Perfil Imunológico do Câncer Peritoneal

1. FUNDO:

   A interação tumor-hospedeiro inclui a inativação do reconhecimento imunológico de células malignas por um mecanismo ainda não totalmente compreendido. Estudos de aneuplodade em células de diferentes locais metastáticos demonstram heterogeneidade aumentada dependendo do local metastático (Kimball 1997). Isso sugere que populações celulares fenotipicamente diferentes são responsáveis ​​por diferentes metástases e podem demonstrar sensibilidade/resistência diferentes ao tratamento. Kitayama (2015) estudou a proporção de linfócitos para células epiteliais na cavidade peritoneal, mas usou essa proporção apenas como marcador da carga tumoral e não a relacionou com o resultado perioperatório.

   Os investigadores observaram clinicamente um comportamento diferente das metástases peritoneais em comparação com aquelas localizadas em outros locais do corpo (Franko 2012, Klaver 2012, Franko 2016). Supõe-se que a interação tumor-hospedeiro e a resposta hospedeiro-tratamento estejam relacionadas à morbidade relacionada ao tratamento, recorrência precoce versus tardia e sobrevida geral.

   Há uma literatura limitada e pesquisas que examinam o perfil imunológico da quimioterapia intraperitoneal e sua relação com a morbidade e futuros locais metastáticos. Portanto, é necessário um maior conhecimento da biologia de diferentes doenças metastáticas da superfície peritoneal. Isso, com pesquisas adicionais, pode levar a terapias específicas.

2. OBJETIVOS:

   Determinar o perfil imunológico da cavidade peritoneal e sua relação com o resultado pós-operatório imediato (morbidade ou tratamento) e o resultado a longo prazo (tempo de recorrência e sobrevida).

3. POPULAÇÃO DO ESTUDO:

   Pacientes com carcinomatose peritoneal submetidos a quimioterapia intraperitoneal.

   3.1 Critérios de exclusão: menores de 18 anos, gestantes, impossibilitadas de dar consentimento.

4. MÉTODOS DE RECRUTAMENTO DE ASSUNTOS:

   Todos os pacientes programados para passar por procedimento citorredutor para carcinomatose peritoneal no Mercy Medical Center em Des Moines, IA (MMC). Este estudo será oferecido durante um consultório pré-operatório ou uma visita ao hospital pelo Dr. Franko ou pelo Dr. Goldman.

5. CONSENTIMENTO INFORMADO:

   Apegado

6. PROCEDIMENTOS DE PESQUISA:

   Amostras líquidas serão coletadas e analisadas. Vamos coletar ascite, lavagem peritoneal, fluido de perfusão HIPEC. As amostras serão analisadas por citometria de fluxo, citologia fluida de rotina e testadas para propriedades antimicrobianas.

   6.1 Rotulagem da amostra:

   A seguinte amostra de líquido peritoneal será coletada:

   A - lavagem de ascite ou solução salina peritoneal no início do caso B - fluido HIPEC após o pré-aquecimento e imediatamente antes do fornecimento do agente quimioterápico C, D, E - fluido HIPEC aos 30, 60 e 90 minutos de perfusão 6.2 Citometria de fluxo As amostras de fluidos serão ser executado através de citometria de fluxo para analisar a proporção de células CD3, CD4, CD8, CD20, CD34 positivas.

   6.3 Citologia A citologia de rotina do líquido peritoneal representa o tratamento padrão para o diagnóstico de doenças malignas e será realizada de acordo com o plano de diagnóstico usual.

   6.4 Detecção de propriedades antimicrobianas Amostras de fluidos serão introduzidas para crescimento bacteriano no laboratório de microbiologia do MMC. A inibição do crescimento de cepas bacterianas padrão (Staphylococcus aureus, Escherichia coli) será registrada. As amostras também serão enviadas para citologia de fluxo e possivelmente cromatografia para medir as concentrações exatas do agente quimioterápico remanescente nas amostras.

