Genotypering van alloantigenen van menselijke bloedplaatjes: niet-invasieve prenatale diagnose

Neonatale trombocytopenie iso-immunisatie maternale-foetale is gerelateerd aan maternale immunisatie tegen foetale bloedplaatjesantigenen van vaderlijke oorsprong die niet aanwezig zijn in de moeder. Het wordt beschouwd als het equivalent van hemolytische ziekte van de pasgeborene. De incidentie van deze ziekte is ongeveer 1 op de 800-1000 geboorten. De ernstigste vormen geassocieerd met petechiën, purpura of cefalhematoom bij de geboorte met een groot risico op hersenbloedingen (20% tot 25% van de gevallen) kunnen de dood van het kind (15%) of ernstige neurologische problemen (15-30%) veroorzaken. diagnose vereist de detectie van anti-bloedplaatjes-antistoffen met maternale bepaling van bloedplaatjes fenotypes en genotypen van de twee ouders. Wanneer de diagnose wordt gesteld, is erfelijkheidsadvies aan het paar voor een toekomstige zwangerschap noodzakelijk omdat het risico op herhaling belangrijk is en de ernst toeneemt met het aantal zwangerschappen. Het risico hangt af van de aard van de vaderlijke antigenen, homozygoot of heterozygoot. In geval van heterozygositeit is de prenatale diagnose gebaseerd op genotypering van de foetale bloedplaatjes door middel van een invasieve procedure (vruchtwaterpunctie of vlokkentest) die gepaard gaat met een risico op verlies van de foetus. De allo-antilichamen die verantwoordelijk zijn voor foetale schade zijn gericht tegen allo-antigenen van bloedplaatjes: dit is het HPA-systeem (humane allo-antigeen van bloedplaatjes). Er zijn 24 allo-antigenen beschreven en 12 daarvan hebben een biallelisch polymorfisme (a: het meest voorkomende allel en b het zeldzame allel) verdeeld in 6 groepen (HPA-1, 2, 3, 4, 5 en 15). De genotype-fenotype-correlaties werden uitgevoerd voor 22 van de 24 allo-antigenen en tonen aan dat het antigene polymorfisme het gevolg is van de aanwezigheid van een SNP (single nucleotide polymorphism-).

In 1997 toonden Lo et al. de aanwezigheid aan van 3-6% foetaal DNA in het bloed van de moeder. Deze ontdekking leidde tot de ontwikkeling van methoden voor niet-invasieve prenatale diagnose: 1/ de bepaling van foetale resus 2/ foetale seks door middel van real-time kwantitatieve PCR.

Het doel van dit werk is om specifieke moleculaire tools te ontwikkelen voor het genotyperen van foetale bloedplaatjes uit maternaal bloed. We zijn met name geïnteresseerd in de antigenen HPA-1, HPA-5, HPA-3 en HPA-4. We evalueren de sensitiviteit en specificiteit van deze test door deze resultaten te vergelijken met die van een invasieve bemonstering van vruchtwater.

Dit is een prospectieve studie om de technische en diagnostische prestaties te beoordelen van een nieuwe moleculaire methode voor niet-invasieve prenatale diagnose van genotypering van bloedplaatjes.