Profilo immunologico del cancro peritoneale

1. SFONDO:

   L'interazione tumore-ospite include l'inattivazione del riconoscimento immunologico delle cellule maligne mediante un meccanismo ancora non del tutto compreso. Studi di aneuplodità su cellule provenienti da diversi siti metastatici dimostrano una maggiore eterogeneità a seconda del sito metastatico (Kimball 1997). Ciò suggerisce che popolazioni cellulari fenotipicamente diverse sono responsabili di diverse metastasi e possono dimostrare sensibilità/resistenza diversa al trattamento. Kitayama (2015) ha studiato il rapporto tra linfociti e cellule epiteliali nella cavità peritoneale, ma ha utilizzato questo rapporto solo come indicatore del carico tumorale e non lo ha messo in relazione con l'esito perioperatorio.

   I ricercatori hanno osservato clinicamente un diverso comportamento delle metastasi peritoneali rispetto a quelle localizzate in altri siti corporei (Franko 2012, Klaver 2012, Franko 2016). Si ipotizza che l'interazione tumore-ospite e la risposta ospite-trattamento siano correlate alla morbilità correlata al trattamento, alla recidiva precoce o ritardata e alla sopravvivenza globale.

   Esiste una letteratura e una ricerca limitate che esaminano il profilo immunologico della chemioterapia intraperitoneale e la sua relazione con la morbilità e le future sedi metastatiche. Pertanto, è necessaria un'ulteriore conoscenza della biologia delle diverse malattie metastatiche della superficie peritoneale. Questo, con ulteriori ricerche, può portare a terapie specifiche.

2. OBIETTIVI:

   Per accertare il profilo immunologico della cavità peritoneale e la sua relazione con l'esito postoperatorio immediato (morbilità o trattamento) e l'esito a lungo termine (tempo alla recidiva e sopravvivenza).

3. POPOLAZIONE STUDIO:

   Pazienti con carcinomatosi peritoneale sottoposti a chemioterapia intraperitoneale.

   3.1 Criteri di esclusione: Minori di 18 anni, pazienti in stato di gravidanza, coloro che non sono in grado di fornire il consenso.

4. MODALITÀ DI ASSUNZIONE DEI SOGGETTI:

   Tutti i pazienti programmati per sottoporsi a procedura citoriduttiva per carcinomatosi peritoneale presso il Mercy Medical Center di Des Moines, IA (MMC). Questo studio sarà offerto durante un ufficio preoperatorio o una visita in ospedale dal dottor Franko o dal dottor Goldman.

5. CONSENSO INFORMATO:

   Allegato

6. PROCEDURE DI RICERCA:

   I campioni liquidi saranno raccolti e analizzati. Raccoglieremo ascite, lavaggio peritoneale, fluido di perfusione HIPEC. I campioni saranno analizzati mediante citometria a flusso, citologia fluida di routine e testati per le proprietà antimicrobiche.

   6.1 Etichettatura del campione:

   Verrà raccolto il seguente campione di fluido peritoneale:

   A - ascite o soluzione salina peritoneale all'inizio del caso B - fluido HIPEC dopo il preriscaldamento e immediatamente prima della somministrazione dell'agente chemioterapico C, D, E - fluido HIPEC a 30, 60 e 90 minuti di perfusione 6.2 Citometria a flusso I campioni di fluido essere eseguito attraverso la citometria a flusso per analizzare la proporzione di cellule CD3, CD4, CD8, CD20, CD34 positive.

   6.3 Citologia La citologia di routine del liquido peritoneale rappresenta lo standard di cura per la diagnostica delle malattie maligne e sarà condotta secondo il consueto piano diagnostico.

   6.4 Rilevazione delle proprietà antimicrobiche I campioni di fluido saranno introdotti alla crescita batterica nel laboratorio di microbiologia presso MMC. Verrà registrata l'inibizione della crescita di ceppi batterici standard (Staphylococcus aureus, Escherichia coli). I campioni verranno inoltre inviati per citologia a flusso ed eventualmente cromatografia per misurare le concentrazioni esatte di agente chemioterapico rimanente nei campioni.

