Oxidatieve stressgerelateerde genexpressie in cumuluscellen bij lage responders

Lage respons op gecontroleerde ovariële hyperstimulatie (minder dan 5 verkregen oöcyten) is een probleem bij sommige paren die worden behandeld voor onvruchtbaarheid. Studies hebben aangetoond dat het slagingspercentage bij de behandeling van deze patiënten lager is dan bij de normale responsgroep. Van de vele factoren die bijdragen aan een lage respons, wordt vermoed dat oxidatieve stress betrokken is bij het slecht functioneren van de folliculaire omgeving en de rijping van eicellen. De directe relatie tussen oxidatieve en oöcytfunctie kan echter niet worden bestudeerd vanwege ethische bezorgdheid, dus veel onderzoeken hadden in plaats daarvan de omgeving van oöcyten bestudeerd, zoals cumuluscellen en folliculaire vloeistof.

In onze studie willen we het verschil bestuderen in het niveau van oxidatieve stress-gerelateerde genexpressie en oöcyt competentie biomarkers tussen lage responders en normale responders. Voor aan oxidatieve stress gerelateerde genexpressie van cumuluscellen zullen we mRNA-expressie meten door middel van kwantitatieve PCR voor Superoxide dismutase 1 (SOD1), SOD2, Glutathione peroxidase (GPX) en Inducible Stikstofoxide Synthase (iNOS). Voor eicelcompetente biomarkers zullen we de ELISA-techniek gebruiken om het niveau van GDF(, BMP15, Amphiregulin en CoQ10 in folliculair vocht te meten.

De berekening van de steekproefomvang werd gedaan met gegevens uit een onderzoek uitgevoerd door Donnabela et al., waaruit bleek dat de gemiddelde SOD-genexpressie in de controlegroep 2,06 2-ΔΔCT (SD = 0,53) was. De formule voor het vergelijken van twee verschillende gemiddelden werd gebruikt met de verwachting dat de groep met een lage respons een lagere SOD-genexpressie met 20% zou hebben.:

n/groep = 2(Z α/2 + Z β)2 σ2 / (X̅ 1- X̅ 2)2

α = 0,05 , β = 0,2 Z α/2 = Z0,05/2 = 1,96 (twee staarten) Z β = Z0,8 = 0,84

Gemiddelde in groep1 (X̅ 1) = 2,06, SD. in groep1 (σ₁) = 0,53 Gemiddelde in groep2 (X̅ 2) = 1,64, SD. in groep2 (σ₂)= 0,53 Steekproefomvang: Groep1 (n₁) = 25, Groep2 (n₂) = 25 Totaal aantal is 56 patiënten (10% toegevoegd voor mogelijk gegevensverlies)

statistische analyse

1. Gemiddelde en standaarddeviatie worden gebruikt voor beschrijvende gegevens.
2. Mann-Whitney U-test, ongepaarde t-test en chi-kwadraat zullen waar van toepassing worden gebruikt
3. p-waarde kleiner dan 0,05 wordt als statistisch significant beschouwd.