Immunologisches Profil von Peritonealkrebs

1. HINTERGRUND:

   Die Tumor-Wirt-Interaktion umfasst die Inaktivierung der immunologischen Erkennung bösartiger Zellen durch einen noch nicht vollständig verstandenen Mechanismus. Aneuploditätsstudien an Zellen von verschiedenen Metastasierungsstellen zeigen eine erhöhte Heterogenität in Abhängigkeit von der Metastasierungsstelle (Kimball 1997). Dies deutet darauf hin, dass phänotypisch unterschiedliche Zellpopulationen für unterschiedliche Metastasen verantwortlich sind und eine unterschiedliche Empfindlichkeit/Resistenz gegenüber der Behandlung zeigen können. Kitayama (2015) untersuchte das Verhältnis von Lymphozyten zu Epithelzellen in der Peritonealhöhle, verwendete dieses Verhältnis jedoch nur als Marker für die Tumorlast und stellte es nicht in Beziehung zum perioperativen Ergebnis.

   Untersucher haben klinisch ein anderes Verhalten von Peritonealmetastasen im Vergleich zu Metastasen an anderen Körperstellen beobachtet (Franko 2012, Klaver 2012, Franko 2016). Es wird die Hypothese aufgestellt, dass die Tumor-Wirt-Interaktion und das Ansprechen auf die Behandlung des Wirts mit der behandlungsbedingten Morbidität, dem frühen vs. verzögerten Rezidiv und dem Gesamtüberleben zusammenhängen.

   Es gibt eine begrenzte Literatur und Forschung, die das immunologische Profil der intraperitonealen Chemotherapie und ihre Beziehung zu Morbidität und zukünftigen Metastasierungsstellen untersucht. Daher sind weitere Kenntnisse der Biologie verschiedener peritonealer Oberflächenmetastasen erforderlich. Dies kann mit zusätzlicher Forschung zu spezifischen Therapien führen.

2. ZIELE:

   Ermittlung des immunologischen Profils der Peritonealhöhle und ihrer Beziehung zum unmittelbaren postoperativen Ergebnis (Morbidität oder Behandlung) und zum langfristigen Ergebnis (Zeit bis zum Wiederauftreten und Überleben).

3. STUDIENBEVÖLKERUNG:

   Patienten mit Peritonealkarzinose, die sich einer intraperitonealen Chemotherapie unterziehen.

   3.1 Ausschlusskriterien: Unter 18 Jahren, schwangere Patientinnen, nicht einwilligungsfähige Patientinnen.

4. REKRUTIERUNGSMETHODEN DER TEILNEHMER:

   Alle Patienten, die sich einem zytoreduktiven Eingriff wegen Peritonealkarzinose im Mercy Medical Center in Des Moines, IA (MMC) unterziehen sollen. Diese Studie wird während einer präoperativen Praxis oder eines Krankenhausbesuchs von Dr. Franko oder Dr. Goldman angeboten.

5. INFORMIERTE EINWILLIGUNG:

   Beigefügt

6. FORSCHUNGSVERFAHREN:

   Flüssige Proben werden gesammelt und analysiert. Wir sammeln Aszites, Peritonealauswaschung, HIPEC-Perfusionsflüssigkeit. Die Proben werden mittels Durchflusszytometrie und routinemäßiger Flüssigkeitszytologie analysiert und auf antimikrobielle Eigenschaften getestet.

   6.1 Musterkennzeichnung:

   Die folgende Peritonealflüssigkeitsprobe wird entnommen:

   A - Aszites oder peritoneale Kochsalzauswaschung zu Beginn des Falls B - HIPEC-Flüssigkeit nach dem Vorwärmen und unmittelbar vor der Verabreichung des Chemotherapeutikums C, D, E - HIPEC-Flüssigkeit nach 30, 60 und 90 Minuten Perfusion 6.2 Durchflusszytometrie Flüssigkeitsproben werden durch Durchflusszytometrie laufen lassen, um den Anteil von CD3-, CD4-, CD8-, CD20-, CD34-positiven Zellen zu analysieren.

   6.3 Zytologie Die routinemäßige Zytologie der Peritonealflüssigkeit stellt den Behandlungsstandard für die Diagnostik bösartiger Erkrankungen dar und wird gemäß dem üblichen Diagnoseplan durchgeführt.

   6.4 Nachweis antimikrobieller Eigenschaften Flüssigkeitsproben werden dem Bakterienwachstum im mikrobiologischen Labor des MMC zugeführt. Die Wachstumshemmung von Standardbakterienstämmen (Staphylococcus aureus, Escherichia coli) wird erfasst. Die Proben werden auch zur Durchflusszytologie und möglicherweise zur Chromatographie geschickt, um die genauen Konzentrationen des in den Proben verbleibenden Chemotherapeutikums zu messen.

