LRP1 en darmkanker

Colorectale kanker (CRC) is een groot probleem voor de volksgezondheid in Frankrijk en wereldwijd. CRC is de derde meest voorkomende kanker in incidentie en mortaliteit in Frankrijk. De overgrote meerderheid van deze kankers zijn adenocarcinomen die sporadisch ontstaan ​​en zich ontwikkelen uit voorloperlaesies: adenoom. Alle CRC met hetzelfde ziektestadium hebben niet dezelfde prognose. Verschillende parameters zijn geïdentificeerd als factoren die van invloed zijn op de prognose en die aanpassing van de behandeling mogelijk maken. De slechte histoprognostische factoren zijn de aanwezigheid van tumorvaten en zenuwinvasie of het mucineuze adenocarcinoom-subtype. Op moleculair niveau verbetert de aanwezigheid van microsatellietinstabiliteit (MSI) de prognose, terwijl de aanwezigheid van een BRAF-mutatie een onafhankelijke slechte prognostische factor is.

Low density lipoprotein-gerelateerde Protein Receptor 1 (LRP-1) is een multifunctionele endocytische receptor die behoort tot de familie van LDL-receptoren. Hij is betrokken bij de klaring van enzymen die verantwoordelijk zijn voor de afbraak van de extracellulaire matrix: de matrixproteasen. Deze rol van matrixproteolysemodulator geassocieerd met een functie van celmigratieregulator geeft dit eiwit een kankerbestrijdende rol. De antitumoreigenschap van LRP-1 is in vitro aangetoond bij schildklierkanker. In deze onderzoeken was verlies van LRP-1-expressie of een afname van de LRP-1-activiteit gecorreleerd met een toename van migratie en invasie van kankercellen. Het tegenovergestelde effect werd echter waargenomen in prostaatkankercellijnen.

De klinische impact van het niveau van LRP-1-expressie op de algehele overleving van kankerpatiënten is beoordeeld in twee studies: één bij patiënten die lijden aan hepatocellulair carcinoom en één bij patiënten die lijden aan primitieve longadenocarcinomen. In beide onderzoeken correleerde de afname van immunohistochemische en genexpressie van LRP-1 met de algehele afname van de overleving. In CRC is tot nu toe slechts één immunohistochemische expressiestudie van LRP-1 gepubliceerd. Deze studie toont aan dat adenocarcinomateuze cellen LRP-1 tot expressie brengen, maar in bijna de helft van de gevallen zwakker dan in normale coloncellen. De klinische en prognostische impact van LRP-1-expressie bij darmkanker en de associatie ervan met een bepaald moleculair of morfologisch profiel is tot op heden niet bestudeerd.

In dit werk zullen de onderzoekers de immunohistochemische en genexpressie van LRP-1 in een goed gekarakteriseerde reeks CRC bestuderen.

Het hoofddoel van deze studie is om door middel van genetische en immunohistochemische benaderingen de rol van LRP-1 in de agressiviteit van colonadenocarcinomen te bestuderen.

Het secundaire doel van deze studie is om te zoeken naar associaties tussen LRP-1-expressieniveau en morfologische of moleculaire profielen van colonadenocarcinomen.

Deze studie zal de eerste zijn die de expressie van LRP-1 onderzoekt in goed gekarakteriseerde colonkankers met verschillende morfologische en moleculaire profielen. Deze studie zal helpen om de kennis van de prognostische rol van LRP-1 bij darmkanker en de mogelijke associatie met klinische, morfologische of moleculaire parameters te vergroten.

Er komt een retrospectieve cohortstudie, één centrum.

De onderzoekers zullen eerst de lijst van alle in aanmerking komende patiënten opmaken door gebruik te maken van een verzoek in de software DIAMIC van de afdeling pathologie met componentcode "colon", schadecode "adenocarcinoom" en periode "tussen 2006 en 2012". Patiënten die lijden aan het Lynch-syndroom of een ander familiaal kankersyndroom zullen van de studie worden uitgesloten. Geïnformeerde toestemming zal naar alle geselecteerde patiënten worden gestuurd.

