce rôle de modulateur de la protéolyse matricielle associé à une fonction de régulateur de la migration cellulaire confère à cette protéine un rôle anticancéreux. La propriété antitumorale de LRP-1 a été démontrée dans les cancers de la thyroïde in vitro. Dans ces études, la perte d'expression de LRP-1 ou une diminution de l'activité de LRP-1 était corrélée à une augmentation de la migration et de l'invasion des cellules cancéreuses. Cependant, l'effet inverse a été observé dans les lignées cellulaires du cancer de la prostate.

L'impact clinique du niveau d'expression de LRP-1 sur la survie globale des patients cancéreux a été évalué dans deux études : l'une sur des patients atteints de carcinome hépatocellulaire et l'autre sur des patients atteints d'adénocarcinomes pulmonaires primitifs. Dans les deux études, la diminution de l'expression immunohistochimique et génique de LRP-1 était corrélée à la diminution de la survie globale. Dans le CRC, une seule étude d'expression immunohistochimique de LRP-1 a été publiée à ce jour. Cette étude montre que les cellules adénocarcinomateuses expriment LRP-1, mais dans près de la moitié des cas, plus faiblement que dans les cellules coliques normales. L'impact clinique et pronostique de l'expression de LRP-1 dans le cancer du côlon et son association avec un profil moléculaire ou morphologique particulier n'a pas été étudié à ce jour.

Dans ce travail, les chercheurs étudieront l'expression immunohistochimique et génique de LRP-1 dans une série bien caractérisée de CRC.

L'objectif principal de cette étude est d'étudier par des approches géniques et immunohistochimiques le rôle de LRP-1 dans l'agressivité des adénocarcinomes du côlon.

L'objectif secondaire de cette étude est de rechercher des associations entre le niveau d'expression de LRP-1 et les profils morphologiques ou moléculaires des adénocarcinomes coliques.

Cette étude sera la première à explorer l'expression de LRP-1 dans des cancers du côlon bien caractérisés de différents profils morphologiques et moléculaires. Cette étude permettra d'approfondir les connaissances sur le rôle pronostique de LRP-1 dans le cancer du côlon et son association possible avec des paramètres cliniques, morphologiques ou moléculaires.

Il y aura une étude de cohorte rétrospective, monocentrique.

Les enquêteurs vont d'abord concevoir la liste de tous les patients éligibles en utilisant une requête dans le logiciel DIAMIC du service de pathologie avec le code composant "côlon", le code dommage "adénocarcinome" et la période "entre 2006 et 2012". Les patients souffrant du syndrome de Lynch ou d'un autre syndrome de cancer familial seront exclus de l'étude. Un consentement éclairé sera envoyé à tous les patients sélectionnés.

Une fois la liste des patients complétée :

• Les dossiers médicaux des patients seront examinés pour : les données sociodémographiques et cliniques la localisation de la tumeur colique, la présence de métastases synchrones, le type et la durée du traitement, le suivi des patients jusqu'à la date du point 01/06/2014 (apparition de métastases, récidive de la maladie, décès du patient , ...).
• Une revue centrale de toutes les lames pathologiques sera réalisée pour ces critères : sous-type d'adénocarcinome selon la classification OMS 2010, différenciation, association avec les polypes et leurs types, stade pTNM, front d'invasion et bourgeonnement, type de stroma, présence et quantité de nécrose tumorale).

• Une analyse immunohistochimique sur des tissus fixés au formol et inclus en paraffine sera effectuée :

  • évaluation qualitative et semi-quantitative de l'immunoexpression de LRP1 avec les anticorps anti-5A6 et 8G1
  • Recherche phénotypique RER (immunohistochimie MLH1, MSH2, MSH6 et PMS2) et immunohistochimie BRAF V600E

• Analyses moléculaires :

  • analyse de l'expression du gène LRP-1 sur des tissus congelés
  • pour des cas sélectionnés : recherche d'instabilité microsatellite, recherche de mutation BRAF V600E, KRAS (exon 2, 3 et 4) et NRAS (exons 2, 3 et 4) sur tissus fixés au formol et inclus en paraffine

Analyses statistiques:

• Description des données : moyenne et écart-type pour les variables quantitatives ; nombre et pourcentage pour les variables catégorielles.
• Comparaison de tumeurs ayant une forte expression de LRP-1 et de tumeurs peu ou pas exprimant LRP-1 par analyse univariée (test de Student et test de Wilcoxon, Chi2 ou Fisher exact) et multivariée (régression logistique).
• Rechercher les facteurs associés aux résultats des patients, y compris l'expression de LRP1, par analyse univariée (test du log-rank) et multivariée (modèle de Cox).

Le cancer colorectal (CCR) est un problème majeur de santé publique en France et dans le monde. Le CCR est le troisième cancer le plus fréquent en incidence et en mortalité en France. La grande majorité de ces cancers sont des adénocarcinomes qui surviennent sporadiquement et se développent à partir de lésions précurseurs : l'adénome. Tous les CCR avec le même stade de la maladie n'ont pas le même pronostic. Différents paramètres ont été identifiés comme facteurs influençant le pronostic et permettant d'ajuster le traitement. Les mauvais facteurs histopronostiques sont la présence d'envahissement des vaisseaux tumoraux et des nerfs ou le sous-type d'adénocarcinome mucineux. Au niveau moléculaire, la présence d'une instabilité microsatellite (MSI) améliore le pronostic, tandis que la présence d'une mutation BRAF est un facteur indépendant de mauvais pronostic.