   6.5 Cromatografia líquida de alta eficiência Um número limitado de amostras será analisado com cromatografia líquida de alta eficiência para determinar a concentração exata de quimioterapia remanescente na amostra (den Hartigh 1981). Esta parte da pesquisa é realizada em colaboração com o Dr. Brian Gentry na Drake University. A amostra fornecida para esta parte da pesquisa será desidentificada, com carimbo de data e hora, e a equipe de Drake não receberá nenhuma outra informação clínica ou demográfica. A reidentificação no MMC continua sendo possível.

   Para satisfazer as necessidades metodológicas, coletaremos cada caso e forneceremos 2 amostras: A amostra B será uma solução de perfusato HIPEC após a conclusão do período inicial de aquecimento coletada antes da adição do agente quimioterápico. A amostra E será perfundida na conclusão do procedimento HIPEC que deve conter MMC. A amostra E é a amostra principal da pesquisa. O volume da amostra é de 5 cc.

7. COLETA E ANÁLISE DE DADOS:

   A amostra B é obtida antes do agente de tratamento ativo ser fornecido à solução. Representa um pequeno volume de retirada de 5 cc de aproximadamente 3-5 litros de solução HIPEC usada no caso usual. A dosagem clínica média da solução carreadora é de 2 litros/m2 da área de superfície corporal do paciente, representando, portanto, < 0,2% do volume total da solução carreadora HIPEC. As amostras C e D representam o mesmo volume, mas são retiradas de pacientes com tratamento ativo. Dado um volume muito pequeno de cada amostra, nenhum efeito negativo é esperado, pois o volume total da amostra é <0,6% do fluido de perfusão HIPEC total.

   Todas as outras amostras de pesquisa são derivadas apenas de espécimes cirúrgicos residuais obtidos exclusivamente para fins de tratamento. A coleta de dados incluirá, entre outros, nome do paciente, sexo, idade, estágio inicial do tumor, estágio atual e extensão do tumor, histologia, modalidades de tratamento anteriores e resultados de citometria de fluxo, microbiologia e HPLC, e registro médico de 60 meses após a cirurgia.

8. RISCOS POTENCIAIS:

   8.1 Riscos relacionados à amostragem: Algumas amostras de fluidos corporais são coletadas em espécimes cirúrgicos residuais removidos do paciente para fins de tratamento (amostras A e E) e são independentes de pesquisa. A exceção são as Amostras B,C,D - as únicas amostras removidas do paciente apenas para fins de pesquisa. O volume de cada amostra é minúsculo, < 0,2% do volume total de perfusato; portanto, o volume total de amostragem em ≤0,6% do volume de perfusato esperado. Dados esses dois fatos, é razoável supor que não haja influência esperada no resultado dos pacientes.

   8.2 Riscos relacionados à perda de confidencialidade Como os dados identificáveis ​​são coletados, existe um risco potencial de quebra de confidencialidade. Para proteger a confidencialidade e minimizar os riscos, os dados da pesquisa serão mantidos nos computadores do MMC com acesso restrito à equipe principal de pesquisa e arquivo protegido por senha. As leis de privacidade serão mantidas.

9. MATERIAIS DE PESQUISA, REGISTROS E PRIVACIDADE:

   O banco de dados da pesquisa será mantido em computadores do MMC com acesso privilegiado restrito à equipe principal de pesquisa e arquivo protegido por senha. As leis de privacidade serão mantidas.

10. CONFIDENCIALIDADE:

Nenhum espécime de pesquisa será armazenado. Todos os espécimes de pesquisa serão destruídos de acordo com os procedimentos usuais de laboratório.

Os dados eletrônicos serão mantidos até que a última análise seja realizada. O acesso aos dados será limitado ao pessoal autorizado associado a este estudo.

As amostras fornecidas à Drake University são desidentificadas e não podem ser reidentificadas pela equipe da Drake University. Portanto, nenhuma perda de confidencialidade é esperada.