Ihmisen verihiutaleiden alloantigeenien genotyypitys: ei-invasiivinen synnytystä edeltävä diagnoosi

Vastasyntyneen trombosytopenia-isoimmunisaatio äiti-sikiö liittyy äidin immunisaatioon sikiön verihiutaleantigeenejä vastaan, joita ei ole äidillä. Sitä pidetään vastasyntyneen hemolyyttisen taudin vastineena. Tämän taudin ilmaantuvuus on noin yksi 800-1000 syntymästä. Vakavimmat muodot, jotka liittyvät petekioihin, purppuraan tai kefalhematoomaan syntymän yhteydessä ja joilla on suuri aivoverenvuodon riski (20–25 % tapauksista), voivat aiheuttaa lapsen kuoleman (15 %) tai vakavia neurologisia ongelmia (15–30 %). Diagnoosi edellyttää verihiutaleiden vastaisten vasta-aineiden havaitsemista sekä äidin verihiutaleiden fenotyyppien ja kahden vanhemman genotyypin määrittämistä. Kun se todetaan, pariskunnan geneettinen neuvonta tulevaa raskautta varten on välttämätöntä, koska uusiutumisen riski on tärkeä ja vaikeusaste kasvaa raskauksien määrän myötä. Riski riippuu isän antigeenien luonteesta, homotsygoottinen tai heterotsygoottinen. Heterotsygoottisuudessa prenataalinen diagnoosi perustuu sikiön verihiutaleiden genotyypitykseen invasiivisella toimenpiteellä (amniosenteesin tai suonivilluksen näytteenotto), johon liittyy sikiön menetyksen riski. Sikiön vaurioista vastaavat allovasta-aineet kohdistuvat verihiutaleiden alloantigeenejä vastaan: tämä on HPA-järjestelmä (human trombolet alloantigen). 24 alloantigeeniä on kuvattu ja niistä 12:lla on kaksialleelinen polymorfismi (a: yleisin alleeli ja b harvinainen alleeli) jaettuna 6 ryhmään (HPA-1, 2, 3, 4, 5 ja 15). Genotyyppi-fenotyyppikorrelaatiot suoritettiin 22:lle 24 alloantigeenistä ja ne osoittavat, että antigeeninen polymorfismi johtuu SNP:n läsnäolosta (yksi nukleotidipolymorfismi-).

Vuonna 1997 Lo et al osoittivat, että äidin veressä oli 3-6 % sikiön DNA:ta. Tämä löytö johti ei-invasiivisten synnytysdiagnoosien menetelmien kehittämiseen: 1/ sikiön Rhesus-2/ sikiön sukupuolen määrittäminen reaaliaikaisella kvantitatiivisella PCR:llä.

Tämän työn tavoitteena on kehittää spesifisiä molekyylityökaluja sikiön verihiutaleiden genotyypitykseen äidin verestä. Olemme erityisen kiinnostuneita antigeeneista HPA-1, HPA-5, HPA-3 ja HPA-4. Arvioimme tämän testin herkkyyden ja spesifisyyden vertaamalla näitä tuloksia tuloksiin, jotka on saatu lapsiveden invasiivisesta näytteenotosta.

Tämä on prospektiivinen tutkimus, jonka tarkoituksena on arvioida verihiutaleiden genotyypityksen uuden molekyylimenetelmän noninvasiivisen prenataalisen diagnoosin teknistä ja diagnostista suorituskykyä.