Genotypizace aloantigenů lidských krevních destiček: Neinvazivní prenatální diagnostika

Neonatální trombocytopenie isoimunizace mateřsko-fetální souvisí s imunizací matky proti fetálním destičkovým antigenům s otcovským původem, které nejsou přítomny u matky. Je považována za ekvivalent hemolytické nemoci novorozence. Incidence tohoto onemocnění je asi 1 z 800-1000 porodů. Nejtěžší formy spojené s petechiemi, purpurou nebo kefalhematomem při narození s velkým rizikem mozkových krvácení (20 % až 25 % případů) mohou způsobit smrt dítěte (15 %) nebo závažné neurologické potíže (15-30 %) Biologické Diagnóza vyžaduje detekci protilátek proti krevním destičkám s mateřským stanovením fenotypů krevních destiček a genotypů obou rodičů. Když je diagnostikována, je nutné genetické poradenství páru pro budoucí těhotenství, protože riziko recidivy je důležité a závažnost se zvyšuje s počtem těhotenství. Riziko závisí na povaze otcovských antigenů, homozygotních nebo heterozygotních. V případě heterozygotnosti je prenatální diagnostika založena na genotypizaci fetálních destiček invazivním postupem (amniocentéza nebo odběr choriových klků) spojeným s rizikem ztráty plodu. Aloprotilátky odpovědné za poškození plodu jsou namířeny proti aloantigenům krevních destiček: jedná se o HPA systém (lidský aloantigen krevních destiček). Bylo popsáno 24 aloantigenů a 12 z nich má bialelický polymorfismus (a: nejčastější alela ab vzácná alela) rozdělený do 6 skupin (HPA-1, 2, 3, 4, 5 a 15). Korelace genotyp-fenotyp byly provedeny pro 22 z 24 aloantigenů a ukazují, že antigenní polymorfismus je výsledkem přítomnosti SNP (jednonukleotidový polymorfismus-).

V roce 1997 Lo et al prokázali přítomnost 3-6 % fetální DNA v mateřské krvi. Tento objev vedl k rozvoji metod neinvazivní prenatální diagnostiky: 1/ stanovení Rhesus plodu 2/ pohlaví plodu pomocí kvantitativní PCR v reálném čase.

Cílem této práce je vyvinout specifické molekulární nástroje pro genotypizaci fetálních destiček z mateřské krve. Zajímají nás zejména antigeny HPA-1, HPA-5, HPA-3 a HPA-4. Citlivost a specificitu tohoto testu hodnotíme porovnáním těchto výsledků s výsledky získanými z invazivního odběru plodové vody.

Jedná se o prospektivní studii k posouzení technické a diagnostické výkonnosti nové molekulární metody neinvazivní prenatální diagnostiky genotypizace krevních destiček.