Genotypowanie alloantygenów ludzkich płytek krwi: nieinwazyjna diagnostyka prenatalna

Izoimmunizacja matczyno-płodowa małopłytkowości noworodków jest związana z immunizacją matki przeciwko antygenom płytek krwi pochodzenia ojcowskiego, które nie występują u matki. Uważa się ją za odpowiednik choroby hemolitycznej noworodka. Częstość występowania tej choroby wynosi około 1 na 800-1000 urodzeń. Najcięższe postacie związane z wybroczynami, plamicą lub krwiakiem głowy po urodzeniu z dużym ryzykiem krwotoku mózgowego (20% do 25% przypadków) mogą spowodować śmierć dziecka (15%) lub poważne problemy neurologiczne (15-30%) Biologiczne Rozpoznanie wymaga wykrycia przeciwciał przeciwpłytkowych z matczynym określeniem fenotypów płytek krwi i genotypów obojga rodziców. W przypadku rozpoznania konieczne jest poradnictwo genetyczne dla pary dotyczące przyszłej ciąży, ponieważ ryzyko nawrotu jest istotne, a nasilenie wzrasta wraz z liczbą ciąż. Ryzyko zależy od rodzaju antygenów ojcowskich, homozygotycznych lub heterozygotycznych. W przypadku heterozygotyczności diagnostyka prenatalna opiera się na genotypowaniu płytek krwi płodu metodą inwazyjną (amniopunkcja lub biopsja kosmówki), która wiąże się z ryzykiem utraty płodu. Alloprzeciwciała odpowiedzialne za uszkodzenie płodu skierowane są przeciwko alloantygenom płytek krwi: jest to układ HPA (ang. human platelet alloantigen). Opisano 24 alloantygeny, z czego 12 ma polimorfizm bialleliczny (a: allel najczęstszy i b allel rzadki) podzielony na 6 grup (HPA-1, 2, 3, 4, 5 i 15). Korelacje genotyp-fenotyp przeprowadzono dla 22 z 24 alloantygenów i wykazano, że polimorfizm antygenowy wynika z obecności SNP (polimorfizm pojedynczego nukleotydu-).

W 1997 Lo i wsp. wykazali obecność 3-6% płodowego DNA we krwi matki. Odkrycie to doprowadziło do opracowania metod nieinwazyjnej diagnostyki prenatalnej: 1/ oznaczania Rhesus płodu 2/ płci płodu metodą ilościowego PCR w czasie rzeczywistym.

Celem tej pracy jest opracowanie specyficznych narzędzi molekularnych do genotypowania płytek krwi płodu z krwi matki. Szczególnie interesują nas antygeny HPA-1, HPA-5, HPA-3 i HPA-4. Oceniamy czułość i swoistość tego testu, porównując te wyniki z wynikami uzyskanymi z inwazyjnego pobierania próbek płynu owodniowego.

Jest to prospektywne badanie mające na celu ocenę technicznej i diagnostycznej wydajności nowej metody nieinwazyjnej prenatalnej diagnostyki genotypowania płytek krwi.