   6.5 Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie Eine begrenzte Anzahl von Proben wird mit Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie analysiert, um die exakte verbleibende Chemotherapiekonzentration in der Probe zu bestimmen (den Hartigh 1981). Dieser Teil der Forschung wird in Zusammenarbeit mit Dr. Brian Gentry von der Drake University durchgeführt. Die für diesen Teil der Forschung bereitgestellte Probe wird deidentifiziert, mit Datums- und Zeitstempel versehen, und Drakes Team erhält keine weiteren klinischen oder demografischen Informationen. Eine Reidentifikation bei MMC bleibt möglich.

   Um die methodischen Anforderungen zu erfüllen, werden wir in jedem Fall 2 Proben entnehmen: Probe B ist eine HIPEC-Perfusatlösung nach Abschluss der anfänglichen Aufheizphase, die vor der Zugabe des Chemotherapeutikums entnommen wird. Probe E wird nach Abschluss des HIPEC-Verfahrens perfundiert, von dem erwartet wird, dass es MMC enthält. Probe E ist die Hauptforschungsprobe. Das Probenvolumen beträgt 5 cm³.

7. DATENSAMMLUNG UND ANALYSE:

   Probe B wird erhalten, bevor das aktive Behandlungsmittel der Lösung zugeführt wird. Es stellt ein kleines Entnahmevolumen von 5 cc aus ungefähr 3-5 Liter HIPEC-Lösung dar, die normalerweise verwendet wird. Die durchschnittliche klinische Dosierung der Trägerlösung beträgt 2 Liter/m2 der Körperoberfläche des Patienten und entspricht somit < 0,2 % des Gesamtvolumens der HIPEC-Trägerlösung. Die Proben C und D stellen das gleiche Volumen dar, wurden jedoch einem Patienten mit aktiver Behandlung entnommen. Bei einem sehr kleinen Volumen jeder Probe ist kein negativer Effekt zu erwarten, da das gesamte Probenvolumen <0,6 % der gesamten HIPEC-Perfusionsflüssigkeit beträgt.

   Alle anderen Forschungsproben stammen ausschließlich aus chirurgischen Restproben, die ausschließlich zu Behandlungszwecken gewonnen wurden. Die Datenerhebung umfasst unter anderem Patientenname, Geschlecht, Alter, anfängliches Tumorstadium, aktuelles Tumorstadium und -ausmaß, Histologie, vorherige Behandlungsmodalitäten und Ergebnisse aus Durchflusszytometrie, Mikrobiologie und HPLC sowie Krankenakten für 60 Monate nach der Operation.

8. MÖGLICHE RISIKEN:

   8.1 Risiken im Zusammenhang mit der Probenahme: Einige Körperflüssigkeitsproben werden von chirurgischen Restproben entnommen, die dem Patienten zu Behandlungszwecken entnommen wurden (Proben A und E), und sind unabhängig von der Forschung. Die Ausnahme bilden die Proben B, C, D – die einzigen Proben, die dem Patienten nur zu Forschungszwecken entnommen wurden. Das Volumen jeder Probe ist winzig, < 0,2 % des gesamten Perfusatvolumens; daher Gesamtprobenahmevolumen in ≤0,6 % erwartetem Perfusatvolumen. Angesichts dieser beiden Tatsachen ist es vernünftig anzunehmen, dass kein Einfluss auf das Outcome der Patienten zu erwarten ist.

   8.2 Risiken im Zusammenhang mit dem Verlust der Vertraulichkeit Da identifizierbare Daten gesammelt werden, besteht ein potenzielles Risiko der Verletzung der Vertraulichkeit. Um die Vertraulichkeit zu wahren und das Risiko zu minimieren, werden Forschungsdaten auf MMC-Computern gespeichert, wobei der Zugriff auf das Kernforschungsteam und eine passwortgeschützte Datei beschränkt ist. Datenschutzgesetze werden eingehalten.

9. FORSCHUNGSMATERIALIEN, AUFZEICHNUNGEN UND DATENSCHUTZ:

   Die Forschungsdatenbank wird auf MMC-Computern mit privilegiertem Zugriff auf das Kernforschungsteam und eine passwortgeschützte Datei verwaltet. Datenschutzgesetze werden eingehalten.

10. VERTRAULICHKEIT:

Es werden keine Forschungsexemplare gelagert. Alle Forschungsproben werden gemäß den üblichen Laborverfahren vernichtet.

Elektronische Daten werden bis zur letzten Analyse aufbewahrt. Der Zugriff auf die Daten ist auf autorisiertes Personal beschränkt, das mit dieser Studie in Verbindung steht.

Die der Drake University zur Verfügung gestellten Proben werden anonymisiert und können vom Team der Drake University nicht erneut identifiziert werden. Daher ist dort kein Vertraulichkeitsverlust zu erwarten.