Imunologický profil rakoviny peritonea

1. POZADÍ:

   Interakce nádor-hostitel zahrnuje inaktivaci imunologického rozpoznávání maligních buněk mechanismem, který ještě není zcela objasněn. Studie aneuplodity na buňkách z různých metastatických míst prokazují zvýšenou heterogenitu v závislosti na metastatickém místě (Kimball 1997). To naznačuje, že fenotypicky odlišné buněčné populace jsou zodpovědné za různé metastázy a mohou vykazovat různou citlivost/rezistenci na léčbu. Kitayama (2015) studoval poměr lymfocytů k epiteliálním buňkám v peritoneální dutině, ale tento poměr použil pouze jako marker nádorové zátěže a nevztahoval jej k perioperačnímu výsledku.

   Vyšetřovatelé klinicky pozorovali odlišné chování peritoneálních metastáz ve srovnání s metastázami lokalizovanými na jiných místech těla (Franko 2012, Klaver 2012, Franko 2016). Předpokládá se, že interakce mezi nádorem a hostitelem a odpověď hostitele na léčbu souvisí s morbiditou související s léčbou, časnou vs. opožděnou recidivou a celkovým přežitím.

   Existuje omezená literatura a výzkumy zkoumající imunologický profil intraperitoneální chemoterapie a její vztah k morbiditě a budoucím metastatickým lokalizacím. Proto jsou nezbytné další znalosti biologie různých peritoneálních povrchových metastatických onemocnění. To s dalším výzkumem může vést ke specifickým terapiím.

2. CÍLE:

   Zjistit imunologický profil peritoneální dutiny a jeho vztah k okamžitému pooperačnímu výsledku (morbidita nebo léčba) a dlouhodobému výsledku (doba do recidivy a přežití).

3. STUDIJNÍ POPULACE:

   Pacienti s peritoneální karcinomatózou podstupující intraperitoneální chemoterapii.

   3.1 Kritéria vyloučení: Ve věku do 18 let, těhotné pacientky, neschopné poskytnout souhlas.

4. METODY NÁBORU PŘEDMĚTU:

   Všichni pacienti plánovaní podstoupit cytoredukční výkon pro peritoneální karcinomatózu v Mercy Medical Center v Des Moines, IA (MMC). Tato studie bude nabídnuta během předoperační ordinace nebo návštěvy v nemocnici Dr. Frankem nebo Dr. Goldmanem.

5. INFORMOVANÝ SOUHLAS:

   Připojený

6. VÝZKUMNÉ POSTUPY:

   Budou odebrány a analyzovány kapalné vzorky. Odebereme ascites, peritoneální výplach, HIPEC perfuzní tekutinu. Vzorky budou analyzovány pomocí průtokové cytometrie, rutinní kapalinové cytologie a testovány na antimikrobiální vlastnosti.

   6.1 Vzorové označení:

   Bude odebrán následující vzorek peritoneální tekutiny:

   A - vymytí ascitu nebo peritoneálního fyziologického roztoku na začátku případu B - tekutina HIPEC po předehřátí a bezprostředně před podáním chemoterapeutika C, D, E - tekutina HIPEC po 30, 60 a 90 minutách perfuze 6.2 Průtoková cytometrie Vzorky tekutin budou Proveďte průtokovou cytometrii pro analýzu podílu CD3, CD4, CD8, CD20, CD34 pozitivních buněk.

   6.3 Cytologie Rutinní cytologie peritoneální tekutiny představuje standardní péči pro diagnostiku maligních onemocnění a bude prováděna podle obvyklého diagnostického plánu.

   6.4 Detekce antimikrobiálních vlastností Vzorky tekutin budou zavedeny do bakteriálního růstu v mikrobiologické laboratoři MMC. Bude zaznamenána inhibice růstu standardních bakteriálních kmenů (Staphylococcus aureus, Escherichia coli). Vzorky budou také odeslány na průtokovou cytologii a případně chromatografii k měření přesných koncentrací chemoterapeutické látky zbývající ve vzorcích.

