Oxidatív stresszel kapcsolatos génexpresszió a kumuluszsejtekben az alacsony válaszadók körében

A kontrollált petefészek-hiperstimulációra adott alacsony válasz (5-nél kevesebb petesejtek) problémát jelent néhány meddőségi kezelésben részesülő párban. A vizsgálatok kimutatták, hogy ezeknél a betegeknél a kezelés sikerességi aránya alacsonyabb, mint a normál válaszreakciós csoportban. Az alacsony válaszreakcióhoz hozzájáruló számos tényező közül az oxidatív stressz feltételezhető, hogy szerepet játszik a tüszőkörnyezet hibás működésében és a petesejtek érésében. Az oxidatív és a petesejtek működése közötti közvetlen kapcsolat azonban etikai aggályok miatt nem vizsgálható, ezért sok tanulmány a petesejteket körülvevő környezetet, például a kumulusz sejtet és a follikuláris folyadékot vizsgálta.

Vizsgálatunkban az oxidatív stresszhez kapcsolódó génexpresszió és a petesejt-kompetencia biomarkerek szintjében mutatkozó különbségek tanulmányozását célozzuk az alacsony és normál válaszadók között. A kumuluszsejtek oxidatív stresszel kapcsolatos génexpressziójához kvantitatív PCR-rel mérjük a szuperoxid-diszmutáz 1 (SOD1), SOD2, glutation-peroxidáz (GPX) és az indukálható nitrogén-monoxid-szintáz (iNOS) mRNS-expresszióját. A petesejt-kompetens biomarkerek esetében ELISA technikát használunk a GDF(, BMP15, Amphiregulin és CoQ10) szintjének mérésére a follikuláris folyadékban.

A minta méretének kiszámítása Donnabela és munkatársai által végzett tanulmányból származó adatokkal történt, amely azt találta, hogy az átlagos SOD génexpresszió a kontrollcsoportban 2,06 2-ΔΔCT (SD = 0,53). A két különböző átlag összehasonlítására szolgáló képletet arra számítottuk, hogy a gyengén reagáló csoport 20%-kal alacsonyabb SOD génexpresszióval rendelkezik:

n/csoport = 2(Z α/2 + Z β)2 σ2 / (X̅ 1- X̅ 2)2

α = 0,05, β = 0,2 Z α/2 = Z0,05/2 = 1,96 (két farok) Z β = Z0,8 = 0,84

Átlag az 1. csoportban (X̅ 1) = 2,06, SD. az 1. csoportban (σ₁) = 0,53 Átlag a 2. csoportban (X̅ 2) = 1,64, SD. a 2. csoportban (σ₂)= 0,53 Mintaméret: 1. csoport (n₁) = 25, 2. csoport (n₂) = 25 A teljes létszám 56 beteg (10%-kal hozzáadva az esetleges adatvesztésért)

Statisztikai analízis

1. A leíró adatokhoz az átlagot és a szórást használjuk.
2. A Mann-Whitney U-tesztet, a párosítatlan t-tesztet és a chi-négyzetet megfelelően kell használni
3. a 0,05-nél kisebb p érték statisztikailag szignifikáns.