LRP1 e cancro al colon

Il cancro del colon-retto (CRC) è un grave problema di salute pubblica in Francia e nel mondo. Il CRC è il terzo tumore più comune per incidenza e mortalità in Francia. La stragrande maggioranza di questi tumori sono adenocarcinomi che insorgono sporadicamente e si sviluppano da lesioni precursori: l'adenoma. Tutti i CRC con lo stesso stadio della malattia non hanno la stessa prognosi. Vari parametri sono stati identificati come fattori che influenzano la prognosi e consentono l'adeguamento del trattamento. Gli scarsi fattori istoprognostici sono la presenza di vasi tumorali e invasione di nervi o il sottotipo di adenocarcinoma mucinoso. A livello molecolare, la presenza di instabilità dei microsatelliti (MSI) migliora la prognosi, mentre la presenza di una mutazione BRAF è un fattore prognostico sfavorevole indipendente.

Il recettore proteico 1 (LRP-1) correlato alle lipoproteine ​​a bassa densità è un recettore endocitico multifunzionale che appartiene alla famiglia dei recettori LDL. È coinvolto nella clearance degli enzimi responsabili della degradazione della matrice extracellulare: le proteasi della matrice. Questo ruolo di modulatore della proteolisi della matrice associato ad una funzione di regolatore della migrazione cellulare conferisce a questa proteina un ruolo antitumorale. La proprietà antitumorale di LRP-1 è stata dimostrata nei tumori della tiroide in vitro. In questi studi, la perdita dell'espressione di LRP-1 o una diminuzione dell'attività di LRP-1 è stata correlata con un aumento della migrazione e dell'invasione delle cellule tumorali. Tuttavia, l'effetto opposto è stato osservato nelle linee cellulari di cancro alla prostata.

L'impatto clinico del livello di espressione di LRP-1 sulla sopravvivenza globale dei pazienti oncologici è stato valutato in due studi: uno su pazienti affetti da carcinoma epatocellulare e uno su pazienti affetti da adenocarcinomi polmonari primitivi. In entrambi gli studi, la diminuzione dell'espressione immunoistochimica e genica di LRP-1 era correlata alla diminuzione della sopravvivenza globale. Nel CRC, fino ad oggi è stato pubblicato solo uno studio di espressione immunoistochimica di LRP-1. Questo studio mostra che le cellule adenocarcinomatose esprimono LRP-1, ma in quasi la metà dei casi, più debole rispetto alle normali cellule del colon. L'impatto clinico e prognostico dell'espressione di LRP-1 nel cancro del colon e la sua associazione con un particolare profilo molecolare o morfologico non è stato studiato fino ad oggi.

In questo lavoro, i ricercatori studieranno l'espressione immunoistochimica e genica di LRP-1 in una serie ben caratterizzata di CRC.

L'obiettivo principale di questo studio è studiare mediante approcci genici e immunoistochimici il ruolo di LRP-1 nell'aggressività degli adenocarcinomi del colon.

L'obiettivo secondario di questo studio è la ricerca di associazioni tra il livello di espressione di LRP-1 e i profili morfologici o molecolari degli adenocarcinomi del colon

Questo studio sarà il primo ad esplorare l'espressione di LRP-1 in tumori del colon ben caratterizzati con diversi profili morfologici e molecolari. Questo studio contribuirà ad aumentare la conoscenza del ruolo prognostico di LRP-1 nel cancro del colon e la sua possibile associazione con parametri clinici, morfologici o molecolari.

Ci sarà uno studio retrospettivo di coorte, centro unico.

Gli investigatori progetteranno prima l'elenco di tutti i pazienti idonei utilizzando una richiesta nel software DIAMIC del dipartimento di patologia con codice componente "colon", codice danno "adenocarcinoma" e periodo "tra il 2006 e il 2012". I pazienti affetti da sindrome di Lynch o altra sindrome da cancro familiare saranno esclusi dallo studio. Il consenso informato verrà inviato a tutti i pazienti selezionati.

