LRP1 e câncer de cólon

O câncer colorretal (CCR) é um importante problema de saúde pública na França e no mundo. O CCR é o terceiro câncer mais comum em incidência e mortalidade na França. A grande maioria desses cânceres são adenocarcinomas que surgem esporadicamente e se desenvolvem a partir de lesões precursoras: o adenoma. Nem todo CCR com o mesmo estágio da doença tem o mesmo prognóstico. Vários parâmetros têm sido identificados como fatores que influenciam o prognóstico e permitem o ajuste do tratamento. Os fatores histoprognósticos ruins são a presença de invasão de vasos e nervos tumorais ou o subtipo adenocarcinoma mucinoso. No nível molecular, a presença de instabilidade microssatélite (MSI) melhora o prognóstico, enquanto a presença de uma mutação BRAF é um fator independente de mau prognóstico.

O receptor de proteína 1 relacionado à lipoproteína de baixa densidade (LRP-1) é um receptor endocítico multifuncional que pertence à família dos receptores de LDL. Ele está envolvido na depuração de enzimas responsáveis ​​pela degradação da matriz extracelular: as proteases da matriz. Este papel de modulador da proteólise de matriz associado a uma função de regulador da migração celular confere a esta proteína um papel anticancerígeno. A propriedade antitumoral da LRP-1 foi demonstrada em cânceres de tireoide in vitro. Nesses estudos, a perda de expressão de LRP-1 ou uma diminuição na atividade de LRP-1 foi correlacionada com um aumento da migração e invasão de células cancerígenas. No entanto, o efeito oposto foi observado em linhas celulares de câncer de próstata.

O impacto clínico do nível de expressão de LRP-1 na sobrevida global de pacientes com câncer foi avaliado em dois estudos: um em pacientes que sofrem de carcinoma hepatocelular e outro em pacientes que sofrem de adenocarcinomas pulmonares primitivos. Em ambos os estudos, a diminuição da expressão imuno-histoquímica e gênica de LRP-1 correlacionou-se com a diminuição da sobrevida global. No CRC, apenas um estudo de expressão imuno-histoquímica de LRP-1 foi publicado até o momento. Este estudo mostra que as células adenocarcinomatosas expressam LRP-1, mas em quase metade dos casos, de forma mais fraca do que nas células colônicas normais. O impacto clínico e prognóstico da expressão de LRP-1 no câncer de cólon e sua associação com um determinado perfil molecular ou morfológico não foi estudado até o momento.

Neste trabalho, os pesquisadores estudarão a expressão imuno-histoquímica e gênica de LRP-1 em uma série bem caracterizada de CRC.

O principal objetivo deste estudo é estudar por abordagens gênica e imuno-histoquímica o papel da LRP-1 na agressividade dos adenocarcinomas de cólon.

O objetivo secundário deste estudo é procurar associações entre o nível de expressão de LRP-1 e perfis morfológicos ou moleculares de adenocarcinomas colônicos

Este estudo será o primeiro a explorar a expressão de LRP-1 em cânceres de cólon bem caracterizados de diferentes perfis morfológicos e moleculares. Este estudo ajudará a aumentar o conhecimento do papel prognóstico da LRP-1 no câncer de cólon e sua possível associação com parâmetros clínicos, morfológicos ou moleculares.

Será um estudo de coorte retrospectivo, único centro.

Os investigadores irão primeiro elaborar a lista de todos os pacientes elegíveis usando uma solicitação no software DIAMIC do departamento de patologia com código de componente "cólon", código de dano "adenocarcinoma" e período "entre 2006 e 2012". Os pacientes que sofrem de síndrome de Lynch ou outra síndrome de câncer familiar serão excluídos do estudo. O consentimento informado será enviado a todos os pacientes selecionados.

Assim que a lista de pacientes estiver completa:

• Os prontuários dos pacientes serão revisados ​​quanto a: dados sociodemográficos e clínicos localização do tumor colônico, presença de metástases sincrônicas, tipo e duração do tratamento, acompanhamento do paciente até a data de 06/01/2014 (ocorrência de metástases, recorrência da doença, óbito do paciente , ...).
• Uma revisão central de todas as lâminas patológicas será realizada para estes critérios: subtipo de adenocarcinoma de acordo com a classificação da OMS 2010, diferenciação, associação com pólipos e seus tipos, estágio pTNM, frente de invasão e brotamento, tipo de estroma, presença e quantidade de necrose tumoral).

• A análise imuno-histoquímica em tecido fixado em formalina e embebido em parafina será realizada:

  • avaliação qualitativa e semiquantitativa da imunoexpressão de LRP1 com anticorpos anti-5A6 e 8G1
  • Pesquisa do fenótipo RER (MLH1, MSH2, MSH6 e PMS2 imuno-histoquímica) e BRAF V600E imuno-histoquímica

• Análises moleculares:

  • análise da expressão do gene LRP-1 em tecido congelado
  • para casos selecionados: busca por instabilidade de microssatélite, busca por mutação BRAF V600E, KRAS (exon 2, 3 e 4) e NRAS (exons 2, 3 e 4) em tecido fixado em formalina e embebido em parafina

Análise estatística:

• Descrição dos dados: média e desvio padrão para variáveis ​​quantitativas; número e porcentagem para variáveis ​​categóricas.
• Comparação de tumores com alta expressão de LRP-1 e tumores com pouca ou nenhuma expressão de LRP-1 por análise univariada (teste de Student e teste de Wilcoxon, Chi2 ou exato de Fisher) e multivariada (regressão logística).
• Pesquisar fatores associados aos desfechos do paciente, incluindo a expressão de LRP1, por meio de análise univariada (teste de log-rank) e multivariada (modelo de Cox).

