Genová exprese související s oxidačním stresem v buňkách kumulu mezi osobami s nízkou odezvou

Nízká odpověď na řízenou ovariální hyperstimulaci (méně než 5 získaných oocytů) je problémem u některých párů léčených pro neplodnost. Studie ukázaly, že úspěšnost léčby u těchto pacientů je nižší než u skupiny s normální odpovědí. Mezi mnoha faktory přispívajícími k nízké odpovědi se předpokládá, že oxidační stres se podílí na nesprávné funkci folikulárního prostředí a zrání oocytů. Přímý vztah mezi oxidativní funkcí a funkcí oocytů však nelze studovat z důvodu etického zájmu, takže mnoho studií místo toho studovalo okolní prostředí oocytů, jako jsou kupovité buňky a folikulární tekutina.

V naší studii se zaměřujeme na studium rozdílu v úrovni genové exprese související s oxidačním stresem a biomarkerů oocytární kompetence mezi pacienty s nízkou a normálními odpověďmi. Pro genovou expresi buněk cumulus související s oxidačním stresem budeme měřit expresi mRNA pomocí kvantitativní PCR pro superoxiddismutázu 1 (SOD1), SOD2, glutathionperoxidázu (GPX) a indukovatelnou syntázu oxidu dusnatého (iNOS). Pro oocytově kompetentní biomarkery použijeme techniku ​​ELISA k měření hladiny GDF(, BMP15, amfiregulinu a CoQ10 ve folikulární tekutině.

Výpočet velikosti vzorku byl proveden s daty ze studie provedené Donnabelou et al., která zjistila, že průměrná exprese genu SOD v kontrolní skupině byla 2,06 2-A ACT (SD = 0,53). Byl použit vzorec pro srovnání dvou různých průměrů s očekáváním, že skupina s nízkou odezvou bude mít nižší expresi genu SOD o 20 %.:

n/skupina = 2(Z α/2 + Z β)2 σ2 / (X̅1- X̅2)2

α = 0,05 , β = 0,2 Z α/2 = Z0,05/2 = 1,96 (dvoustranná) Zp = Z0,8 = 0,84

Průměr ve skupině 1 (X̅1) = 2,06, SD. ve skupině1 (σ₁) = 0,53 Průměr ve skupině2 (X̅2) = 1,64, SD. ve skupině2 (σ₂)= 0,53 Velikost vzorku: Skupina1 (n₁) = 25, Skupina2 (n₂) = 25 Celkový počet je 56 pacientů (připočteno 10 % pro možnou ztrátu dat)

Statistická analýza

1. Pro popisná data se použije průměr a standardní odchylka.
2. Podle potřeby se použije Mann-Whitney U test, nepárový t-test a chí kvadrát
3. p hodnota menší než 0,05 je považována za statisticky významnou.