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- Registre américain des essais cliniques
- Essai clinique NCT03155438
Expression génique liée au stress oxydatif dans les cellules de Cumulus chez les faibles répondeurs
Expression génique liée au stress oxydatif dans les cellules de cumulus parmi les faibles répondeurs à l'hyperstimulation ovarienne contrôlée pendant la fécondation in vitro
Aperçu de l'étude
Statut
Les conditions
Description détaillée
La faible réponse à l'hyperstimulation ovarienne contrôlée (moins de 5 ovocytes récupérés) est un problème chez certains couples recevant un traitement contre l'infertilité. Des études ont montré que le taux de réussite du traitement pour ces patients est inférieur à celui du groupe de réponse normal. Parmi les nombreux facteurs contribuant à une faible réponse, le stress oxydatif est suspecté d'être impliqué dans le dysfonctionnement de l'environnement folliculaire et la maturation des ovocytes. Cependant, la relation directe entre la fonction oxydative et la fonction ovocytaire ne peut pas être étudiée en raison de préoccupations éthiques, de sorte que de nombreuses études ont plutôt étudié l'environnement environnant de l'ovocyte, tel que les cellules cumulus et le liquide folliculaire.
Dans notre étude, nous visons à étudier la différence de niveau d'expression des gènes liés au stress oxydatif et de biomarqueurs de la compétence des ovocytes parmi les répondeurs faibles et les répondeurs normaux. Pour l'expression des gènes liés au stress oxydatif des cellules du cumulus, nous mesurerons l'expression de l'ARNm par PCR quantitative pour la superoxyde dismutase 1 (SOD1), la SOD2, la glutathion peroxydase (GPX) et l'oxyde nitrique synthase inductible (iNOS). Pour les biomarqueurs compétents pour les ovocytes, nous utiliserons la technique ELISA pour mesurer le niveau de GDF(, BMP15, Amphiregulin et CoQ10 dans le liquide folliculaire.
Le calcul de la taille de l'échantillon a été effectué avec les données de l'étude réalisée par Donnabela et al , qui a révélé que l'expression moyenne du gène SOD dans le groupe témoin était de 2,06 2-Δ ΔCT (SD = 0,53). La formule de comparaison de deux moyennes différentes a été utilisée avec l'espoir que le groupe de faibles répondeurs aurait une expression du gène SOD inférieure de 20 %. :
n/groupe = 2(Z α/2 + Z β)2 σ2 / (X̅ 1- X̅ 2)2
α = 0,05 , β = 0,2 Z α/2 = Z0,05/2 = 1,96 (bilatéral) Z β = Z0,8 = 0,84
Moyenne dans le groupe1 (X̅ 1) = 2,06, SD. dans le groupe1 (σ₁) = 0,53 Moyenne dans le groupe2 (X̅ 2) = 1,64, DAKOTA DU SUD. dans le groupe2 (σ₂)= 0,53 Taille de l'échantillon : Groupe1 (n₁) = 25, Groupe2 (n₂) = 25 Le nombre total est de 56 patients (ajouté de 10 % pour une éventuelle perte de données)
analyses statistiques
- La moyenne et l'écart type seront utilisés pour les données descriptives.
- Le test U de Mann-Whitney, le test t non apparié et le chi carré seront utilisés selon le cas
- Une valeur de p inférieure à 0,05 est considérée comme statistiquement significative.
Type d'étude
Inscription (Anticipé)
Contacts et emplacements
Lieux d'étude
-
-
-
Bangkok, Thaïlande, 10330
- Faculty of Medicine ,Chulalongkorn University
-
-
Critères de participation
Critère d'éligibilité
Âges éligibles pour étudier
Accepte les volontaires sains
Sexes éligibles pour l'étude
Méthode d'échantillonnage
Population étudiée
La description
Critère d'intégration:
- Faible réponse : femmes âgées de 25 à 49 ans avec moins de 5 ovocytes (1 à 4 ovocytes) récupérés lors d'une hyperstimulation ovarienne contrôlée
- Femmes répondeuses normales âgées de 25 à 49 ans avec 5 à 15 ovocytes récupérés lors d'une hyperstimulation ovarienne contrôlée
Critère d'exclusion:
- Pathologie ovarienne active (kyste ou tumeur ovarienne)
- FSH basale supérieure à 20 UI/L ou hormone antimullérienne inférieure à 0,5 ng/ml
- Syndrome d'hyperstimulation ovarienne
Plan d'étude
Comment l'étude est-elle conçue ?
Détails de conception
- Modèles d'observation: Cas-témoins
- Perspectives temporelles: Transversale
Cohortes et interventions
Groupe / Cohorte |
Intervention / Traitement |
|---|---|
|
Faible répondeur
Faible réponse : femmes âgées de 25 à 49 ans avec moins de 5 ovocytes (1 à 4 ovocytes) récupérés lors d'une hyperstimulation ovarienne contrôlée L'expression des gènes liés au stress oxydatif et les biomarqueurs de la compétence des ovocytes seront effectués pour accéder à la différence entre les répondeurs faibles et normaux. |
Expression génique liée au stress oxydatif (expression d'ARN), superoxyde dismutase 1 (SOD1), SOD2, glutathion peroxydase (GPX) et oxyde nitrique synthase inductible (iNOS), mesurée par la technique de PCR en temps réel.
