Studium exosomové proteomiky a hemodynamiky v sepsi
Pozorovací studie exosomové proteomiky uvolněné z kardiopulmonálních orgánů a hemodynamických parametrů při sepsi
Přehled studie
Postavení
Podmínky
Intervence / Léčba
Detailní popis
Východiska: Sepse, definovaná jako infekce s prokázanou systémovou infekcí, je i nadále zdrojem značné morbidity a mortality. Mnoho modelů zvířecí sepse zjistilo, že sepse vyvolává selhání více orgánů. Autofagie, apoptóza může zahrnovat proces vícečetného orgánového selhání souvisejícího se sepsí. Proteomické studie založené na hmotnostní spektrometrii v klinických populacích a na zvířecích modelech hlodavců a savců začaly objevením mnoha nových biomarkerů sepse. Esoxomy nalezené v krvi nebo moči představovaly signál autofagie a apoptózy. Na druhé straně, pulzní obrysový srdeční výdej (PiCCO) může vypočítat hemodynamické parametry, které byly použity pro hodnocení u kardiopulmonálního selhání sepse.
Cíle studie: Tento výzkum bude první studií pro exosomy purifikované v krvi a moči od septických pacientů, kteří měli selhání více orgánů. Proteomické studie v exozomech ze vzorků krve nebo moči. Analyzujte biomarkery exozomů související s autofágy a apoptózou pomocí bioinformatiky. Najít korelace mezi biomarkery exozomů a hemodynamickými parametry.
Materiál a metody: Celkem bude zahrnuto 30 pacientů se sepsí, septickým šokem nebo mnohočetným orgánovým selháním, z toho 15 septických pacientů mělo kardiopulmonální orgánové selhání, ostatní nikoli. Všichni pacienti zahrnuti a klasifikováni podle kritérií kampaně přežívající sepse, také léčeni podle pokynů kampaně pro přežití sepse. Údaje budou shromažďovány od ledna 2016 do prosince 2016. Exosom bude izolován a purifikován ultracentrifugací v gradientu sacharózy. Purifikace magnetickými kuličkami, 2D gelová elektroforéza a MALDI-TOF budou použity k analýze proteomiky exosomu v moči nebo krvi septických pacientů. K prokázání proteinů nalezených proteomikou bude proveden Western blotting. Srdeční výdej s pulzním obrysem monitoroval kontraktilitu srdce, parametry enddiastolického objemu a parametry plicní vody. Konečně najít korelace mezi biomarkery specifického pro exosom a biomarkery autofagie-apoptózy a hemodynamickými parametry.
Možný účinek: Bude prováděno systematické stanovení exosomové proteomiky v krvi a moči od septických pacientů, kteří měli nebo neměli víceorgánové selhání. Biomarkery autofagie-apoptózy v exozomech budou detekovány a korelovány s hemodynamickými parametry, aby bylo možné posoudit specifické orgánové selhání v sepsi.
Typ studie
Zápis (Aktuální)
Kontakty a umístění
Studijní místa
-
-
-
Taipei, Tchaj-wan, 23142
- Division of Pulmonary and Critical Care Medicine, Department of Internal Medicine, Taipei Tzu Chi Hospital, Buddhist Tzu Chi Medical Foundation
-
-
Kritéria účasti
Kritéria způsobilosti
Věk způsobilý ke studiu
Přijímá zdravé dobrovolníky
Pohlaví způsobilá ke studiu
Metoda odběru vzorků
Studijní populace
Sepse byla definována jako život ohrožující orgánová dysfunkce v důsledku dysregulované reakce hostitele na infekci.
