Ekspresja genów związana ze stresem oksydacyjnym w komórkach wzgórka wśród osób z niską reakcją

Słaba odpowiedź na kontrolowaną hiperstymulację jajników (mniej niż 5 pobranych komórek jajowych) jest problemem niektórych par leczonych z powodu niepłodności. Badania wykazały, że wskaźnik sukcesu w leczeniu tych pacjentów jest niższy niż w grupie normalnej odpowiedzi. Wśród wielu czynników przyczyniających się do niskiej odpowiedzi podejrzewa się, że stres oksydacyjny jest zaangażowany w nieprawidłowe funkcjonowanie środowiska mieszków włosowych i dojrzewanie oocytów. Jednak bezpośredniego związku między funkcją oksydacyjną a funkcją oocytu nie można badać ze względów etycznych, dlatego w wielu badaniach zamiast tego badano otaczające środowisko oocytu, takie jak komórka wzgórka i płyn pęcherzykowy.

Celem naszego badania jest zbadanie różnic w poziomie ekspresji genów związanych ze stresem oksydacyjnym oraz biomarkerów kompetencji oocytów wśród osób z niską i prawidłową odpowiedzią. W przypadku ekspresji genów związanych ze stresem oksydacyjnym w komórce wzgórka zmierzymy ekspresję mRNA metodą ilościowego PCR dla dysmutazy nadtlenkowej 1 (SOD1), SOD2, peroksydazy glutationowej (GPX) i indukowalnej syntazy tlenku azotu (iNOS). W przypadku biomarkerów kompetentnych dla oocytów wykorzystamy technikę ELISA do pomiaru poziomu GDF(, BMP15, amfireguliny i CoQ10 w płynie pęcherzykowym.

Obliczenia wielkości próby przeprowadzono na podstawie danych z badania przeprowadzonego przez Donnabela i wsp., którzy stwierdzili, że średnia ekspresja genu SOD w grupie kontrolnej wynosiła 2,06 2-ΔΔCT (SD = 0,53). Zastosowano wzór do porównania dwóch różnych średnich z oczekiwaniem, że grupa z niską odpowiedzią będzie miała niższą ekspresję genu SOD o 20%.:

n/grupa = 2(Z α/2 + Z β)2 σ2 / (X̅ 1- X̅ 2)2

α = 0,05 , β = 0,2 Z α/2 = Z0,05/2 = 1,96 (dwa ogony) Z β = Z0,8 = 0,84

Średnia w grupie 1 (X̅ 1) = 2,06, SD. w grupie 1 (σ₁) = 0,53 Średnia w grupie 2 (X̅ 2) = 1,64, SD. w grupie 2 (σ₂)= 0,53 Wielkość próby: Grupa 1 (n₁) = 25, Grupa 2 (n₂) = 25 Całkowita liczba to 56 pacjentów (dodano 10% za możliwą utratę danych)

Analiza statystyczna

1. Średnia i odchylenie standardowe zostaną użyte dla danych opisowych.
2. Test U Manna-Whitneya, test t dla niesparowanych par i chi-kwadrat będą stosowane odpowiednio
3. wartość p mniejsza niż 0,05 jest uważana za istotną statystycznie.