Una volta completata la lista dei pazienti:

• Le cartelle cliniche dei pazienti saranno esaminate per: dati sociodemografici e clinici localizzazione del tumore del colon, presenza di metastasi sincrone, tipo e durata del trattamento, follow-up del paziente fino alla data del punto 01/06/2014 (occorrenza di metastasi, recidiva della malattia, decesso del paziente , ...).
• Verrà eseguita una revisione centrale di tutti i vetrini patologici per questi criteri: sottotipo di adenocarcinoma secondo la classificazione dell'OMS 2010, differenziazione, associazione con polipi e loro tipi, stadio pTNM, fronte di invasione e gemmazione, tipo di stroma, presenza e quantità di necrosi tumorale).

• Verranno eseguite analisi immunoistochimiche su tessuto fissato in formalina e incluso in paraffina:

  • valutazione qualitativa e semiquantitativa dell'immunoespressione di LRP1 con anticorpi anti-5A6 e 8G1
  • Ricerca sul fenotipo RER (immunoistochimica MLH1, MSH2, MSH6 e PMS2) e immunoistochimica BRAF V600E

• Analisi molecolari:

  • analisi dell'espressione del gene LRP-1 su tessuto congelato
  • per casi selezionati: ricerca di instabilità microsatellitare, ricerca di mutazione BRAF V600E, KRAS (esone 2, 3 e 4) e NRAS (esoni 2, 3 e 4) su tessuto fissato in formalina e incluso in paraffina

Analisi statistica:

• Descrizione dei dati: media e deviazione standard per le variabili quantitative; numero e percentuale per le variabili categoriali.
• Confronto di tumori con un'elevata espressione di LRP-1 e tumori poco o con scarsa espressione di LRP-1 mediante analisi univariata (test di Student e test di Wilcoxon, Chi2 o esatto di Fisher) e multivariata (regressione logistica).
• Cerca i fattori associati agli esiti dei pazienti, inclusa l'espressione di LRP1, mediante analisi univariata (log-rank test) e multivariata (modello di Cox).

Il cancro del colon-retto (CRC) è un grave problema di salute pubblica in Francia e nel mondo. Il CRC è il terzo tumore più comune per incidenza e mortalità in Francia. La stragrande maggioranza di questi tumori sono adenocarcinomi che insorgono sporadicamente e si sviluppano da lesioni precursori: l'adenoma. Tutti i CRC con lo stesso stadio della malattia non hanno la stessa prognosi. Vari parametri sono stati identificati come fattori che influenzano la prognosi e consentono l'adeguamento del trattamento. Gli scarsi fattori istoprognostici sono la presenza di vasi tumorali e invasione di nervi o il sottotipo di adenocarcinoma mucinoso. A livello molecolare, la presenza di instabilità dei microsatelliti (MSI) migliora la prognosi, mentre la presenza di una mutazione BRAF è un fattore prognostico sfavorevole indipendente.

Il recettore proteico 1 (LRP-1) correlato alle lipoproteine ​​a bassa densità è un recettore endocitico multifunzionale che appartiene alla famiglia dei recettori LDL. È coinvolto nella clearance degli enzimi responsabili della degradazione della matrice extracellulare: le proteasi della matrice. Questo ruolo di modulatore della proteolisi della matrice associato ad una funzione di regolatore della migrazione cellulare conferisce a questa proteina un ruolo antitumorale. La proprietà antitumorale di LRP-1 è stata dimostrata nei tumori della tiroide in vitro. In questi studi, la perdita dell'espressione di LRP-1 o una diminuzione dell'attività di LRP-1 è stata correlata con un aumento della migrazione e dell'invasione delle cellule tumorali. Tuttavia, l'effetto opposto è stato osservato nelle linee cellulari di cancro alla prostata.

