Генотипирование аллоантигенов тромбоцитов человека: неинвазивная пренатальная диагностика

Неонатальная тромбоцитопения изоиммунизация мать-плод связана с иммунизацией матери против тромбоцитарных антигенов плода отцовского происхождения, отсутствующих у матери. Считается эквивалентом гемолитической болезни новорожденных. Частота этого заболевания составляет примерно 1 случай на 800-1000 новорожденных. Наиболее тяжелые формы, сочетающиеся с петехиями, пурпурой или кефалогематомой при рождении с большим риском кровоизлияния в мозг (20–25 % случаев), могут привести к смерти ребенка (15 %) или тяжелым неврологическим нарушениям (15–30 %) Биологические диагностика требует выявления антитромбоцитарных антител с материнским определением фенотипов тромбоцитов и генотипов обоих родителей. Когда он диагностирован, необходимо генетическое консультирование пары для будущей беременности, потому что риск рецидива важен, а тяжесть увеличивается с количеством беременностей. Риск зависит от характера отцовских антигенов, гомозиготных или гетерозиготных. В случае гетерозиготности пренатальная диагностика основывается на генотипировании тромбоцитов плода с помощью инвазивной процедуры (амниоцентез или биопсия ворсин хориона), связанной с риском потери плода. Аллоантитела, ответственные за повреждение плода, направлены против аллоантигенов тромбоцитов: это система HPA (аллоантиген тромбоцитов человека). Описано 24 аллоантигена, 12 из них имеют биаллельный полиморфизм (а: наиболее частый аллель и б — редкий аллель), разделенный на 6 групп (ГПК-1, 2, 3, 4, 5 и 15). Корреляции генотип-фенотип были выполнены для 22 из 24 аллоантигенов и показали, что антигенный полиморфизм возникает в результате присутствия SNP (однонуклеотидный полиморфизм-).

В 1997 г. Lo и соавт. показали присутствие 3-6% фетальной ДНК в материнской крови. Это открытие привело к разработке методов неинвазивной пренатальной диагностики: 1/ определение резуса плода 2/ пола плода методом количественной ПЦР в реальном времени.

Целью данной работы является разработка конкретных молекулярных инструментов для генотипирования фетальных тромбоцитов из материнской крови. Нас особенно интересуют антигены HPA-1, HPA-5, HPA-3 и HPA-4. Мы оцениваем чувствительность и специфичность этого теста, сравнивая эти результаты с результатами, полученными при инвазивном заборе амниотической жидкости.

Это проспективное исследование для оценки технических и диагностических характеристик нового молекулярного метода неинвазивной пренатальной диагностики генотипирования тромбоцитов.