A peritoneális rák immunológiai profilja

1. HÁTTÉR:

   A tumor-gazda kölcsönhatás magában foglalja a rosszindulatú sejtek immunológiai felismerésének inaktiválását egy még nem teljesen ismert mechanizmus által. A különböző metasztatikus helyekről származó sejteken végzett aneuploditási vizsgálatok a metasztatikus helytől függően fokozott heterogenitást mutatnak (Kimball 1997). Ez arra utal, hogy fenotípusosan eltérő sejtpopulációk felelősek a különböző áttétekért, és eltérő érzékenységet/rezisztenciát mutathatnak a kezeléssel szemben. Kitayama (2015) a peritoneális üregben lévő limfociták és hámsejtek arányát vizsgálta, de ezt az arányt csak a tumorterhelés markereként használta, és nem kapcsolta össze a perioperatív kimenetelhez.

   A kutatók klinikailag megfigyelték, hogy a peritoneális metasztázisok eltérő viselkedést mutatnak a test más helyein található metasztázisokhoz képest (Franko 2012, Klaver 2012, Franko 2016). Feltételezhető, hogy a tumor-gazdaszervezet interakció és a gazda-kezelésre adott válasz összefüggésben van a kezeléssel összefüggő morbiditással, a korai vagy késleltetett kiújulással és az általános túléléssel.

   Korlátozott számú irodalom és kutatás foglalkozik az intraperitoneális kemoterápia immunológiai profiljával, valamint a morbiditással és a jövőbeni metasztatikus helyekkel való kapcsolatával. Ezért a különböző peritoneális felszíni metasztázisos betegségek biológiájának további ismerete szükséges. Ez további kutatásokkal specifikus terápiákhoz vezethet.

2. CÉLKITŰZÉSEK:

   A peritoneális üreg immunológiai profiljának és kapcsolatának a műtét utáni azonnali kimenetelhez (morbiditás vagy kezelés) és a hosszú távú kimenetelhez (a kiújulásig eltelt idő és a túlélés) való viszonyának megállapítása.

3. TANULMÁNYOSSÁG:

   Peritoneális carcinomatosisban szenvedő betegek, akik intraperitoneális kemoterápiában részesülnek.

   3.1 Kizárási kritériumok: 18 éven aluliak, terhesek, beleegyezést adni nem tudók.

4. TÉNYFELVÉTELI MÓDSZEREK:

   Valamennyi beteget peritoneális carcinomatosis miatt citoreduktív eljáráson kell átesni a Mercy Medical Centerben, Des Moines, IA (MMC). Ezt a vizsgálatot egy preoperatív rendelő vagy egy kórházi látogatás során ajánlja fel Dr. Franko vagy Dr. Goldman.

5. TÁJÉKOZTATÓ BEJELENTKEZÉS:

   Csatolt

6. KUTATÁSI ELJÁRÁSOK:

   Folyékony mintákat gyűjtenek és elemzik. Gyűjtjük az ascitest, a peritoneális kimosást, a HIPEC perfúziós folyadékot. A mintákat áramlási citometriával, rutin folyadékcitológiával elemzik, és megvizsgálják az antimikrobiális tulajdonságokat.

   6.1 Mintacímkézés:

   A következő peritoneális folyadékmintát veszik:

   A - ascites vagy peritoneális sóoldat kimosása a B eset elején - HIPEC folyadék előmelegítés után és közvetlenül a kemoterápiás szer beadása előtt C, D, E - HIPEC folyadék 30, 60 és 90 perces perfúziónál 6.2 Áramlási citometria A folyadékminták áramlási citometriával kell futtatni a CD3, CD4, CD8, CD20, CD34 pozitív sejtek arányának elemzésére.

   6.3 Citológia A peritoneális folyadék rutin citológiája a rosszindulatú betegségek diagnosztikájának standard ellátását jelenti, és a szokásos diagnosztikai terv szerint történik.

   6.4 Antimikrobiális tulajdonságok kimutatása Folyadékmintákat vezetnek be a baktériumok szaporodásához az MMC mikrobiológiai laboratóriumában. A standard baktériumtörzsek (Staphylococcus aureus, Escherichia coli) növekedésének gátlását rögzítjük. A mintákat áramlási citológiára és esetleg kromatográfiára is elküldik, hogy megmérjék a mintákban maradt kemoterápiás szer pontos koncentrációját.