O câncer colorretal (CCR) é um importante problema de saúde pública na França e no mundo. O CCR é o terceiro câncer mais comum em incidência e mortalidade na França. A grande maioria desses cânceres são adenocarcinomas que surgem esporadicamente e se desenvolvem a partir de lesões precursoras: o adenoma. Nem todo CCR com o mesmo estágio da doença tem o mesmo prognóstico. Vários parâmetros têm sido identificados como fatores que influenciam o prognóstico e permitem o ajuste do tratamento. Os fatores histoprognósticos ruins são a presença de invasão de vasos e nervos tumorais ou o subtipo adenocarcinoma mucinoso. No nível molecular, a presença de instabilidade microssatélite (MSI) melhora o prognóstico, enquanto a presença de uma mutação BRAF é um fator independente de mau prognóstico.

O receptor de proteína 1 relacionado à lipoproteína de baixa densidade (LRP-1) é um receptor endocítico multifuncional que pertence à família dos receptores de LDL. Ele está envolvido na depuração de enzimas responsáveis ​​pela degradação da matriz extracelular: as proteases da matriz. Este papel de modulador da proteólise de matriz associado a uma função de regulador da migração celular confere a esta proteína um papel anticancerígeno. A propriedade antitumoral da LRP-1 foi demonstrada em cânceres de tireoide in vitro. Nesses estudos, a perda de expressão de LRP-1 ou uma diminuição na atividade de LRP-1 foi correlacionada com um aumento da migração e invasão de células cancerígenas. No entanto, o efeito oposto foi observado em linhas celulares de câncer de próstata.

O impacto clínico do nível de expressão de LRP-1 na sobrevida global de pacientes com câncer foi avaliado em dois estudos: um em pacientes que sofrem de carcinoma hepatocelular e outro em pacientes que sofrem de adenocarcinomas pulmonares primitivos. Em ambos os estudos, a diminuição da expressão imuno-histoquímica e gênica de LRP-1 correlacionou-se com a diminuição da sobrevida global. No CRC, apenas um estudo de expressão imuno-histoquímica de LRP-1 foi publicado até o momento. Este estudo mostra que as células adenocarcinomatosas expressam LRP-1, mas em quase metade dos casos, de forma mais fraca do que nas células colônicas normais. O impacto clínico e prognóstico da expressão de LRP-1 no câncer de cólon e sua associação com um determinado perfil molecular ou morfológico não foi estudado até o momento.

Neste trabalho, os pesquisadores estudarão a expressão imuno-histoquímica e gênica de LRP-1 em uma série bem caracterizada de CRC.

O principal objetivo deste estudo é estudar por abordagens gênica e imuno-histoquímica o papel da LRP-1 na agressividade dos adenocarcinomas de cólon.

O objetivo secundário deste estudo é procurar associações entre o nível de expressão de LRP-1 e perfis morfológicos ou moleculares de adenocarcinomas colônicos

Este estudo será o primeiro a explorar a expressão de LRP-1 em cânceres de cólon bem caracterizados de diferentes perfis morfológicos e moleculares. Este estudo ajudará a aumentar o conhecimento do papel prognóstico da LRP-1 no câncer de cólon e sua possível associação com parâmetros clínicos, morfológicos ou moleculares.

Será um estudo de coorte retrospectivo, único centro.

Os investigadores irão primeiro elaborar a lista de todos os pacientes elegíveis usando uma solicitação no software DIAMIC do departamento de patologia com código de componente "cólon", código de dano "adenocarcinoma" e período "entre 2006 e 2012". Os pacientes que sofrem de síndrome de Lynch ou outra síndrome de câncer familiar serão excluídos do estudo. O consentimento informado será enviado a todos os pacientes selecionados.

Assim que a lista de pacientes estiver completa:

• Os prontuários dos pacientes serão revisados ​​quanto a: dados sociodemográficos e clínicos localização do tumor colônico, presença de metástases sincrônicas, tipo e duração do tratamento, acompanhamento do paciente até a data de 06/01/2014 (ocorrência de metástases, recorrência da doença, óbito do paciente , ...).
• Uma revisão central de todas as lâminas patológicas será realizada para estes critérios: subtipo de adenocarcinoma de acordo com a classificação da OMS 2010, diferenciação, associação com pólipos e seus tipos, estágio pTNM, frente de invasão e brotamento, tipo de estroma, presença e quantidade de necrose tumoral).

• A análise imuno-histoquímica em tecido fixado em formalina e embebido em parafina será realizada:

  • avaliação qualitativa e semiquantitativa da imunoexpressão de LRP1 com anticorpos anti-5A6 e 8G1
  • Pesquisa do fenótipo RER (MLH1, MSH2, MSH6 e PMS2 imuno-histoquímica) e BRAF V600E imuno-histoquímica

• Análises moleculares:

  • análise da expressão do gene LRP-1 em tecido congelado
  • para casos selecionados: busca por instabilidade de microssatélite, busca por mutação BRAF V600E, KRAS (exon 2, 3 e 4) e NRAS (exons 2, 3 e 4) em tecido fixado em formalina e embebido em parafina

Análise estatística:

• Descrição dos dados: média e desvio padrão para variáveis ​​quantitativas; número e porcentagem para variáveis ​​categóricas.
• Comparação de tumores com alta expressão de LRP-1 e tumores com pouca ou nenhuma expressão de LRP-1 por análise univariada (teste de Student e teste de Wilcoxon, Chi2 ou exato de Fisher) e multivariada (regressão logística).
• Pesquisar fatores associados aos desfechos do paciente, incluindo a expressão de LRP1, por meio de análise univariada (teste de log-rank) e multivariada (modelo de Cox).