Pacient se sepsí, který byl přijat na JIP. Byla nastavena hemodynamika PiCCO
Popis
Kritéria pro zařazení:
- Pacienti se sepsí, kteří jsou přijati na JIP
- Diagnostická kritéria sepse: akutní změna celkového skóre SOFA ≥ 2 body přisuzovaná infekci
- Pulzní indikátor kontinuálního monitoru srdečního výdeje (PiCCO) je akceptován pacientem pro hemodynamické monitorování
Kritéria vyloučení:
- Pacienti s akutními změnami SOFA < 2 body jsou vyloučeni
- auria, nelze sbírat moč
- Předchozí kardiopulmonální komorbidita. Chronické respirační selhání se závislostí na ventilátoru a chronické srdeční selhání.
Studijní plán
Jak je studie koncipována?
Detaily designu
Kohorty a intervence
Skupina / kohorta |
Intervence / Léčba |
|---|---|
|
Sepse s kardiopulmonálním selháním
Pacient se sepsí a také postižením dýchání a srdce, potvrzeno hemodynamickými parametry
|
Srdeční výdej s pulzním obrysem monitoroval kontraktilitu srdce, parametry enddiastolického objemu a parametry plicní vody.
|
|
Sepse bez kardiopulmonálního selhání
Pacient se sepsí bez postižení dýchání a srdce
|
Srdeční výdej s pulzním obrysem monitoroval kontraktilitu srdce, parametry enddiastolického objemu a parametry plicní vody.
|
Co je měření studie?
Primární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Změna hemodynamických parametrů (kontraktilita srdce: CFI)
Časové okno: Základní linie, 6 hodin
|
Změna od výchozího indexu srdeční funkce (CFI; L/min) po 6 hodinách.
Index srdeční funkce (CFI; L/min) bude vypočítán termodiluční metodou.
Zařízení PiCCO2 (Pulsion Medical Systems, Mnichov, Německo)
|
Základní linie, 6 hodin
|
|
Změna hemodynamických parametrů (předpětí: GEDI)
Časové okno: Základní linie, 6 hodin
|
Změna od výchozího globálního end-diastolického indexu (GEDI; ml/m2) po 6 hodinách.
Globální end-diastolický index (GEDI; ml/m2) bude vypočítán termodiluční metodou.
Zařízení PiCCO2 (Pulsion Medical Systems, Mnichov, Německo).
|
Základní linie, 6 hodin
|
|
Změna hemodynamických parametrů (afterload: SVRI)
Časové okno: Základní linie, 6 hodin
|
Změna od výchozího indexu systémové vaskulární rezistence (SVRI; dynes x sec x cm-5/m2) po 6 hodinách.
Index systémové vaskulární rezistence (SVRI; dynes x sec x cm-5/m2) bude vypočítán termodiluční metodou.
Zařízení PiCCO2 (Pulsion Medical Systems, Mnichov, Německo).
|
Základní linie, 6 hodin
|
|
Změna hemodynamických parametrů (reakce na tekutiny: SVV)
Časové okno: Výchozí stav, 6 hodin, jeden den a 3 dny
|
Změna oproti základnímu kolísání zdvihového objemu (SVV, %) po 6 hodinách.
Variace zdvihového objemu (SVV, %) bude vypočítána spontánně zařízením PiCCO2 (Pulsion Medical Systems, Mnichov, Německo).
|
Výchozí stav, 6 hodin, jeden den a 3 dny
|
|
Změna hemodynamických parametrů (plicní voda: ELWI)
Časové okno: Základní linie, 6 hodin
|
Změna od výchozího indexu extravaskulární plicní vody (EVLWI; ml/kg) po 6 hodinách.
Index extravaskulární plicní vody (EVLWI; ml/kg) bude vypočítán zařízením PiCCO (Pulsion Medical Systems, Mnichov, Německo).
EVLWI znamená celkovou vodu v plicní tkáni, zvyšuje se u plicního edému nebo ARDS.
PVPI znamená permeabilitu plicních cév a je vždy vysoká u ARDS (syndrom akutní respirační tísně)
|
Základní linie, 6 hodin
|
|
Změna hemodynamických parametrů (propustnost plic: PVPI)
Časové okno: Základní linie, 6 hodin
|
Změna od výchozího indexu plicní vaskulární permeability (PVPI; poměr) po 6 hodinách.
index plicní vaskulární permeability (PVPI) bude vypočítán zařízením PiCCO (Pulsion Medical Systems, Mnichov, Německo).
