Immunologisk profil av peritoneal kreft

1. BAKGRUNN:

   Tumor-vert-interaksjon inkluderer inaktivering av immunologisk gjenkjennelse av ondartede celler ved en mekanisme som ennå ikke er fullt ut forstått. Aneuploditetsstudier på celler fra forskjellige metastatiske steder viser økt heterogenitet avhengig av metastatisk sted (Kimball 1997). Dette antyder at fenotypisk forskjellige cellepopulasjoner er ansvarlige for forskjellige metastaser og kan vise ulik følsomhet/motstand mot behandling. Kitayama (2015) studerte forholdet mellom lymfocytter og epitelceller i peritonealhulen, men brukte dette forholdet kun som markør for tumorbyrde og relaterte det ikke til perioperativt utfall.

   Etterforskere har klinisk observert en annen oppførsel av peritoneale metastaser sammenlignet med de som er lokalisert på andre kroppssteder (Franko 2012, Klaver 2012, Franko 2016). Det antas at tumor-vert-interaksjon og vertsbehandlingsrespons er relatert til behandlingsrelatert sykelighet, tidlig versus forsinket tilbakefall og total overlevelse.

   Det er begrenset litteratur og forskning som undersøker den immunologiske profilen til intraperitoneal kjemoterapi og dens forhold til sykelighet og fremtidige metastatiske steder. Derfor er ytterligere kunnskap om biologien til forskjellige peritonealoverflatemetastatiske sykdommer nødvendig. Dette, med ytterligere forskning, kan føre til spesifikke terapier.

2. MÅL:

   For å fastslå den immunologiske profilen til peritonealhulen og dens forhold til umiddelbar postkirurgisk utfall (sykelighet eller behandling) og langsiktig utfall (tid til tilbakefall og overlevelse).

3. STUDIEBEFOLKNING:

   Pasienter med peritoneal karsinomatose som gjennomgår intraperitoneal kjemoterapi.

   3.1 Eksklusjonskriterier: Under 18 år, gravide pasienter, de som ikke kan gi samtykke.

4. REKRUTTERINGSMETODER FOR FAGET:

   Alle pasienter skulle gjennomgå cytoreduktiv prosedyre for peritoneal karsinomatose ved Mercy Medical Center i Des Moines, IA (MMC). Denne studien vil bli tilbudt under et preoperativt kontor eller et sykehusbesøk av Dr. Franko eller Dr. Goldman.

5. INFORMERT SAMTYKKE:

   Vedlagte

6. FORSKNINGSPROSEDYRER:

   Flytende prøver vil bli samlet inn og analysert. Vi vil samle ascites, peritoneal utvasking, HIPEC perfusjonsvæske. Prøver vil bli analysert ved hjelp av flowcytometri, rutinemessig væskecytologi og testet for antimikrobielle egenskaper.

   6.1 Eksempelmerking:

   Følgende peritonealvæskeprøve vil bli samlet inn:

   A - utvasking av ascites eller peritoneal saltvann ved begynnelsen av tilfelle B - HIPEC-væske etter forvarming og rett før kjemoterapimiddeltilførsel C, D, E - HIPEC-væske ved 30, 60 og 90 minutter perfusjon 6.2 Flowcytometri Væskeprøver vil kjøres gjennom flowcytometri for å analysere andelen av CD3, CD4, CD8, CD20, CD34 positive celler.

   6.3 Cytologi Rutinemessig cytologi av peritonealvæske representerer standardbehandling for diagnostikk av malign sykdom og vil bli utført i henhold til vanlig diagnoseplan.

   6.4 Påvisning av antimikrobielle egenskaper Væskeprøver vil bli introdusert til bakterievekst i mikrobiologilaboratoriet ved MMC. Veksthemming av standard bakteriestammer (Staphylococcus aureus, Escherichia coli) vil bli registrert. Prøvene vil også bli sendt til flowcytologi og eventuelt kromatografi for å måle eksakte konsentrasjoner av kjemoterapeutisk middel som er igjen i prøvene.

