Expressão gênica relacionada ao estresse oxidativo em células cumulus entre pessoas com baixa resposta

A baixa resposta à hiperestimulação ovariana controlada (menos de 5 oócitos recuperados) é um problema em alguns casais que recebem tratamento para infertilidade. Estudos mostraram que a taxa de sucesso no tratamento para esses pacientes é menor do que o grupo de resposta normal. Entre muitos fatores que contribuem para a baixa resposta, o estresse oxidativo é suspeito de estar envolvido no mau funcionamento do ambiente folicular e na maturação do oócito. No entanto, a relação direta entre a função oxidativa e oocitária não pode ser estudada devido a preocupações éticas; muitos estudos estudaram o ambiente circundante do oócito, como células do cumulus e fluido folicular.

Em nosso estudo, pretendemos estudar a diferença no nível de expressão gênica relacionada ao estresse oxidativo e biomarcadores de competência oocitária entre respondedores baixos e respondedores normais. Para a expressão gênica relacionada ao estresse oxidativo da célula do cumulus, mediremos a expressão de mRNA por PCR quantitativo para Superóxido dismutase 1 (SOD1), SOD2, Glutationa peroxidase (GPX) e óxido nítrico sintase induzível (iNOS). Para biomarcadores oocitários competentes, usaremos a técnica de ELISA para medir o nível de GDF(, BMP15, Anfirregulina e CoQ10 no fluido folicular.

O cálculo do tamanho da amostra foi feito com dados do estudo realizado por Donnabela et al , que descobriu que a expressão média do gene SOD no grupo controle foi de 2,06 2-Δ ΔCT (DP = 0,53) . A fórmula para comparar duas médias diferentes foi usada com a expectativa de que o grupo de baixa resposta teria menor expressão do gene SOD em 20%.:

n/grupo = 2(Z α/2 + Z β)2 σ2 / (X̅ 1- X̅ 2)2

α = 0,05 , β = 0,2 Z α/2 = Z0,05/2 = 1,96 (duas caudas) Z β = Z0,8 = 0,84

Média no grupo1 (X̅ 1) = 2,06, DP. no grupo1 (σ₁) = 0,53 Média no grupo2 (X̅ 2) = 1,64, SD. no grupo2 (σ₂)= 0,53 Tamanho da amostra: Grupo1 (n₁) = 25, Grupo2 (n₂) = 25 O número total é de 56 pacientes (adicionado 10% para possível perda de dados)

Análise estatística

1. A média e o desvio padrão serão usados ​​para dados descritivos.
2. O teste U de Mann-Whitney, o teste t não pareado e o qui-quadrado serão usados ​​conforme apropriado
3. valor de p inferior a 0,05 é considerado estatisticamente significativo.