Genotypisierung menschlicher Blutplättchen-Alloantigene: Nicht-invasive pränatale Diagnose

Thrombozytopenie-Isoimmunisierung bei Neugeborenen, mütterlich-fötal, hängt mit der mütterlichen Immunisierung gegen fötale Thrombozytenantigene väterlichen Ursprungs zusammen, die bei der Mutter nicht vorhanden sind. Sie gilt als Äquivalent zur hämolytischen Erkrankung des Neugeborenen. Die Inzidenz dieser Krankheit beträgt etwa 1 von 800-1000 Geburten. Die schwersten Formen verbunden mit Petechien, Purpura oder Kephalhämatom bei der Geburt mit einem großen Risiko für Hirnblutungen (20 % bis 25 % der Fälle) können den Tod des Kindes (15 %) oder schwere neurologische Probleme (15-30 %) verursachen Die Diagnose erfordert den Nachweis von Anti-Thrombozyten-Antikörpern mit mütterlicher Bestimmung der Thrombozyten-Phänotypen und -Genotypen der beiden Elternteile. Wenn es diagnostiziert wird, ist eine genetische Beratung des Paares für eine zukünftige Schwangerschaft erforderlich, da das Risiko eines erneuten Auftretens wichtig ist und der Schweregrad mit der Anzahl der Schwangerschaften zunimmt. Das Risiko hängt von der Art der väterlichen Antigene ab, homozygot oder heterozygot. Im Falle einer Heterozygotie basiert die vorgeburtliche Diagnose auf der Genotypisierung der fetalen Blutplättchen durch ein invasives Verfahren (Amniozentese oder Chorionzottenbiopsie), das mit dem Risiko eines fetalen Verlusts verbunden ist. Die für fetale Schädigung verantwortlichen Alloantikörper richten sich gegen Thrombozyten-Alloantigene: das ist das HPA-System (humanes Thrombozyten-Alloantigen). 24 Alloantigene wurden beschrieben und 12 von ihnen haben einen biallelischen Polymorphismus (a: das häufigste Allel und b das seltene Allel), unterteilt in 6 Gruppen (HPA-1, 2, 3, 4, 5 und 15). Die Genotyp-Phänotyp-Korrelationen wurden für 22 der 24 Alloantigene durchgeführt und zeigen, dass der antigene Polymorphismus aus der Anwesenheit eines SNP (single nucleotide polymorphism-) resultiert.

1997 zeigten Lo et al. das Vorhandensein von 3–6 % fötaler DNA im mütterlichen Blut. Diese Entdeckung führte zur Entwicklung von Methoden der nicht-invasiven pränatalen Diagnose: 1/ die Bestimmung des fetalen Rhesus 2/ des fetalen Geschlechts durch quantitative Echtzeit-PCR.

Das Ziel dieser Arbeit ist die Entwicklung spezifischer molekularer Werkzeuge zur Genotypisierung fötaler Thrombozyten aus mütterlichem Blut. Wir interessieren uns besonders für die Antigene HPA-1, HPA-5, HPA-3 und HPA-4. Wir bewerten die Sensitivität und Spezifität dieses Tests, indem wir diese Ergebnisse mit denen einer invasiven Probenahme von Fruchtwasser vergleichen.

Dies ist eine prospektive Studie zur Bewertung der technischen und diagnostischen Leistung einer neuen molekularen Methode zur nichtinvasiven pränatalen Diagnose der Thrombozyten-Genotypisierung.