EVLWI znamená celkovou vodu v plicní tkáni, zvyšuje se u plicního edému nebo ARDS.
PVPI znamená permeabilitu plicních cév a je vždy vysoká u ARDS (syndrom akutní respirační tísně)
|
Základní linie, 6 hodin
|
Sekundární výstupní opatření
Měření výsledku |
Popis opatření |
Časové okno |
|---|---|---|
|
Autofagické biomarkery v exozomech: LC3II (Western blots)
Časové okno: 6 hodin
|
LC3II se objevují během fúze fagozom-lysomon.
Exosom bude odebrán ze séra sepse.
LC3II bude detekován a identifikován pomocí Western blotů.
|
6 hodin
|
|
Autofagické biomarkery v exozomech: LC3II (NTA)
Časové okno: 6 hodin
|
LC3II se objevují během fúze fagozom-lysomon.
Exosom bude odebrán ze séra sepse.
Později bude LC3II označen a kombinován analýzou sledováním nanočástic.
Koncentrace (částice/ml) podle velikosti (nm) nebo intenzity (a.u.) podle velikosti (nm)
|
6 hodin
|
|
Modifikátory autofagie v exozomech: mTOR (Western blots)
Časové okno: 6 hodin
|
savčí cíl rapamycinu (mTOR) může modulovat proces autofagie.
Exosom bude odebrán ze séra sepse.
mTOR bude detekován a identifikován pomocí Western blotů.
|
6 hodin
|
|
Modifikátory autofágie v exozomech: mTOR (NTA)
Časové okno: 6 hodin
|
savčí cíl rapamycinu (mTOR) může modulovat proces autofagie.
Exosom bude odebrán ze séra sepse.
mTOR bude označen a kombinován analýzou sledováním nanočástic.
Koncentrace (částice/ml) podle velikosti (nm) nebo intenzity (a.u.) podle velikosti (nm)
|
6 hodin
|
|
Autofagické modifikátory v exozomech: HSP70 (Western blots)
Časové okno: 6 hodin
|
heat-shock protein 70 (HSP70) může modulovat proces autofagie.
Exosom bude odebrán ze séra sepse.
HSP70 bude detekován a identifikován pomocí Western blotů.
|
6 hodin
|
|
Modifikátory autofagie v exozomech: HSP70 (NTA)
Časové okno: 6 hodin
|
heat-shock protein 70 (HSP70) může modulovat proces autofagie.
Exosom bude odebrán ze séra sepse.
Později bude HSP70 označen a zkombinována analýza pomocí analýzy sledování nanočástic.
Koncentrace (částice/ml) podle velikosti (nm) nebo intenzity (a.u.) podle velikosti (nm)
|
6 hodin
|
|
Modifikátory autofagie v exozomech: sekvestozom 1 (Western bloty)
Časové okno: 6 hodin
|
sekvestozom 1 (SQSMT1/p62) může modulovat proces autofagie.
Exosom bude odebrán ze séra sepse.
sekvestozom 1 bude detekován a identifikován pomocí Western blotů.
|
6 hodin
|
|
Modifikátory autofagie v exozomech: sekvestozom 1 (NTA)
Časové okno: 6 hodin
|
sekvestozom 1 (SQSMT1/p62) může modulovat proces autofagie.
Exosom bude odebrán ze séra sepse.
Později bude sekvestozom 1 označen a kombinována analýza pomocí analýzy sledování nanočástic.
Koncentrace (částice/ml) podle velikosti (nm) nebo intenzity (a.u.) podle velikosti (nm)
|
6 hodin
|
|
Marker exosomů: CD9 (Western blots)
Časové okno: 6 hodin
|
CD9 je exosomový povrchový marker.