Le récepteur protéique lié aux lipoprotéines de basse densité (LRP-1) est un récepteur endocytaire multifonctionnel qui appartient à la famille des récepteurs LDL. Il est impliqué dans la clairance d'enzymes responsables de la dégradation de la matrice extracellulaire : les protéases matricielles. Ce rôle de modulateur de la protéolyse matricielle associé à une fonction de régulateur de la migration cellulaire confère à cette protéine un rôle anticancéreux. La propriété antitumorale de LRP-1 a été démontrée dans les cancers de la thyroïde in vitro. Dans ces études, la perte d'expression de LRP-1 ou une diminution de l'activité de LRP-1 était corrélée à une augmentation de la migration et de l'invasion des cellules cancéreuses. Cependant, l'effet inverse a été observé dans les lignées cellulaires du cancer de la prostate.

L'impact clinique du niveau d'expression de LRP-1 sur la survie globale des patients cancéreux a été évalué dans deux études : l'une sur des patients atteints de carcinome hépatocellulaire et l'autre sur des patients atteints d'adénocarcinomes pulmonaires primitifs. Dans les deux études, la diminution de l'expression immunohistochimique et génique de LRP-1 était corrélée à la diminution de la survie globale. Dans le CRC, une seule étude d'expression immunohistochimique de LRP-1 a été publiée à ce jour. Cette étude montre que les cellules adénocarcinomateuses expriment LRP-1, mais dans près de la moitié des cas, plus faiblement que dans les cellules coliques normales. L'impact clinique et pronostique de l'expression de LRP-1 dans le cancer du côlon et son association avec un profil moléculaire ou morphologique particulier n'a pas été étudié à ce jour.

Dans ce travail, les chercheurs étudieront l'expression immunohistochimique et génique de LRP-1 dans une série bien caractérisée de CRC.

L'objectif principal de cette étude est d'étudier par des approches géniques et immunohistochimiques le rôle de LRP-1 dans l'agressivité des adénocarcinomes du côlon.

L'objectif secondaire de cette étude est de rechercher des associations entre le niveau d'expression de LRP-1 et les profils morphologiques ou moléculaires des adénocarcinomes coliques.

Cette étude sera la première à explorer l'expression de LRP-1 dans des cancers du côlon bien caractérisés de différents profils morphologiques et moléculaires. Cette étude permettra d'approfondir les connaissances sur le rôle pronostique de LRP-1 dans le cancer du côlon et son association possible avec des paramètres cliniques, morphologiques ou moléculaires.

Il y aura une étude de cohorte rétrospective, monocentrique.

Les enquêteurs vont d'abord concevoir la liste de tous les patients éligibles en utilisant une requête dans le logiciel DIAMIC du service de pathologie avec le code composant "côlon", le code dommage "adénocarcinome" et la période "entre 2006 et 2012". Les patients souffrant du syndrome de Lynch ou d'un autre syndrome de cancer familial seront exclus de l'étude. Un consentement éclairé sera envoyé à tous les patients sélectionnés.

Une fois la liste des patients complétée :

• Les dossiers médicaux des patients seront examinés pour : les données sociodémographiques et cliniques la localisation de la tumeur colique, la présence de métastases synchrones, le type et la durée du traitement, le suivi des patients jusqu'à la date du point 01/06/2014 (apparition de métastases, récidive de la maladie, décès du patient , ...).
• Une revue centrale de toutes les lames pathologiques sera réalisée pour ces critères : sous-type d'adénocarcinome selon la classification OMS 2010, différenciation, association avec les polypes et leurs types, stade pTNM, front d'invasion et bourgeonnement, type de stroma, présence et quantité de nécrose tumorale).

• Une analyse immunohistochimique sur des tissus fixés au formol et inclus en paraffine sera effectuée :

  • évaluation qualitative et semi-quantitative de l'immunoexpression de LRP1 avec les anticorps anti-5A6 et 8G1
  • Recherche phénotypique RER (immunohistochimie MLH1, MSH2, MSH6 et PMS2) et immunohistochimie BRAF V600E

• Analyses moléculaires :

  • analyse de l'expression du gène LRP-1 sur des tissus congelés
  • pour des cas sélectionnés : recherche d'instabilité microsatellite, recherche de mutation BRAF V600E, KRAS (exon 2, 3 et 4) et NRAS (exons 2, 3 et 4) sur tissus fixés au formol et inclus en paraffine

Analyses statistiques:

• Description des données : moyenne et écart-type pour les variables quantitatives ; nombre et pourcentage pour les variables catégorielles.
• Comparaison de tumeurs ayant une forte expression de LRP-1 et de tumeurs peu ou pas exprimant LRP-1 par analyse univariée (test de Student et test de Wilcoxon, Chi2 ou Fisher exact) et multivariée (régression logistique).
• Rechercher les facteurs associés aux résultats des patients, y compris l'expression de LRP1, par analyse univariée (test du log-rank) et multivariée (modèle de Cox).