Genexpression im Zusammenhang mit oxidativem Stress in Cumulus-Zellen unter Low-Respondern

Eine geringe Reaktion auf eine kontrollierte ovarielle Hyperstimulation (weniger als 5 entnommene Eizellen) ist ein Problem bei einigen Paaren, die eine Behandlung wegen Unfruchtbarkeit erhalten. Studien haben gezeigt, dass die Erfolgsrate bei der Behandlung dieser Patienten niedriger ist als bei der Gruppe mit normaler Reaktion. Unter vielen Faktoren, die zu einer geringen Reaktion beitragen, wird vermutet, dass oxidativer Stress an der Fehlfunktion der follikulären Umgebung und der Oozytenreifung beteiligt ist. Die direkte Beziehung zwischen oxidativer und Eizellenfunktion kann jedoch aus ethischen Gründen nicht untersucht werden, so dass viele Studien stattdessen die Umgebung der Eizelle wie Kumuluszellen und Follikelflüssigkeit untersucht haben.

In unserer Studie zielen wir darauf ab, den Unterschied im Niveau der oxidativen Stress-bezogenen Genexpression und der Biomarker für die Oozytenkompetenz zwischen Low-Respondern und Normal-Respondern zu untersuchen. Für die durch oxidativen Stress bedingte Genexpression von Kumuluszellen werden wir die mRNA-Expression durch quantitative PCR für Superoxiddismutase 1 (SOD1), SOD2, Glutathionperoxidase (GPX) und induzierbare Stickoxidsynthase (iNOS) messen. Für oozytenkompetente Biomarker werden wir die ELISA-Technik verwenden, um den Gehalt an GDF(, BMP15, Amphiregulin und CoQ10 in der Follikelflüssigkeit zu messen.

Die Berechnung der Stichprobengröße wurde mit Daten aus einer von Donnabela et al. durchgeführten Studie durchgeführt, die ergab, dass die mittlere SOD-Genexpression in der Kontrollgruppe 2,06 2-Δ ΔCT (SD = 0,53) betrug. Die Formel zum Vergleich zweier unterschiedlicher Mittelwerte wurde mit der Erwartung verwendet, dass die Gruppe der Low-Responder eine um 20 % niedrigere SOD-Genexpression aufweisen würde:

n/Gruppe = 2(Z α/2 + Z β)2 σ2 / (X̅ 1- X̅ 2)2

α = 0,05 , β = 0,2 Z α/2 = Z0,05/2 = 1,96 (zweischwänzig) Z β = Z0,8 = 0,84

Mittelwert in Gruppe 1 (X̅ 1) = 2,06, SD. in Gruppe1 (σ₁) = 0,53 Mittelwert in Gruppe2 (X̅ 2) = 1,64, SD. in Gruppe2 (σ₂)= 0,53 Stichprobengröße: Gruppe1 (n₁) = 25, Gruppe2 (n₂) = 25 Gesamtzahl beträgt 56 Patienten (zusätzlich 10 % für möglichen Datenverlust)

statistische Analyse

1. Mittelwert und Standardabweichung werden für beschreibende Daten verwendet.
2. Mann-Whitney-U-Test, ungepaarter t-Test und Chi-Quadrat werden nach Bedarf verwendet
3. Ein p-Wert von weniger als 0,05 wird als statistisch signifikant angesehen.