Экспрессия генов, связанная с окислительным стрессом, в клетках кумулюса среди людей с низкой реакцией

Низкий ответ на контролируемую гиперстимуляцию яичников (менее 5 извлеченных ооцитов) является проблемой у некоторых пар, получающих лечение от бесплодия. Исследования показали, что показатель успеха в лечении этих пациентов ниже, чем в группе нормального ответа. Предполагается, что среди многих факторов, способствующих низкому ответу, окислительный стресс связан с нарушением фолликулярной среды и созреванием ооцитов. Однако прямая связь между окислительной функцией и функцией ооцита не может быть изучена из соображений этики, поэтому во многих исследованиях вместо этого изучалась среда, окружающая ооцит, такая как кумулюсные клетки и фолликулярная жидкость.

В нашем исследовании мы стремимся изучить разницу в уровне экспрессии генов, связанных с окислительным стрессом, и биомаркеров компетентности ооцитов среди респондентов с низким и нормальным ответом. Для связанной с окислительным стрессом экспрессии генов кумулюсных клеток мы будем измерять экспрессию мРНК с помощью количественной ПЦР для супероксиддисмутазы 1 (SOD1), SOD2, глутатионпероксидазы (GPX) и индуцируемой синтазы оксида азота (iNOS). Для компетентных биомаркеров ооцитов мы будем использовать метод ELISA для измерения уровня GDF(, BMP15, амфирегулина и CoQ10 в фолликулярной жидкости.

Расчет размера выборки был выполнен с использованием данных исследования, проведенного Donnabela et al., которое показало, что средняя экспрессия гена SOD в контрольной группе составляла 2,06 2-Δ ΔCT (SD = 0,53). Формула для сравнения двух разных средних значений использовалась с расчетом на то, что группа с низким ответом будет иметь более низкую экспрессию гена SOD на 20%.:

n/группа = 2(Z α/2 + Z β)2 σ2 / (X̅ 1- X̅ 2)2

α = 0,05, β = 0,2 Z α/2 = Z0,05/2 = 1,96 (два хвоста) Z β = Z0,8 = 0,84

Среднее значение в группе 1 (X̅ 1) = 2,06, стандартное отклонение. в группе 1 (σ₁) = 0,53 Среднее значение в группе 2 (X̅ 2) = 1,64, SD. в группе 2 (σ₂)= 0,53 Размер выборки: Группа 1 (n₁) = 25, Группа 2 (n₂) = 25 Всего 56 пациентов (добавлено 10% на возможную потерю данных)

статистический анализ

1. Среднее значение и стандартное отклонение будут использоваться для описательных данных.
2. Критерий Манна-Уитни U, непарный критерий Стьюдента и хи-квадрат будут использоваться по мере необходимости.
3. Значение р менее 0,05 считается статистически значимым.