Zodra de patiëntenlijst is voltooid:

• De medische dossiers van de patiënten zullen worden beoordeeld op: sociodemografische en klinische gegevens locatie van de colontumor, aanwezigheid van synchrone metastasen, behandelingstype en -duur, follow-up van de patiënt tot de datum van 01/06/2014 punt (optreden van metastasen, terugkeer van de ziekte, overlijden van de patiënt , ...).
• Een centrale beoordeling van alle pathologische objectglaasjes zal worden uitgevoerd voor deze criteria: adenocarcinoom-subtype volgens de WHO 2010-classificatie, differentiatie, associatie met poliepen en hun typen, pTNM-stadium, invasiefront en knopvorming, stromatype, aanwezigheid en hoeveelheid tumornecrose).

• Immunohistochemische analyse van met formaline gefixeerd en in paraffine ingebed weefsel zal worden uitgevoerd:

  • kwalitatieve en semi-kwantitatieve evaluatie van LRP1-immuno-expressie met anti-5A6- en 8G1-antilichamen
  • RER fenotype onderzoek (MLH1, MSH2, MSH6 en PMS2 immunohistochemie) en BRAF V600E immunohistochemie

• Moleculaire analyses:

  • analyse van LRP-1-genexpressie op bevroren weefsel
  • voor geselecteerde gevallen: zoeken naar microsatellietinstabiliteit, zoeken naar BRAF V600E-, KRAS- (exon 2, 3 en 4) en NRAS-mutatie (exons 2, 3 en 4) op formalinegefixeerd en in paraffine ingebed weefsel

Statistische analyse:

• Gegevensbeschrijving: gemiddelde en standaarddeviatie voor kwantitatieve variabelen; aantal en percentage voor categorische variabelen.
• Vergelijking van tumoren met een hoge expressie van LRP-1 en tumoren die LRP-1 niet of weinig tot expressie brengen door univariate analyse (Student's test en de Wilcoxon-test, Chi2 of Fisher's exact) en multivariate (logistische regressie).
• Zoek naar factoren die verband houden met patiëntuitkomsten, inclusief de expressie van LRP1, door univariate analyse (log-rank-test) en multivariate (Cox-model).

Colorectale kanker (CRC) is een groot probleem voor de volksgezondheid in Frankrijk en wereldwijd. CRC is de derde meest voorkomende kanker in incidentie en mortaliteit in Frankrijk. De overgrote meerderheid van deze kankers zijn adenocarcinomen die sporadisch ontstaan ​​en zich ontwikkelen uit voorloperlaesies: adenoom. Alle CRC met hetzelfde ziektestadium hebben niet dezelfde prognose. Verschillende parameters zijn geïdentificeerd als factoren die van invloed zijn op de prognose en die aanpassing van de behandeling mogelijk maken. De slechte histoprognostische factoren zijn de aanwezigheid van tumorvaten en zenuwinvasie of het mucineuze adenocarcinoom-subtype. Op moleculair niveau verbetert de aanwezigheid van microsatellietinstabiliteit (MSI) de prognose, terwijl de aanwezigheid van een BRAF-mutatie een onafhankelijke slechte prognostische factor is.

Low density lipoprotein-gerelateerde Protein Receptor 1 (LRP-1) is een multifunctionele endocytische receptor die behoort tot de familie van LDL-receptoren. Hij is betrokken bij de klaring van enzymen die verantwoordelijk zijn voor de afbraak van de extracellulaire matrix: de matrixproteasen. Deze rol van matrixproteolysemodulator geassocieerd met een functie van celmigratieregulator geeft dit eiwit een kankerbestrijdende rol. De antitumoreigenschap van LRP-1 is in vitro aangetoond bij schildklierkanker. In deze onderzoeken was verlies van LRP-1-expressie of een afname van de LRP-1-activiteit gecorreleerd met een toename van migratie en invasie van kankercellen. Het tegenovergestelde effect werd echter waargenomen in prostaatkankercellijnen.

