Genotypning av humana trombocytalloantigener: Icke-invasiv prenatal diagnos

Neonatal trombocytopeni isoimmunisering maternal-fetal är relaterad till moderns immunisering mot fostertrombocytantigener med paternalt ursprung som inte finns hos modern. Det anses motsvara hemolytisk sjukdom hos det nyfödda barnet. Förekomsten av denna sjukdom är cirka 1 av 800-1000 födslar. De allvarligaste formerna förknippade med petekier, purpura eller cefalhematom vid födseln med stor risk för hjärnblödningar (20 % till 25 % av fallen) kan orsaka barnets död (15 %) eller allvarliga neurologiska besvär (15-30 %) Biologiska diagnos kräver detektering av anti-trombocytantikroppar med maternell bestämning av trombocytfenotyper och genotyper av de två föräldrarna. När det diagnostiseras är genetisk rådgivning till paret för en framtida graviditet nödvändig eftersom risken för återfall är viktig och svårighetsgraden ökar med antalet graviditeter. Risken beror på arten av paternala antigener, homozygota eller heterozygota. Vid heterozygositet baseras prenatal diagnos på fostrets trombocytgenotypning genom ett invasivt förfarande (fostervattenprov eller korionvillusprovtagning) associerat med risk för fosterförlust. De alloantikroppar som är ansvariga för fosterskada är riktade mot trombocytalloantigener: detta är HPA-systemet (human platelet alloantigen). 24 alloantigener har beskrivits och 12 av dem har en biallelisk polymorfism (a: den vanligaste allelen och b den sällsynta allelen) uppdelade i 6 grupper (HPA-1, 2, 3, 4, 5 och 15). Genotyp-fenotyp-korrelationerna utfördes för 22 av de 24 alloantigenerna och visar att den antigena polymorfismen är ett resultat av närvaron av en SNP (single nucleotide polymorphism-).

1997 visade Lo et al närvaron av 3-6% av foster-DNA i moderns blod. Denna upptäckt ledde till utvecklingen av metoder för icke-invasiv prenatal diagnos: 1/ bestämning av foster Rhesus 2/ fosterkön genom kvantitativ PCR i realtid.

Målet med detta arbete är att utveckla specifika molekylära verktyg för genotypning av fosterblodplättar från moderns blod. Vi är särskilt intresserade av antigenerna HPA-1, HPA-5, HPA-3 och HPA-4. Vi utvärderar känsligheten och specificiteten för detta test genom att jämföra dessa resultat med de som erhållits från en invasiv provtagning av fostervatten.

Detta är en prospektiv studie för att bedöma den tekniska och diagnostiska prestandan hos en ny molekylär metod för icke-invasiv prenatal diagnos av trombocytgenotypning.