Genotyping af humane blodpladealloantigener: Ikke-invasiv prænatal diagnose

Neonatal trombocytopeni isoimmunisering maternal-fetal er relateret til maternal immunisering mod føtale blodpladeantigener med faderlig oprindelse, der ikke er til stede i moderen. Det anses for at svare til hæmolytisk sygdom hos den nyfødte. Forekomsten af ​​denne sygdom er omkring 1 ud af 800-1000 fødsler. De mest alvorlige former forbundet med petekkier, purpura eller cephalhematom ved fødslen med en stor risiko for hjerneblødninger (20 % til 25 % af tilfældene) kan forårsage barnets død (15 %) eller alvorlige neurologiske problemer (15-30 %) Biologiske diagnose kræver påvisning af anti-blodplade-antistoffer med maternel bestemmelse af blodpladefænotyper og genotyper af de to forældre. Når det er diagnosticeret, er genetisk rådgivning til parret for en fremtidig graviditet nødvendig, fordi risikoen for gentagelse er vigtig, og sværhedsgraden stiger med antallet af graviditeter. Risikoen afhænger af arten af ​​faderlige antigener, homozygote eller heterozygote. I tilfælde af heterozygositet er prænatal diagnose baseret på føtal blodpladegenotypebestemmelse ved en invasiv procedure (amniocentese eller chorionic villus prøvetagning) forbundet med en risiko for fostertab. De alloantistoffer, der er ansvarlige for fosterskader, er rettet mod blodplade-alloantigen: dette er HPA-systemet (humant blodplade-alloantigen). 24 alloantigener er blevet beskrevet, og 12 af dem har en biallel polymorfi (a: den hyppigste allel og b den sjældne allel) opdelt i 6 grupper (HPA-1, 2, 3, 4, 5 og 15). Genotype-fænotype-korrelationerne blev udført for 22 af de 24 alloantigener og viser, at den antigene polymorfi skyldes tilstedeværelsen af ​​en SNP (single nucleotide polymorphism-).

I 1997 viste Lo et al tilstedeværelsen af ​​3-6% af føtalt DNA i moderens blod. Denne opdagelse førte til udviklingen af ​​metoder til ikke-invasiv prænatal diagnose: 1/ bestemmelse af føtal Rhesus 2/ føtal køn ved real-time kvantitativ PCR.

Formålet med dette arbejde er at udvikle specifikke molekylære værktøjer til føtal blodpladegenotypebestemmelse fra moderens blod. Vi er særligt interesserede i antigenerne HPA-1, HPA-5, HPA-3 og HPA-4. Vi vurderer sensitiviteten og specificiteten af ​​denne test ved at sammenligne disse resultater med resultaterne opnået fra en invasiv prøvetagning af fostervand.

Dette er en prospektiv undersøgelse for at vurdere den tekniske og diagnostiske ydeevne af en ny molekylær metode, ikke-invasiv prænatal diagnose af blodpladegenotypning.