   6.5 Vysokoúčinná kapalinová chromatografie Omezený počet vzorků bude analyzován pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie pro stanovení přesné koncentrace chemoterapie zbývající ve vzorku (den Hartigh 1981). Tato část výzkumu je prováděna ve spolupráci s Dr. Brianem Gentrym z Drake University. Vzorek poskytnutý pro tuto část výzkumu bude deidentifikovaný, označený datem a časem a Drakeův tým neobdrží žádné další klinické nebo demografické informace. Opětovná identifikace v MMC zůstává možná.

   Abychom uspokojili metodologické potřeby, odebereme každý případ a poskytneme 2 vzorky: Vzorek B bude roztok perfuzátu HIPEC po dokončení počátečního zahřívacího období odebraný před přidáním chemoterapeutické látky. Vzorek E bude perfuzován po dokončení postupu HIPEC, u kterého se očekává, že bude obsahovat MMC. Vzorek E je hlavním výzkumným vzorkem. Objem vzorku je 5 ccm.

7. SBĚR A ANALÝZA DAT:

   Vzorek B se získá předtím, než se do roztoku přidá aktivní činidlo. Představuje malý odběrový objem 5 cm3 z přibližně 3-5 litrů HIPEC roztoku používaného v obvyklém případě. Průměrná klinická dávka nosného roztoku je 2 litry/m2 povrchu těla pacienta, což představuje < 0,2 % celkového objemu nosného roztoku HIPEC. Vzorky C & D představují stejný objem, ale jsou odebrány pacientovi s aktivní léčbou. Vzhledem k velmi malému objemu každého vzorku se neočekává žádný negativní účinek, protože celkový objem vzorku je <0,6 % celkové perfuzní tekutiny HIPEC.

   Všechny ostatní výzkumné vzorky jsou odvozeny pouze ze zbytkového chirurgického vzorku získaného výhradně pro léčebné účely. Sběr dat bude mimo jiné zahrnovat jméno pacienta, pohlaví, věk, počáteční stadium nádoru, aktuální stadium a rozsah nádoru, histologii, předchozí léčebné modality a výsledky z průtokové cytometrie, mikrobiologie a HPLC a lékařský záznam pro 60 měsíce po operaci.

8. POTENCIÁLNÍ RIZIKA:

   8.1 Rizika související s odběrem vzorků: Některé vzorky tělesných tekutin jsou odebírány na reziduálních chirurgických vzorcích odebraných pacientovi za účelem léčby (vzorky A a E) a jsou nezávislé na výzkumu. Výjimkou jsou vzorky B,C,D – jediné vzorky odebrané pacientovi pouze pro účely výzkumu. Objem každého vzorku je minuta, < 0,2 % celkového objemu perfuzátu; proto celkový objem vzorku v ≤0,6 % očekávaného objemu perfuzátu. Vzhledem k těmto dvěma faktům je rozumné předpokládat žádný očekávaný vliv na výsledek pacientů.

   8.2 Rizika spojená se ztrátou důvěrnosti Vzhledem k tomu, že jsou shromažďována identifikovatelná data, existuje potenciální riziko porušení důvěrnosti. Kvůli ochraně důvěrnosti a minimalizaci rizik budou data výzkumu uchovávána na počítačích MMC s přístupem omezeným na hlavní výzkumný tým a soubor chráněný heslem. Zákony o ochraně soukromí budou zachovány.

9. VÝZKUMNÉ MATERIÁLY, ZÁZNAMY A SOUKROMÍ:

   Výzkumná databáze bude udržována na počítačích MMC s privilegovaným přístupem omezeným na hlavní výzkumný tým a souborem chráněným heslem. Zákony o ochraně soukromí budou zachovány.

10. DŮVĚRNOST:

Žádný výzkumný vzorek nebude uložen. Všechny výzkumné vzorky budou zničeny v souladu s běžnými laboratorními postupy.

Elektronická data budou uchována až do provedení poslední analýzy. Přístup k datům bude omezen na oprávněné osoby spojené s touto studií.

Vzorky poskytnuté Drake University jsou neidentifikovatelné a tým Drake University je nemůže znovu identifikovat. Proto se neočekává žádná ztráta důvěrnosti.