L'impatto clinico del livello di espressione di LRP-1 sulla sopravvivenza globale dei pazienti oncologici è stato valutato in due studi: uno su pazienti affetti da carcinoma epatocellulare e uno su pazienti affetti da adenocarcinomi polmonari primitivi. In entrambi gli studi, la diminuzione dell'espressione immunoistochimica e genica di LRP-1 era correlata alla diminuzione della sopravvivenza globale. Nel CRC, fino ad oggi è stato pubblicato solo uno studio di espressione immunoistochimica di LRP-1. Questo studio mostra che le cellule adenocarcinomatose esprimono LRP-1, ma in quasi la metà dei casi, più debole rispetto alle normali cellule del colon. L'impatto clinico e prognostico dell'espressione di LRP-1 nel cancro del colon e la sua associazione con un particolare profilo molecolare o morfologico non è stato studiato fino ad oggi.

In questo lavoro, i ricercatori studieranno l'espressione immunoistochimica e genica di LRP-1 in una serie ben caratterizzata di CRC.

L'obiettivo principale di questo studio è studiare mediante approcci genici e immunoistochimici il ruolo di LRP-1 nell'aggressività degli adenocarcinomi del colon.

L'obiettivo secondario di questo studio è la ricerca di associazioni tra il livello di espressione di LRP-1 e i profili morfologici o molecolari degli adenocarcinomi del colon

Questo studio sarà il primo ad esplorare l'espressione di LRP-1 in tumori del colon ben caratterizzati con diversi profili morfologici e molecolari. Questo studio contribuirà ad aumentare la conoscenza del ruolo prognostico di LRP-1 nel cancro del colon e la sua possibile associazione con parametri clinici, morfologici o molecolari.

Ci sarà uno studio retrospettivo di coorte, centro unico.

Gli investigatori progetteranno prima l'elenco di tutti i pazienti idonei utilizzando una richiesta nel software DIAMIC del dipartimento di patologia con codice componente "colon", codice danno "adenocarcinoma" e periodo "tra il 2006 e il 2012". I pazienti affetti da sindrome di Lynch o altra sindrome da cancro familiare saranno esclusi dallo studio. Il consenso informato verrà inviato a tutti i pazienti selezionati.

Una volta completata la lista dei pazienti:

• Le cartelle cliniche dei pazienti saranno esaminate per: dati sociodemografici e clinici localizzazione del tumore del colon, presenza di metastasi sincrone, tipo e durata del trattamento, follow-up del paziente fino alla data del punto 01/06/2014 (occorrenza di metastasi, recidiva della malattia, decesso del paziente , ...).
• Verrà eseguita una revisione centrale di tutti i vetrini patologici per questi criteri: sottotipo di adenocarcinoma secondo la classificazione dell'OMS 2010, differenziazione, associazione con polipi e loro tipi, stadio pTNM, fronte di invasione e gemmazione, tipo di stroma, presenza e quantità di necrosi tumorale).

• Verranno eseguite analisi immunoistochimiche su tessuto fissato in formalina e incluso in paraffina:

  • valutazione qualitativa e semiquantitativa dell'immunoespressione di LRP1 con anticorpi anti-5A6 e 8G1
  • Ricerca sul fenotipo RER (immunoistochimica MLH1, MSH2, MSH6 e PMS2) e immunoistochimica BRAF V600E

• Analisi molecolari:

  • analisi dell'espressione del gene LRP-1 su tessuto congelato
  • per casi selezionati: ricerca di instabilità microsatellitare, ricerca di mutazione BRAF V600E, KRAS (esone 2, 3 e 4) e NRAS (esoni 2, 3 e 4) su tessuto fissato in formalina e incluso in paraffina

Analisi statistica:

• Descrizione dei dati: media e deviazione standard per le variabili quantitative; numero e percentuale per le variabili categoriali.
• Confronto di tumori con un'elevata espressione di LRP-1 e tumori poco o con scarsa espressione di LRP-1 mediante analisi univariata (test di Student e test di Wilcoxon, Chi2 o esatto di Fisher) e multivariata (regressione logistica).
• Cerca i fattori associati agli esiti dei pazienti, inclusa l'espressione di LRP1, mediante analisi univariata (log-rank test) e multivariata (modello di Cox).