De klinische impact van het niveau van LRP-1-expressie op de algehele overleving van kankerpatiënten is beoordeeld in twee studies: één bij patiënten die lijden aan hepatocellulair carcinoom en één bij patiënten die lijden aan primitieve longadenocarcinomen. In beide onderzoeken correleerde de afname van immunohistochemische en genexpressie van LRP-1 met de algehele afname van de overleving. In CRC is tot nu toe slechts één immunohistochemische expressiestudie van LRP-1 gepubliceerd. Deze studie toont aan dat adenocarcinomateuze cellen LRP-1 tot expressie brengen, maar in bijna de helft van de gevallen zwakker dan in normale coloncellen. De klinische en prognostische impact van LRP-1-expressie bij darmkanker en de associatie ervan met een bepaald moleculair of morfologisch profiel is tot op heden niet bestudeerd.

In dit werk zullen de onderzoekers de immunohistochemische en genexpressie van LRP-1 in een goed gekarakteriseerde reeks CRC bestuderen.

Het hoofddoel van deze studie is om door middel van genetische en immunohistochemische benaderingen de rol van LRP-1 in de agressiviteit van colonadenocarcinomen te bestuderen.

Het secundaire doel van deze studie is om te zoeken naar associaties tussen LRP-1-expressieniveau en morfologische of moleculaire profielen van colonadenocarcinomen.

Deze studie zal de eerste zijn die de expressie van LRP-1 onderzoekt in goed gekarakteriseerde colonkankers met verschillende morfologische en moleculaire profielen. Deze studie zal helpen om de kennis van de prognostische rol van LRP-1 bij darmkanker en de mogelijke associatie met klinische, morfologische of moleculaire parameters te vergroten.

Er komt een retrospectieve cohortstudie, één centrum.

De onderzoekers zullen eerst de lijst van alle in aanmerking komende patiënten opmaken door gebruik te maken van een verzoek in de software DIAMIC van de afdeling pathologie met componentcode "colon", schadecode "adenocarcinoom" en periode "tussen 2006 en 2012". Patiënten die lijden aan het Lynch-syndroom of een ander familiaal kankersyndroom zullen van de studie worden uitgesloten. Geïnformeerde toestemming zal naar alle geselecteerde patiënten worden gestuurd.

Zodra de patiëntenlijst is voltooid:

• De medische dossiers van de patiënten zullen worden beoordeeld op: sociodemografische en klinische gegevens locatie van de colontumor, aanwezigheid van synchrone metastasen, behandelingstype en -duur, follow-up van de patiënt tot de datum van 01/06/2014 punt (optreden van metastasen, terugkeer van de ziekte, overlijden van de patiënt , ...).
• Een centrale beoordeling van alle pathologische objectglaasjes zal worden uitgevoerd voor deze criteria: adenocarcinoom-subtype volgens de WHO 2010-classificatie, differentiatie, associatie met poliepen en hun typen, pTNM-stadium, invasiefront en knopvorming, stromatype, aanwezigheid en hoeveelheid tumornecrose).

• Immunohistochemische analyse van met formaline gefixeerd en in paraffine ingebed weefsel zal worden uitgevoerd:

  • kwalitatieve en semi-kwantitatieve evaluatie van LRP1-immuno-expressie met anti-5A6- en 8G1-antilichamen
  • RER fenotype onderzoek (MLH1, MSH2, MSH6 en PMS2 immunohistochemie) en BRAF V600E immunohistochemie

• Moleculaire analyses:

  • analyse van LRP-1-genexpressie op bevroren weefsel
  • voor geselecteerde gevallen: zoeken naar microsatellietinstabiliteit, zoeken naar BRAF V600E-, KRAS- (exon 2, 3 en 4) en NRAS-mutatie (exons 2, 3 en 4) op formalinegefixeerd en in paraffine ingebed weefsel

Statistische analyse:

• Gegevensbeschrijving: gemiddelde en standaarddeviatie voor kwantitatieve variabelen; aantal en percentage voor categorische variabelen.
• Vergelijking van tumoren met een hoge expressie van LRP-1 en tumoren die LRP-1 niet of weinig tot expressie brengen door univariate analyse (Student's test en de Wilcoxon-test, Chi2 of Fisher's exact) en multivariate (logistische regressie).
• Zoek naar factoren die verband houden met patiëntuitkomsten, inclusief de expressie van LRP1, door univariate analyse (log-rank-test) en multivariate (Cox-model).