   6.5 Høyytelses væskekromatografi Et begrenset antall prøver vil bli analysert med høyytelses væskekromatografi for å bestemme nøyaktig gjenværende kjemoterapikonsentrasjon i prøven (den Hartigh 1981). Denne delen av forskningen er utført i samarbeid med Dr. Brian Gentry ved Drake University. Prøver gitt for denne delen av forskningen vil bli avidentifisert, dato-tidsstemplet, og Drakes team vil ikke motta annen klinisk eller demografisk informasjon. Re-identifikasjon ved MMC er fortsatt mulig.

   For å tilfredsstille metodiske behov, vil vi samle inn hvert tilfelle vil gi 2 prøver: Prøve B vil være en HIPEC perfusatløsning ved fullføringen av den innledende oppvarmingsperioden samlet før tilsetning av kjemoterapimiddel. Prøve E vil være perfusat ved fullføring av HIPEC-prosedyre som forventes å inneholde MMC. Prøve E er det viktigste forskningsutvalget. Prøvevolum er 5 cc.

7. DATAINNSAMLING OG ANALYSE:

   Prøve B oppnås før aktivt behandlingsmiddel tilføres løsningen. Det representerer et lite uttaksvolum på 5 cc av ca. 3-5 liter HIPEC-løsning som brukes i vanlige tilfeller. Gjennomsnittlig klinisk dosering av bærerløsning er 2 liter/m2 av pasientens kroppsoverflate, og representerer derfor < 0,2 % totalt volum av HIPEC bærerløsning. Prøve C & D representerer samme volum, men trekkes fra pasient med aktiv behandling. Gitt svært lite volum av hver prøve forventes ingen negativ effekt, da totalt prøvevolum er <0,6 % total HIPEC-perfusjonsvæske.

   Alle andre forskningsprøver er kun avledet fra gjenværende kirurgiske prøver som utelukkende er oppnådd for behandlingsformål. Datainnsamling vil inkludere, men er ikke begrenset til, pasientnavn, kjønn, alder, initial tumorstadium, nåværende tumorstadium og omfang, histologi, tidligere behandlingsmodaliteter og resultater fra flowcytometri, mikrobiologi og HPLC, og medisinsk journal for 60 måneder etter operasjonen.

8. POTENSIELLE RISIKO:

   8.1 Risikoer knyttet til prøvetaking: Noen kroppsvæskeprøver samles på gjenværende kirurgiske prøver fjernet fra pasienten for behandlingsformål (prøve A og E), og er uavhengig av forskning. Unntaket er prøve B,C,D - de eneste prøvene som er fjernet fra pasienten kun for forskningsformål. Volumet av hver prøve er minutt, < 0,2 % av totalt perfusatvolum; derfor totalt prøvetakingsvolum i ≤0,6 % forventet perfusatvolum. Gitt disse to fakta er det rimelig å anta ingen forventet påvirkning på pasientenes utfall.

   8.2 Risikoer knyttet til tap av konfidensialitet Fordi identifiserbare data samles inn, er det en potensiell risiko for brudd på konfidensialitet. For å beskytte konfidensialitet og minimere risiko, vil forskningsdata bli vedlikeholdt på MMC-datamaskiner med tilgang begrenset til kjerneforskningsteamet og passordbeskyttet fil. Personvernlovgivningen vil bli opprettholdt.

9. FORSKNINGSMATERIALER, RECORDS OG PERSONVERN:

   Forskningsdatabasen vil bli vedlikeholdt på MMC-datamaskiner med privilegert tilgang begrenset til kjerneforskningsteamet og passordbeskyttet fil. Personvernlovgivningen vil bli opprettholdt.

10. KONFIDENSIALITET:

Ingen forskningsprøver vil bli lagret. Alle forskningsprøver vil bli destruert i henhold til vanlige laboratorieprosedyrer.

Elektroniske data vil bli oppbevart til siste analyse er utført. Tilgang til dataene vil være begrenset til autorisert personell tilknyttet denne studien.

Prøvene gitt til Drake University er avidentifisert og kan ikke gjenidentifiseres av Drake University-teamet. Det forventes derfor ikke tap av konfidensialitet.