Espressione genica correlata allo stress ossidativo nelle cellule del cumulo tra i soggetti a bassa risposta

La bassa risposta all'iperstimolazione ovarica controllata (meno di 5 ovociti recuperati) è un problema in alcune coppie che ricevono un trattamento per l'infertilità. Gli studi hanno dimostrato che il tasso di successo nel trattamento di questi pazienti è inferiore al normale gruppo di risposta. Tra i molti fattori che contribuiscono alla bassa risposta, si sospetta che lo stress ossidativo sia coinvolto nel malfunzionamento dell'ambiente follicolare e nella maturazione degli ovociti. Tuttavia, la relazione diretta tra la funzione ossidativa e quella dell'ovocita non può essere studiata a causa di preoccupazioni etiche, quindi molti studi avevano invece studiato l'ambiente circostante l'ovocita come la cellula del cumulo e il fluido follicolare.

Nel nostro studio, miriamo a studiare la differenza nel livello di espressione genica correlata allo stress ossidativo e nei biomarcatori di competenza degli ovociti tra i soggetti a bassa risposta e quelli normali. Per l'espressione genica correlata allo stress ossidativo delle cellule del cumulo, misureremo l'espressione dell'mRNA mediante PCR quantitativa per la superossido dismutasi 1 (SOD1), la SOD2, la glutatione perossidasi (GPX) e l'ossido nitrico sintasi inducibile (iNOS). Per i biomarcatori competenti per gli ovociti, utilizzeremo la tecnica ELISA per misurare il livello di GDF(, BMP15, Amphiregulin e CoQ10 nel fluido follicolare.

Il calcolo della dimensione del campione è stato effettuato con i dati dello studio eseguito da Donnabela et al , che ha rilevato che l'espressione genica SOD media nel gruppo di controllo era 2,06 2-Δ ΔCT (SD = 0,53). La formula per il confronto di due diverse medie è stata utilizzata con l'aspettativa che il gruppo a bassa risposta avrebbe un'espressione del gene SOD inferiore del 20%.:

n/gruppo = 2(Z α/2 + Z β)2 σ2 / (X̅ 1- X̅ 2)2

α = 0.05 , β = 0.2 Z α/2 = Z0.05/2 = 1.96 (due code) Z β = Z0.8 = 0.84

Media nel gruppo 1 (X̅ 1) = 2,06, SD. nel gruppo1 (σ₁) = 0,53 Media nel gruppo2 (X̅ 2) = 1,64, SD. nel gruppo2 (σ₂)= 0,53 Dimensione del campione: Gruppo1 (n₁) = 25, Gruppo2 (n₂) = 25 Il numero totale è di 56 pazienti (aggiunto il 10% per possibile perdita di dati)

analisi statistica

1. La media e la deviazione standard saranno utilizzate per i dati descrittivi.
2. Il test U di Mann-Whitney, il test t non accoppiato e il chi quadro saranno utilizzati a seconda dei casi
3. un valore p inferiore a 0,05 è considerato statisticamente significativo.