   6.5 Nagy teljesítményű folyadékkromatográfia Korlátozott számú mintát elemzünk nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával, hogy meghatározzuk a mintában maradó pontos kemoterápiás koncentrációt (den Hartigh 1981). A kutatás ezen részét Dr. Brian Gentryvel együttműködve végzik a Drake Egyetemen. A kutatás ezen részéhez rendelkezésre bocsátott mintát azonosítják, dátum- és időbélyegzővel látják el, és Drake csapata nem kap semmilyen más klinikai vagy demográfiai információt. Az MMC-nél továbbra is lehetséges az újbóli azonosítás.

   A módszertani igények kielégítése érdekében minden esetben 2 mintát gyűjtünk, és 2 mintát biztosítunk: A B minta egy HIPEC perfuzátum oldat lesz a kezdeti felfűtési időszak végén, amelyet a kemoterápiás szer hozzáadása előtt gyűjtünk. A várhatóan MMC-t tartalmazó HIPEC-eljárás befejeztével az E mintát perfundáljuk. Az E minta a fő kutatási minta. A minta térfogata 5 cc.

7. ADATGYŰJTÉS ÉS ELEMZÉS:

   A B mintát az aktív kezelőszer oldatba juttatása előtt veszik. A szokásos esetben használt kb. 3-5 literes HIPEC oldatból kis, 5 cm3-es kiszívási térfogatot jelent. A hordozóoldat átlagos klinikai adagolása 2 liter/m2 a beteg testfelületére vonatkoztatva, tehát a teljes HIPEC hordozóoldat térfogatának < 0,2%-át jelenti. A C és D minta ugyanazt a térfogatot képviseli, de az aktív kezelés alatt álló betegből kivonják. Az egyes minták nagyon kis térfogata esetén nem várható negatív hatás, mivel a teljes minta térfogata <0,6% a teljes HIPEC perfúziós folyadékból.

   Az összes többi kutatási minta kizárólag kezelési célokra beszerzett maradék sebészeti mintából származik. Az adatgyűjtés kiterjed többek között a beteg nevére, nemére, életkorára, kezdeti daganatos stádiumára, jelenlegi daganatstádiumára és kiterjedésére, szövettanra, korábbi kezelési módokra, áramlási citometriás, mikrobiológiai és HPLC-eredményekre, valamint 60 éves orvosi nyilvántartásra. hónapokkal a műtét után.

8. LEHETSÉGES KOCKÁZATOK:

   8.1 A mintavétellel kapcsolatos kockázatok: Egyes testfolyadék-mintákat a betegből kezelés céljából eltávolított sebészeti maradék mintákon gyűjtenek (A és E minták), és ezek kutatástól függetlenek. Ez alól kivételt képez a B, C, D minta – az egyetlen minta, amelyet csak kutatási célból vettek ki a páciensből. Az egyes minták térfogata perc, a teljes perfuzátum térfogatának < 0,2%-a; ezért a teljes mintamennyiség ≤0,6% a várható perfuzátumtérfogatban. E két tény ismeretében ésszerű feltételezni, hogy nincs várható hatása a betegek kimenetelére.

   8.2 A titoktartás elvesztésével kapcsolatos kockázatok Az azonosítható adatok gyűjtése miatt fennáll a titoktartási kötelezettség megsértésének kockázata. A titkosság védelme és a kockázatok minimalizálása érdekében a kutatási adatokat MMC-számítógépeken tárolják, amelyekhez a fő kutatócsoport és a jelszóval védett fájl hozzáférése korlátozott. Az adatvédelmi törvényeket betartják.

9. KUTATÁSI ANYAGOK, FELVONÁSOK ÉS ADATVÉDELEM:

   A kutatási adatbázist MMC-számítógépeken tartják fenn, amelyekhez a fő kutatócsoport és jelszóval védett fájl hozzáférése korlátozott. Az adatvédelmi törvényeket betartják.

10. BIZALMASSÁG:

Kutatási mintát nem tárolunk. Minden kutatási mintát a szokásos laboratóriumi eljárásoknak megfelelően megsemmisítenek.

Az elektronikus adatokat az utolsó elemzés elvégzéséig megőrizzük. Az adatokhoz csak a tanulmányhoz kapcsolódó felhatalmazott személyzet férhet hozzá.

A Drake Egyetemnek átadott minták azonosítatlanok, és a Drake Egyetem csapata nem tudja újra azonosítani őket. Ezért nem várható titoktartási veszteség.