Génotypage des alloantigènes plaquettaires humains : diagnostic prénatal non invasif

L'iso-immunisation materno-fœtale de la thrombocytopénie néonatale est liée à l'immunisation maternelle contre les antigènes plaquettaires fœtaux d'origine paternelle non présents chez la mère. Elle est considérée comme l'équivalent de la maladie hémolytique du nouveau-né. L'incidence de cette maladie est d'environ 1 sur 800 à 1000 naissances. Les formes les plus sévères associées à des pétéchies, purpura ou céphalhématome à la naissance avec un risque majeur d'hémorragies cérébrales (20% à 25% des cas) peuvent entraîner le décès de l'enfant (15%) ou des troubles neurologiques sévères (15-30%) Biologique le diagnostic nécessite la détection des anticorps antiplaquettaires avec détermination maternelle des phénotypes plaquettaires et des génotypes des deux parents. Lorsqu'elle est diagnostiquée, un conseil génétique au couple pour une future grossesse est nécessaire car le risque de récidive est important et sa gravité augmente avec le nombre de grossesses. Le risque dépend de la nature des antigènes paternels, homozygotes ou hétérozygotes. En cas d'hétérozygotie, le diagnostic prénatal repose sur le génotypage plaquettaire fœtal par un geste invasif (amniocentèse ou prélèvement de villosités choriales) associé à un risque de perte fœtale. Les alloanticorps responsables des lésions fœtales sont dirigés contre les alloantigènes plaquettaires : c'est le système HPA (human platelet alloantigen). 24 alloantigènes ont été décrits et 12 d'entre eux présentent un polymorphisme biallélique (a : l'allèle le plus fréquent et b l'allèle rare) répartis en 6 groupes (HPA-1, 2, 3, 4, 5 et 15). Les corrélations génotype-phénotype ont été réalisées pour 22 des 24 alloantigènes et montrent que le polymorphisme antigénique résulte de la présence d'un SNP (single nucleotide polymorphism-).

En 1997, Lo et al ont montré la présence de 3 à 6 % d'ADN fœtal dans le sang maternel. Cette découverte a conduit au développement de méthodes de diagnostic prénatal non invasif : 1/ la détermination du Rhésus fœtal 2/ le sexe fœtal par PCR quantitative en temps réel.

L'objectif de ce travail est de développer des outils moléculaires spécifiques au génotypage plaquettaire fœtal à partir du sang maternel. Nous nous intéressons particulièrement aux antigènes HPA-1, HPA-5, HPA-3 et HPA-4. Nous évaluons la sensibilité et la spécificité de ce test en comparant ces résultats avec ceux obtenus à partir d'un prélèvement invasif de liquide amniotique.

Il s'agit d'une étude prospective visant à évaluer les performances techniques et diagnostiques d'une nouvelle méthode moléculaire de diagnostic prénatal non invasif du génotypage plaquettaire.