Biomarqueurs de compétence ovocytaire ,GDF9, BMP15, Amphiregulin et CoQ10 mesurés par ELISA
|
|
Répondeur normal
Femmes répondeuses normales âgées de 25 à 49 ans avec 5 à 15 ovocytes récupérés lors d'une hyperstimulation ovarienne contrôlée L'expression des gènes liés au stress oxydatif et les biomarqueurs de la compétence des ovocytes seront effectués pour accéder à la différence entre les répondeurs faibles et normaux. |
Expression génique liée au stress oxydatif (expression d'ARN), superoxyde dismutase 1 (SOD1), SOD2, glutathion peroxydase (GPX) et oxyde nitrique synthase inductible (iNOS), mesurée par la technique de PCR en temps réel.
Biomarqueurs de compétence ovocytaire ,GDF9, BMP15, Amphiregulin et CoQ10 mesurés par ELISA
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Que mesure l'étude ?
Principaux critères de jugement
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
|---|---|---|
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Expression génique liée au stress oxydatif
Délai: Juin 2017-mai 2018
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Expression d'ARNm par PCR quantitative pour la superoxyde dismutase 1 (SOD1) SOD2, la glutathion peroxydase (GPX) et l'oxyde nitrique synthase inductible (iNOS).
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Juin 2017-mai 2018
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Mesures de résultats secondaires
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
|---|---|---|
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biomarqueurs compétents pour les ovocytes
Délai: Juin 2017-mai 2018
|
Technique ELISA pour mesurer le niveau de GDF9, BMP15, Amphiregulin et CoQ10 dans le liquide folliculaire.
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Juin 2017-mai 2018
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Collaborateurs et enquêteurs
Parrainer
Les enquêteurs
- Chercheur principal: Porntip Sirayapiwat, MD, Chulalongkorn University
Publications et liens utiles
Publications générales
- Oudendijk JF, Yarde F, Eijkemans MJ, Broekmans FJ, Broer SL. The poor responder in IVF: is the prognosis always poor?: a systematic review. Hum Reprod Update. 2012 Jan-Feb;18(1):1-11. doi: 10.1093/humupd/dmr037. Epub 2011 Oct 10.
- Polyzos NP, Sunkara SK. Sub-optimal responders following controlled ovarian stimulation: an overlooked group? Hum Reprod. 2015 Sep;30(9):2005-8. doi: 10.1093/humrep/dev149. Epub 2015 Jul 21.
- Agarwal A, Aponte-Mellado A, Premkumar BJ, Shaman A, Gupta S. The effects of oxidative stress on female reproduction: a review. Reprod Biol Endocrinol. 2012 Jun 29;10:49. doi: 10.1186/1477-7827-10-49.
- Nunez-Calonge R, Cortes S, Gutierrez Gonzalez LM, Kireev R, Vara E, Ortega L, Caballero P, Rancan L, Tresguerres J. Oxidative stress in follicular fluid of young women with low response compared with fertile oocyte donors. Reprod Biomed Online. 2016 Apr;32(4):446-56. doi: 10.1016/j.rbmo.2015.12.010. Epub 2016 Jan 14.
- Dumesic DA, Meldrum DR, Katz-Jaffe MG, Krisher RL, Schoolcraft WB. Oocyte environment: follicular fluid and cumulus cells are critical for oocyte health. Fertil Steril. 2015 Feb;103(2):303-16. doi: 10.1016/j.fertnstert.2014.11.015. Epub 2014 Dec 10.
- Wu YT, Tang L, Cai J, Lu XE, Xu J, Zhu XM, Luo Q, Huang HF. High bone morphogenetic protein-15 level in follicular fluid is associated with high quality oocyte and subsequent embryonic development. Hum Reprod. 2007 Jun;22(6):1526-31. doi: 10.1093/humrep/dem029. Epub 2007 Mar 8.
- Gode F, Gulekli B, Dogan E, Korhan P, Dogan S, Bige O, Cimrin D, Atabey N. Influence of follicular fluid GDF9 and BMP15 on embryo quality. Fertil Steril. 2011 Jun;95(7):2274-8. doi: 10.1016/j.fertnstert.2011.03.045. Epub 2011 Apr 15.
- Liu N, Ma Y, Li R, Jin H, Li M, Huang X, Feng HL, Qiao J. Comparison of follicular fluid amphiregulin and EGF concentrations in patients undergoing IVF with different stimulation protocols. Endocrine. 2012 Dec;42(3):708-16. doi: 10.1007/s12020-012-9706-z. Epub 2012 Jun 8.
- Bergandi L, Basso G, Evangelista F, Canosa S, Dalmasso P, Aldieri E, Revelli A, Benedetto C, Ghigo D. Inducible nitric oxide synthase and heme oxygenase 1 are expressed in human cumulus cells and may be used as biomarkers of oocyte competence. Reprod Sci. 2014 Nov;21(11):1370-7. doi: 10.1177/1933719114525268. Epub 2014 Mar 7.
- Donabela FC, Meola J, Padovan CC, de Paz CC, Navarro PA. Higher SOD1 Gene Expression in Cumulus Cells From Infertile Women With Moderate and Severe Endometriosis. Reprod Sci. 2015 Nov;22(11):1452-60. doi: 10.1177/1933719115585146. Epub 2015 May 6.
Dates d'enregistrement des études
Dates principales de l'étude
Début de l'étude (Anticipé)
Achèvement primaire (Anticipé)
Achèvement de l'étude (Anticipé)
Dates d'inscription aux études
Première soumission
Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité
Première publication (Réel)
Mises à jour des dossiers d'étude
Dernière mise à jour publiée (Réel)
Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité
Dernière vérification
Plus d'information
Termes liés à cette étude
Mots clés
Autres numéros d'identification d'étude
- RA60/041
- Med Chula IRB No.688/59 (Autre identifiant: Faculty of Medicine,Chulalongkorn university)
Plan pour les données individuelles des participants (IPD)
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