   6.5 Cromatografia liquida ad alta prestazione Un numero limitato di campioni sarà analizzato con cromatografia liquida ad alta prestazione per determinare l'esatta concentrazione di chemioterapia rimanente nel campione (den Hartigh 1981). Questa parte della ricerca è condotta in collaborazione con il Dr. Brian Gentry della Drake University. Il campione fornito per questa parte della ricerca sarà deidentificato, contrassegnato con data e ora e il team di Drake non riceverà altre informazioni cliniche o demografiche. La reidentificazione presso MMC rimane possibile.

   Per soddisfare le esigenze metodologiche, raccoglieremo ogni caso fornendo 2 campioni: Il campione B sarà una soluzione di perfusato HIPEC al completamento del periodo di riscaldamento iniziale raccolto prima dell'aggiunta dell'agente chemioterapico. Il campione E sarà perfusato al completamento della procedura HIPEC che dovrebbe contenere MMC. Il campione E è il principale campione di ricerca. Il volume del campione è di 5 cc.

7. RACCOLTA E ANALISI DEI DATI:

   Il campione B viene ottenuto prima che l'agente di trattamento attivo venga fornito alla soluzione. Rappresenta un piccolo volume di prelievo di 5 cc su circa 3-5 litri di soluzione HIPEC utilizzata normalmente. Il dosaggio clinico medio della soluzione di trasporto è di 2 litri/m2 di superficie corporea del paziente, quindi rappresenta <0,2% del volume totale della soluzione di trasporto HIPEC. I campioni C e D rappresentano lo stesso volume, ma vengono prelevati dal paziente con trattamento attivo. Dato un volume molto piccolo di ciascun campione non è previsto alcun effetto negativo, poiché il volume totale del campione è <0,6% del fluido di perfusione HIPEC totale.

   Tutti gli altri campioni di ricerca derivano solo da campioni chirurgici residui ottenuti esclusivamente per scopi terapeutici. La raccolta dei dati includerà, a titolo esemplificativo ma non esaustivo, nome del paziente, sesso, età, stadio iniziale del tumore, stadio ed estensione del tumore attuale, istologia, modalità di trattamento precedenti e risultati di citometria a flusso, microbiologia e HPLC e cartella clinica per 60 mesi dopo l'intervento.

8. RISCHI POTENZIALI:

   8.1 Rischi correlati al campionamento: alcuni campioni di fluidi corporei vengono raccolti su campioni chirurgici residui rimossi dal paziente a scopo terapeutico (campioni A ed E) e sono indipendenti dalla ricerca. L'eccezione sono i campioni B, C, D, gli unici campioni rimossi dal paziente solo a scopo di ricerca. Il volume di ciascun campione è minuto, <0,2% del volume totale del perfusato; pertanto volume totale di campionamento in volume di perfusato previsto ≤0,6%. Alla luce di questi due fatti, è ragionevole presumere che non vi sia alcuna influenza attesa sull'esito dei pazienti.

   8.2 Rischi relativi alla perdita di riservatezza Poiché vengono raccolti dati identificabili, esiste un potenziale rischio di violazione della riservatezza. Per proteggere la riservatezza e ridurre al minimo i rischi, i dati di ricerca verranno conservati su computer MMC con accesso limitato al team di ricerca principale e file protetti da password. Saranno mantenute le leggi sulla privacy.

9. MATERIALI DI RICERCA, RECORD E PRIVACY:

   Il database di ricerca verrà mantenuto sui computer MMC con accesso privilegiato limitato al gruppo di ricerca principale e file protetto da password. Saranno mantenute le leggi sulla privacy.

10. RISERVATEZZA:

Nessun esemplare di ricerca verrà conservato. Tutti i campioni di ricerca saranno distrutti secondo le consuete procedure di laboratorio.

I dati elettronici saranno mantenuti fino all'ultima analisi effettuata. L'accesso ai dati sarà limitato al personale autorizzato associato a questo studio.

I campioni forniti alla Drake University sono deidentificati e non possono essere nuovamente identificati dal team della Drake University. Pertanto non è prevista alcuna perdita di riservatezza.