Exosom bude odebrán ze séra sepse.
CD9 bude detekován a identifikován pomocí Western blotů.
|
6 hodin
|
|
Marker exosomů: CD9 (NTA)
Časové okno: 6 hodin
|
CD9 je exosomový povrchový marker.
Exosom bude odebrán ze séra sepse.
Později bude CD9 označen a kombinována analýza pomocí analýzy sledování nanočástic.
Koncentrace (částice/ml) podle velikosti (nm) nebo intenzity (a.u.) podle velikosti (nm)
|
6 hodin
|
|
Úmrtnost na JIP
Časové okno: Až 30 dní
|
Mortalita na JIP (%), mortalita při příjmu na JIP/celkové přijetí na JIP
|
Až 30 dní
|
|
28denní úmrtnost
Časové okno: Až 28 dní
|
28denní mortalita (%), mortalita během 28denního/celkového 28denního příjmu
|
Až 28 dní
|
|
Nemocniční úmrtnost
Časové okno: Až 90 dní
|
Nemocniční mortalita (%), mortalita během hospitalizace/celkový příjem do nemocnice
|
Až 90 dní
|
|
Délka pobytu na JIP
Časové okno: Až 30 dní
|
Délka pobytu na JIP (dny)
|
Až 30 dní
|
|
Délka pobytu v nemocnici
Časové okno: Až 90 dní
|
Délka pobytu v nemocnici (dny)
|
Až 90 dní
|
Spolupracovníci a vyšetřovatelé
Vyšetřovatelé
- Ředitel studie: Wen-Lin Su, PhD, Division of Pulmonary and Critical Care Medicine, Department of Internal Medicine, Taipei Tzu Chi Hospital
Publikace a užitečné odkazy
Obecné publikace
- Lo S, Yuan SS, Hsu C, Cheng YJ, Chang YF, Hsueh HW, Lee PH, Hsieh YC. Lc3 over-expression improves survival and attenuates lung injury through increasing autophagosomal clearance in septic mice. Ann Surg. 2013 Feb;257(2):352-63. doi: 10.1097/SLA.0b013e318269d0e2.
- Gao M, Ha T, Zhang X, Wang X, Liu L, Kalbfleisch J, Singh K, Williams D, Li C. The Toll-like receptor 9 ligand, CpG oligodeoxynucleotide, attenuates cardiac dysfunction in polymicrobial sepsis, involving activation of both phosphoinositide 3 kinase/Akt and extracellular-signal-related kinase signaling. J Infect Dis. 2013 May 1;207(9):1471-9. doi: 10.1093/infdis/jit036. Epub 2013 Jan 28.
Termíny studijních záznamů
Hlavní termíny studia
Začátek studia (AKTUÁLNÍ)
Primární dokončení (AKTUÁLNÍ)
Dokončení studie (AKTUÁLNÍ)
Termíny zápisu do studia
První předloženo
První předloženo, které splnilo kritéria kontroly kvality
První zveřejněno (AKTUÁLNÍ)
Aktualizace studijních záznamů
Poslední zveřejněná aktualizace (AKTUÁLNÍ)
Odeslaná poslední aktualizace, která splnila kritéria kontroly kvality
Naposledy ověřeno
Více informací
Termíny související s touto studií
Další relevantní podmínky MeSH
Další identifikační čísla studie
- 05-XD15-039
Informace o lécích a zařízeních, studijní dokumenty
Studuje lékový produkt regulovaný americkým FDA
Studuje produkt zařízení regulovaný americkým úřadem FDA
Tyto informace byly beze změn načteny přímo z webu clinicaltrials.gov. Máte-li jakékoli požadavky na změnu, odstranění nebo aktualizaci podrobností studie, kontaktujte prosím register@clinicaltrials.gov. Jakmile bude změna implementována na clinicaltrials.gov, bude automaticky aktualizována i na našem webu .